流式細胞儀檢測全血的人淋巴細胞
實驗步驟基本方案材 料(打 V 項 目 見 附 錄 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉,過濾除菌單 克 隆 抗 體(標記的,未標記的或生物素化的),通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗(僅用于未標記的一抗)F T T C 標記的鏈霉親和素或 P E 標記的鏈霉親和素(僅用于生物素化的一抗)裂解液:如低滲平衡鹽溶液,去離子水, A C K 裂 解 液(附 錄 1),或商品化的裂解液(如 FACs-Iyse, Becton-Dickinson; Immuno-lyse, Coulter; Whole BloodLyse and Fix reagent, Gen Trak)1 % (m /V ) 多聚甲醛, p H 7.412m m X 75m m 圓 底 離 心 管(Falcon)Beckman 帶 有 JS-4. 2 轉子的 J-6M 冷 凍 離 心 機(或替代離......閱讀全文
流-式-細-胞-儀-檢-測-全-血-的-人-淋-巴-細-胞
實驗步驟基本方案材 料(打 V 項 目 見 附 錄 1)全血,通 常 用 E D T A 抗凝P B S ,有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉,過濾除菌單 克 隆 抗 體(標記的,未標記的或生物素化的),通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗(僅用于未標記的一抗)F T T C 標記的鏈霉
干細胞的鑒定實驗——流-式-細-胞-儀-檢-測-分-析-技-術
實驗步驟流 式 細 胞 儀 檢 測 分 析 技 術實 驗 材 料(1) 不同來源的干細胞,細胞數不少于 5xl0?5?個/管。(2) 熒光標記的抗體或抗體及熒光二抗。(3)PBS。實 驗 步 驟(1) 將 細 胞 用 PBS 充分洗滌后重懸于 5000 PBS 中,如果細胞收集和鑒定不能同天完成,可
ELISPOT方-法-檢-測-分-泌-細-胞-因-子-的-細-胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液:含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液:含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基(或其他適宜培養基)分泌細胞因子的細胞(小鼠或人的)絲裂原,抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
細-胞-毒-性-T-淋-巴-細-胞-的-誘-導-及-檢-測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意:反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源:未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞(見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源:未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞(見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
B-細-胞-分-泌-抗-體-的-檢-測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞(P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板(Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) , 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
BrdU-檢-測-丁-細-胞-和-B-細胞增殖
實驗步驟基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液(口 服用)或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液(注射用)P B S , p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
巨-噬-細-胞-一-氧-化-氮-的-檢-測
實驗步驟基本方案材料展開
小-鼠-巨-噬-細-胞-的-表-型-檢-測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管,將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
P-C-R-檢-測-人-T-細-胞-受-體-基-因-的-表-達
實驗步驟?基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展
PCR-檢-測-細-胞-因-子-m-R-N-A-的表達
實驗步驟基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表達水平材 料內參照:轉 錄 質 粒 載 體(含有臨床生物檢測標本相關的c D N A )胍鹽溶液50 U/ul RNasin5 X 反轉錄酶緩沖液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
巨-噬-細-胞-抗-腫-瘤-活-性-的-檢-測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
B-細-胞-功-能-的-增-殖-檢-測-方-法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料(帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞(單 元 2. 5),采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
NK/L-A-K-細-胞-殺-傷-活-性-的-檢-測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
P-C-R-檢-測-小-鼠-T-細-胞-受-體-表-達
