抗肽的抗血清制備及從多肽庫篩選B細胞和T細胞抗原表位
使用雙功能團試劑將合成肽偶聯至載體蛋白實驗步驟基 本 方 案 使用雙功能團試劑將合成肽偶聯至載體蛋白材 料家兔肽-載體的連接體（單 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 劑（F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐劑1 . 收 集 血 樣（如從耳動脈或耳靜脈），每只家兔準備 2?5m l 免 疫 前 的 血 清（單 元 1.2)。至少準備 2 只家兔，以防一只家兔死亡或者免疫接種失敗。2 . 將 0.7?L O m g 的肽-載體的連接體溶于 I m l 的 P B S ， 并 加 入 Iml F C A 徹底混溶。每只 家 兔 免 疫 接 種 I m l 這 種 穩 定 的 乳 濁 液 ，在 皮 下 多 個 位 點 接 種 ，每 個 位 點 0.1?0?2 ml (單元 1. 2 ) 。3.2?6 周 后（或檢測到免疫反應減弱時較理想；見基本方案 2)，準備一份新的乳......閱讀全文
ELISPOT方－法－檢－測－分－泌－細－胞－因－子－的－細－胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
流－式－細－胞－儀－檢－測－全－血－的－人－淋－巴－細－胞
實驗步驟基本方案材 料（打 V 項 目 見 附 錄 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉，過濾除菌單 克 隆 抗 體（標記的，未標記的或生物素化的），通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗（僅用于未標記的一抗）F T T C 標記的鏈霉
細－胞－毒－性－T－淋－巴－細－胞－的－誘－導－及－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
BrdU－檢－測－丁－細－胞－和－B－細胞增殖
實驗步驟基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
人－NK－T－細－胞－的－分－離－和－擴－增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
磁－珠－法－分－離T－細－胞－和－B－細胞
實驗步驟基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4?+細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－分－離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
B－細－胞－分－泌－抗－體－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板（Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
293T－細－胞－包－裝－和－擴－增－反－轉－錄－病－毒
實驗步驟基 本 方 案 1 磷酸鑰/DNA 沉 淀瞬時轉染 Phoenix 反轉錄包裝細胞展
巨－噬－細－胞－吞－噬－功－能－和－殺－傷－功－能－的－檢－測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－表－型－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
巨－噬－細－胞－一－氧－化－氮－的－檢－測
實驗步驟基本方案材料展開
外－源－性－抗－原－向－T－細－胞－的－呈－遞
實驗步驟基本方案 一 種 抗 原 加 工 處 理 和 呈 遞 的 檢 測 體 系材 料具有增殖能力的（如轉化的 B 細胞）或非增殖的且與 T 雜交瘤細胞 M H C 匹配的抗原呈遞細胞（單 元 7.1)D M E M -1 0 完全培養基， 37°C對數生長期的 T 雜交瘤細胞抗原：溶解于水的蛋白質
NK/L－A－K－細－胞－殺－傷－活－性－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
B－細－胞－功－能－的－增－殖－檢－測－方－法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞（單 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
巨－噬－細－胞－抗－腫－瘤－活－性－的－檢－測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
PCR－檢－測－細－胞－因－子－m－R－N－A－的表達
