PCR檢測人T細胞受體基因的表達
實驗步驟 基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展......閱讀全文
P－C－R－檢－測－人－T－細－胞－受－體－基－因－的－表－達
實驗步驟?基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展
P－C－R－檢－測－小－鼠－T－細－胞－受－體－表－達
實驗步驟?基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表達材 料正常小鼠的組織勻漿或者是 H B S S 制備的單個細胞懸液（IO4?IO7) (附 錄 1)無菌水展開
ELISPOT方－法－檢－測－分－泌－細－胞－因－子－的－細－胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－表－型－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
B－細－胞－分－泌－抗－體－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板（Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
流－式－細－胞－儀－檢－測－全－血－的－人－淋－巴－細－胞
實驗步驟基本方案材 料（打 V 項 目 見 附 錄 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉，過濾除菌單 克 隆 抗 體（標記的，未標記的或生物素化的），通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗（僅用于未標記的一抗）F T T C 標記的鏈霉
PCR－檢－測－細－胞－因－子－m－R－N－A－的表達
實驗步驟基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表達水平材 料內參照：轉 錄 質 粒 載 體（含有臨床生物檢測標本相關的c D N A )胍鹽溶液50 U/ul RNasin5 X 反轉錄酶緩沖液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
細－胞－毒－性－T－淋－巴－細－胞－的－誘－導－及－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
BrdU－檢－測－丁－細－胞－和－B－細胞增殖
實驗步驟基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
巨－噬－細－胞－一－氧－化－氮－的－檢－測
實驗步驟基本方案材料展開
NK/L－A－K－細－胞－殺－傷－活－性－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
B－細－胞－功－能－的－增－殖－檢－測－方－法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞（單 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
巨－噬－細－胞－抗－腫－瘤－活－性－的－檢－測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
干細胞的鑒定實驗——流－式－細－胞－儀－檢－測－分－析－技－術
實驗步驟流 式 細 胞 儀 檢 測 分 析 技 術實 驗 材 料(1) 不同來源的干細胞，細胞數不少于 5xl0?5?個/管。(2) 熒光標記的抗體或抗體及熒光二抗。(3)PBS。實 驗 步 驟(1) 將 細 胞 用 PBS 充分洗滌后重懸于 5000 PBS 中，如果細胞收集和鑒定不能同天完成，可
巨－噬－細－胞－吞－噬－功－能－和－殺－傷－功－能－的－檢－測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核
人－NK－T－細－胞－的－分－離－和－擴－增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
人胚胎干細胞系:衍生與培養實驗——細－胞－培－養－基－成－分
實驗步驟2.2.5 BRL-條件培養基B R L 細胞在大鼠肝細胞培養基（BRL-CM) 中生長至匯合，用新鮮培養基更換一次 ， 3 天后收集這些培養基。所有培養基用無菌的、孔 徑 0.2um 的 P E S 濾膜過濾，特別是來自其他細胞類型的條件培養基。應該注意的是：在細胞分化研究中可能被用到的生
抗－體－的－體－內－誘－導－和－檢－測
實驗步驟基 本 方案 1 蛋白質或多糖抗原體內法誘導抗體的產生材 料人外周血類毒素混合物： 25Lf U/ml 白 喉 類 毒 素（Connaught Laboratories 或 State Laboratoriy Institute of Massachusetts) 與 IOLf U/ml 破
ELISA檢－測－抗－體－的－含－量
實驗步驟基 本 方案材 料展開?
Fcγ－受－體－介－導－的－黏－附－作－用－和－吞－噬－作－用－的－檢－測
實驗步驟基本方案 FcY 受體介導的吞噬作用材 料原代巨噬細胞或巨噬細胞株（單 元 6.1 和 8. 5)R P M I -5 完 全 培 養 基（或其他培養基）綿 羊 紅 細 胞（S R B C ) ，用 Alsever 溶 液 I : I (V /V ) 稀 釋（附 錄 1)生理鹽水： 0. 9
河北：2793人因損害發展環境受處理
去年1月至今年3月，全省紀檢監察機關共受理損害發展環境投訴舉報3746件，對2793名責任人員進行了處理。這是5月23日記者從省政府新聞辦召開的新聞發布會上獲得的消息。 為服務、保障和促進改善發展環境，發揮紀檢監察職能作用，我省印發了《關于紀檢監察機關建立發展環境和生態環境問題投訴舉報快速
IL－2－和－IL－4－的檢測實驗
實驗步驟基 本 方 案 采 用 CTLL- 2 細 胞 檢 測 小 鼠 IL - 2 和 IL -4材 料較 總 T C G F 和 抗 IL-4 存在時的 T C G F 單位數獲得。通過比較抗 IL-4 抗體存在下的T C G F 活性和兩種抗體都存在下的 T C G F 活性的不同來計算 IL
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－分－離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
合胞體的定義
含有由一層細胞膜包繞的多個核的一團細胞質，這通常是由于發生了細胞融合或一系列不完全細胞分裂周期所致。
T細胞克隆的建立
基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用）V D
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗（三）
2.2 糖基化糖 基 化 是 一 種 常 見 的 P T M , 并 且 已 經 證 明 能 夠 影 響 酶 的 活 性 、蛋 白 質 定 位 、穩 定 性 、信 號 轉 導 、細 胞 黏 附 和 蛋 白 質 相 互 作 用 (Spiro, 2002k 目 前 已 經 發 現 在 腫 瘤 惡
細螺旋體病的介紹
細螺旋體病是一種人畜共患病，由于致病菌極易在污水中繁殖，洪水發生后很容易引發細螺旋體病的傳播。該病的早期癥狀包括高燒、流口水、眼睛紅腫及“茶色”尿液，如病菌入侵腎臟、肺和心臟可危及生命。是由鉤端螺旋體感染產生的感染癥，是熱帶、亞熱帶地區常見的人畜共通感染病。鉤端螺旋體為細桿狀螺旋型，兩端呈現鉤狀
γ干－擾－素－的－檢－測
實驗步驟基本方案材 料展
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗
蛋白質翻譯后修飾 (PTM) 在細胞生物調節中發揮著基本作用。PTM 是 mRNA 翻譯后蛋白質的酶促共價化學修飾。蛋白質化學修飾非常重要，因為它們會潛在地改變蛋白質的物理或化學性質、組成、活性、細胞定位或穩定性。實際上，在氨基酸或蛋白質的 N 端或 C 端加入或移除化學基團會導致大部分蛋白質發生變