實驗步驟?基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表達材 料正常小鼠的組織勻漿或者是 H B S S 制備的單個細胞懸液(IO4?IO7) (附 錄 1)無菌水展開
巨-噬-細-胞-吞-噬-功-能-和-殺-傷-功-能-的-檢-測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞:如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1,需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯],或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液(balanced salt solution, BSS)細菌(如單核
人-NK-T-細-胞-的-分-離-和-擴-增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基,含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選)流 式 細 胞 緩 沖 液(flow cytometry buffer, FCbuffer
血檢可測人體生物鐘
據英國《每日郵報》9月10日報道,美國芝加哥西北大學研究員發現晝夜節律失調和糖尿病、抑郁等多種疾病的聯系,并研究出名為“時間記號”的血液檢測,用于檢測人體生物鐘,以此調整病人作息時間并預防多種潛在致命疾病的威脅。 人體生物鐘可指明晝夜節律,比如人體睡眠覺醒周期。研究團隊發現,有些人的生物鐘和實
血細包分裂
一是有絲分裂(間接分裂) 在細胞分裂時,有特殊的絲體出現,故稱為有絲分裂。有絲分裂是血細胞增殖的主要形式。正常人循環血中不出現有絲分裂細胞。有絲分裂細胞在造血組織中的數量,反映其增殖的程度和狀態。分裂過程可分為4期,主要表現在核的變化上。 (1)前期(又稱單絲球期):細胞開始分裂時,胞體變成
人全血Foxp3實驗步驟
需要試劑Human?Regulatory?T?Cell?Whole?Blood?Staining?Kit?(#88-8996-40)包含組分:(1)、1X?RBC?Lysis?Buffer:?200?mL (2)、Flow?Cytometry?Staining?Buffer:?600?mL (3)、
人末梢血微量全血培養染色體顯示法
實驗概要? ? ? ? 人末梢血微量全血培養染色體顯示法實驗步驟1.培養液準備:取15ml培養瓶數個,每瓶內分別充入5ml培養液(pH 7.2),內含:1640培養液(含10%~15%小牛血清),PHA 0.1ml,青霉素100單位和鏈霉素100微克/毫升?培養液2.抽血針管準備:取2~5ml針管一
T-細-胞-克-隆-的-建-立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生,但如果細胞在初次混合淋巴細胞(M L C ) 中第一次被同種抗原刺激,反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
小-鼠-巨-噬-細-胞-的-分-離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠,潔 凈 環 境 中 飼 養(最好置層流柜中飼養)7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯(Brewerthioglycollate medium,分離炎性腹腔巨嗤細
822人末梢全血5種無機元素分析
分析5種無機元素在不同年齡段的變化情況.方法:用原子吸收光譜法測定了822名受試者末梢全血中銅、鋅、鐵、鈣和鎂濃度,并將受試者按年齡分為4個組進行統計學分析.結果:嬰兒組(A組)微量元素銅與幼兒組(B組)、學齡前兒童組(C組)和學齡兒童及成人組(D組)均存在明顯差異;微量元素鋅在各組之間均存在明顯差
微量元素分析儀發檢和血檢方式對比
微量元素分析主要用于衛生防疫、醫院、婦幼保健質量監視、環保科研高校等部門做各種微量剖析與痕量分析。經過對樣品微量元素的分析給用戶提供一些可行性分析察看數據,以便對人體健康及營養停止監控。儀器集電位溶出剖析和極譜伏安于一體,這可以大大增加儀器的檢測范圍值。微量元素分析儀也叫微量元素檢測儀,其功用多、操
指夾式血氧儀
通過依次驅動一個紅光LED(660nm)和一個紅外光LED(910nm),藍色線條表示血紅蛋白不帶氧分子的時候接收管對還原血紅蛋白感應曲線,從曲線圖中可以看下還原血紅蛋白對660nm紅光的吸收比較強,而對910nm紅外光的吸收長度比較弱。紅色線條表示血紅蛋白并帶有氧分子的血紅細胞時接收管對氧合血
全血錳的概述
人體內含錳12-18mg。錳主要在腸道吸收,通過肝臟隨膽汁排入糞便,少量可由腸道再吸收。經尿排泄的錳尚不到總排出量的10%。骨骼中錳積蓄量約占全身總量43%。由于錳參與多種酶的組成和激活作用,既與蛋白質合成有關,又可改善動脈粥樣硬化者的脂質代謝。錳還能促進鐵吸收和利用,參與黏多糖合成(黏多糖是軟
全血輸血的應用
全血是指血液的全部成分,包括各種血細胞及血漿中各種成分,還有抗凝劑及保存液。全血有保存全血及新鮮全血之分,常用的是保存4±2攝氏度的全血。新鮮全血定義難以統一規定,要依輸血的目的而定,為了補充新鮮的紅細胞,可用保存5天的ACD全血或10天的CPD全血;如同時還要補充血小板或白細胞,則應分別用保存1天
老年人胃食管反流病的食管測壓檢查
可測LES的長度和部位,LES壓、LES松弛壓、食管上括約肌壓及食管體部壓力等。能顯示LES壓低下,LES頻發的松弛及食管蠕動收縮波幅低下或消失,這些正是胃食管反流的運動病理基礎,如LES壓<6mmHg易導致反流。由于正常人與胃食管反流者二組測得的LES壓數據范圍有重疊,用本檢查判斷胃食管反流不
從全血里純化單個核細胞(人、大鼠和小鼠)
所需儀器:XL03RH型控溫離心機(低速冷凍離心機,可使用24*15ml離心管,水平轉子);抽血注射器(大小與抽血體積相一致)試劑:Optiprep;Tricine-緩沖鹽溶液(TBS,僅小鼠血)0.85%(質量濃度)NaCl,10mmol/L Tricine-NaOH(ph = 7.4)。?方法:
人胚胎干細胞系:衍生與培養實驗——細-胞-培-養-基-成-分
實驗步驟2.2.5 BRL-條件培養基B R L 細胞在大鼠肝細胞培養基(BRL-CM) 中生長至匯合,用新鮮培養基更換一次 , 3 天后收集這些培養基。所有培養基用無菌的、孔 徑 0.2um 的 P E S 濾膜過濾,特別是來自其他細胞類型的條件培養基。應該注意的是:在細胞分化研究中可能被用到的生