磁珠法分離T細胞和B細胞
實驗步驟基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4 +細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2 2 0 ) 磁 珠（Miltenyi)RPMI-10 完全培養基autoMACS 系 統 和 分 選 柱（Miltenyi)30um 尼 龍 網（BD) 或 40/xm 預 分 離 濾 膜（Miltenyi)1 . 用 2 只小鼠的脾臟制備單細胞懸液并去除紅細胞（單 元 2.1)。2.將細胞在 10 ml HBSS 洗滌緩沖液中混懸后用血細胞計數器計數（附 錄 3A)。3.將細胞懸液在 4℃， 20og離心 10min。棄上清后將沉淀按每 108 個細胞 0.9ml MACS緩沖液的比例混懸。每 108 ......閱讀全文
磁－珠－法－分－離T－細－胞－和－B－細胞
實驗步驟基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4?+細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2
疫－磁－珠－法－分－離－B－細胞亞群
實驗步驟基本方案材 料抗 凝 血（附 錄 3 G) ， 或 者 從 全 外 周 血 中（單 元 8 . 1 ) 或 組 織 中（單 元 7. 8 ) 分離的新 鮮 PBM C 或冷藏保存的 PBMC (附錄 3B)1 % FBS (熱滅活）溶于冷的 PBS (附 錄 1 ，無鈣離子）中免疫磁珠偶聯的
人－NK－T－細－胞－的－分－離－和－擴－增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
磁珠法分離T細胞和B細胞
基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4 + 細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2 2
磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞
PriCells: 磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞?基本方案用AUTOMACS系統進行總T細胞、CD4+細胞或CD8+T細胞的自動分離?實驗材料1、小鼠2、HBSS洗滌緩沖液3、MACS緩沖液4、磁珠5、RPMI-10完全培養基6、AUTOMACS系統和分選柱7、30μm尼龍網或40μm預分離濾膜?實
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－分－離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
ELISPOT方－法－檢－測－分－泌－細－胞－因－子－的－細－胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
在擴增T細胞的過程中，為何使用Dynabeads?磁珠活化后細...
在擴增T細胞的過程中，為何使用Dynabeads?磁珠活化后細胞發生死亡？提供一些保持細胞最優生長條件的提示：·保持0.5– 1.5 x 10E6個細胞/mL的細胞最佳生長密度非常重要。當細胞密度超過1.5-2.5 x 10E6個細胞/mL時，就需要重新進行刺激。·請按照產品手冊中提供的磁珠:細胞比
免疫磁珠法檢測熒光假單胞菌的介紹
免疫磁珠技術可以快速的富集乳制品中低濃度的菌，通過結合 PCR、ELISA等方法可以達到快速、準確的檢測目的。呂琦等人通過對 4 中菌保守序列基因設計引物，建立多重 PCR 體系，在7-8h檢測時間內，檢測靈敏度達到 102CFU/mL，具有特異性。免疫磁珠技術檢測在各個方面都表現出一定優勢，改
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
磁珠法核酸提取過程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均勻。然后把EP管置于恒溫水箱中溫育15～20min。2、結合?????將EP管從溫育設備中取出，離心后取上清，加入振蕩混勻的磁珠結合液，顛倒混勻。將EP管置于磁力架上進行磁分離，棄廢液（吸凈管蓋及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
磁珠法核酸提取過程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均勻。然后把EP管置于恒溫水箱中溫育15～20min。2、結合?????將EP管從溫育設備中取出，離心后取上清，加入振蕩混勻的磁珠結合液，顛倒混勻。將EP管置于磁力架上進行磁分離，棄廢液（吸凈管蓋及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依據與硅膠膜離心柱相同的原理，運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結合。利用氧化硅納米微球的超順磁性，在Chaotropic鹽（鹽酸胍、異硫氰酸胍等）和外加磁場的作用下，能從血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