實驗步驟基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表達水平材 料內參照：轉 錄 質 粒 載 體（含有臨床生物檢測標本相關的c D N A )胍鹽溶液50 U/ul RNasin5 X 反轉錄酶緩沖液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
淺談生料細度和水泥細度的合理指標
從、高產、低耗的全面要求來看，在保證質量與經濟合理的前提下，一般生料細度和水泥細度都要有一個合理的控制指標。細度細的水泥加水后，水化反應快，凝結硬化快，早期強度高；但磨的過細時，水泥球磨機的產量驟減，粉磨電耗急增，研磨體和襯板消耗也顯著上升，同時對水泥 性能也產生不利影響。控制出磨水泥的細度，一是為
P－C－R－檢－測－小－鼠－T－細－胞－受－體－表－達
實驗步驟?基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表達材 料正常小鼠的組織勻漿或者是 H B S S 制備的單個細胞懸液（IO4?IO7) (附 錄 1)無菌水展開
P－C－R－檢－測－人－T－細－胞－受－體－基－因－的－表－達
實驗步驟?基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展
干細胞的鑒定實驗——流－式－細－胞－儀－檢－測－分－析－技－術
實驗步驟流 式 細 胞 儀 檢 測 分 析 技 術實 驗 材 料(1) 不同來源的干細胞，細胞數不少于 5xl0?5?個/管。(2) 熒光標記的抗體或抗體及熒光二抗。(3)PBS。實 驗 步 驟(1) 將 細 胞 用 PBS 充分洗滌后重懸于 5000 PBS 中，如果細胞收集和鑒定不能同天完成，可
T－細－胞－中－絲－裂－原－活－化－的－蛋－白－激－酶（MAPK)－活性分析
實驗步驟基 本 方 案 1 免疫復合物蛋白激酶測定此方法可用于測定 E R K 、 J N K 和 p38 M A P K 的活性，也可使用針對每個 M A P K組分的商品化抗體。然而，特定的抗體對各組分內特定的亞型會顯示一定的特異性。材 料基本方案 2 固相蛋白激酶法檢測 J N K 活性這種方
如何提高球磨機產量和細度
球磨機作為一種通用磨礦設備，被廣泛用于選礦,建材及化工等行業,球蘑機可分為干式濕式兩種磨礦方式。根據排礦方式不同，可分格子型球磨機溢流型球磨機兩種。通常來說，提高球磨機產量直接途徑有3種：1．磨機前加置細碎機；2．改進粉磨系統，提高粉磨效率；3．加置高效選粉機。上述3種方法，任何1種都可以大幅度提高
淋－巴－細－胞－活－化－過－程－中－肌－醇－磷－脂－周－轉－的－分－析
實驗步驟基 本 方 案 1 通 過 道 威 克 斯（DOWEX) 離 子 交 換 層 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸材料備 選 方 案 通 過 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸附加材料[3?H ] InsP 樣 本（見基本方案，步 驟 6) 和標準品除 氣 的 H PLC 級水2mol/
人胚胎干細胞系:衍生與培養實驗——細－胞－培－養－基－成－分
實驗步驟2.2.5 BRL-條件培養基B R L 細胞在大鼠肝細胞培養基（BRL-CM) 中生長至匯合，用新鮮培養基更換一次 ， 3 天后收集這些培養基。所有培養基用無菌的、孔 徑 0.2um 的 P E S 濾膜過濾，特別是來自其他細胞類型的條件培養基。應該注意的是：在細胞分化研究中可能被用到的生
胞內運輸的概念和組成
胞內運輸(intracellular transport)是真核生物細胞內膜結合細胞器與細胞內環境進行的物質交換。包括細胞核、線粒體、葉綠體、溶酶體、過氧化物酶體、高爾基體和內質網等與細胞內的物質交換。
胞內受體的種類和分化
胞內受體又可分為核內受體和胞漿受體，如雄激素、雌激素、孕激素及甲狀腺素受體位于核內，而糖皮質激素受體位于胞漿中。類固醇激素與胞內受體結合后，可使受體的構象發生改變，暴露出DNA結合區。在胞漿中形成的類固醇激素-受體復合物以二聚體形式穿過核孔進入核內。在核內，激素-受體復合物作為轉錄因子與DNA特異基
刮板細度計的簡介和參數
刮板細度計采用國家指定鋼材制作（鉬釩）本產品用不銹鋼材質制作，用于測定涂料、漆漿、油墨和其它液體及漿狀物中顏料及雜質顆粒大小和分散程度，從而控制被分散產品在生產﹑存儲和應用中的的質量。 基本介紹 細度板用于對被分散產品在生產、存儲和應用過程中的細度檢測，諸如應用于：油漆、塑料、顏料、印刷油墨
低熒光率網織紅胞和高熒光率網織紅胞
低熒光率網織紅胞和高熒光率網織紅胞是檢驗主管技師考試的內容， （1）骨髓移植：網織紅細胞計數是監測骨髓造血恢復的重要參數，通常移植成功后網織紅細胞比白細胞提前3～4d增高。HFR增高提示有較多未成熟細胞從骨髓進入外周血，故HFR變化比網織紅細胞計數變化具有更重要意義。 （2）貧血：溶血性貧