磁珠法核酸提取過程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均勻。然后把EP管置于恒溫水箱中溫育15～20min。2、結合?????將EP管從溫育設備中取出，離心后取上清，加入振蕩混勻的磁珠結合液，顛倒混勻。將EP管置于磁力架上進行磁分離，棄廢液（吸凈管蓋及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
磁珠法核酸提取過程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均勻。然后把EP管置于恒溫水箱中溫育15～20min。2、結合?????將EP管從溫育設備中取出，離心后取上清，加入振蕩混勻的磁珠結合液，顛倒混勻。將EP管置于磁力架上進行磁分離，棄廢液（吸凈管蓋及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依據與硅膠膜離心柱相同的原理，運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結合。利用氧化硅納米微球的超順磁性，在Chaotropic鹽（鹽酸胍、異硫氰酸胍等）和外加磁場的作用下，能從血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
磁珠法核酸提取過程：1、裂解取抗凝全血到1.5mLEP管中，加入BufferA、BufferB，混合均勻。然后把EP管置于恒溫水箱中溫育15～20min。2、結合?????將EP管從溫育設備中取出，離心后取上清，加入振蕩混勻的磁珠結合液，顛倒混勻。將EP管置于磁力架上進行磁分離，棄廢液（吸凈管蓋及管
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依據與硅膠膜離心柱相同的原理，運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結合。利用氧化硅納米微球的超順磁性，在Chaotropic鹽（鹽酸胍、異硫氰酸胍等）和外加磁場的作用下，能從血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
取10-20mg左右的組織，用液氮研磨為粉末，轉入1.5mL 離心管內，加入100 μL 生理鹽水，振蕩15秒 （或直接在100 μL 生理鹽水中將組織勻漿為細胞懸液），加入200 μL 裂解液， 20 μL biog復合消化液，充分混勻，56℃溫育12分鐘（如組織勻漿不充分，可適當延長消化時間至組
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取原理
磁珠法核酸提取原理;依據與硅膠膜離心柱相同的原理，運用納米技術對超順磁性納米顆粒的表面進行改良和表面修飾后，制備成超順磁性氧化硅納米磁珠。該磁珠能在微觀界面上與核酸分子特異性地識別和高效結合。利用氧化硅納米微球的超順磁性，在Chaotropic鹽（鹽酸胍、異硫氰酸胍等）和外加磁場的作用下，能從血液、
磁珠法核酸提取的磁珠法核酸提取過程
取10-20mg左右的組織，用液氮研磨為粉末，轉入1.5mL 離心管內，加入100 μL 生理鹽水，振蕩15秒 （或直接在100 μL 生理鹽水中將組織勻漿為細胞懸液），加入200 μL 裂解液， 20 μL biog復合消化液，充分混勻，56℃溫育12分鐘（如組織勻漿不充分，可適當延長消化時間至組
熒光性假單胞菌的免疫磁珠法檢測介紹
免疫磁珠技術可以快速的富集乳制品中低濃度的菌,通過結合 PCR、ELISA等方法可以達到快速、準確的檢測目的。呂琦等人通過對 4 中菌保守序列基因設計引物,建立多重 PCR 體系,在7-8h檢測時間內,檢測靈敏度達到 102CFU/mL,具有特異性。免疫磁珠技術檢測在各個方面都表現出一定優勢,改
細－胞－毒－性－T－淋－巴－細－胞－的－誘－導－及－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
什么是磁珠法
那個磁珠就是在外面包被的有基團可以把DNA從細胞中提取出來的微粒
磁珠法提純mRNA
實驗概要真核細胞的mRAN是單順反子，其最顯著的特征是具有５'端帽子結構和3'端的poly A的結構，此poly A結構為mRNA的提取提供了有效的途徑，人們利用堿基配對原理，采用寡聚Ｔ結構作為親和柱材料，當含mRNA的總RNA樣品流經寡聚Ｔ柱時，mRAN即被特異性的結合到柱
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
免疫磁珠法分離細胞原理/MACS微珠/MACS分選柱
免疫磁珠法分離細胞原理? ? ? ??免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。二、MACS微珠（Micro
氨基磁珠和免疫磁珠的技術及應用
??? 一、磁珠的概念??? 磁珠是由磁性微粒與各種含活性功能基團的材料復合而成的具有一定磁性及特殊表面結構的粒子。磁珠的研究始于20世紀70年代，國內在20世紀80年代以來日漸活躍，磁珠表面通過共聚合和表面改性，可被修飾上多種活性功能基團，如羧基、醛基、氨基等，可以共價結合酶、細胞、抗體、
氨基磁珠和免疫磁珠的技術及應用
?一、磁珠的概念??? 磁珠是由磁性微粒與各種含活性功能基團的材料復合而成的具有一定磁性及特殊表面結構的粒子。磁珠的研究始于20世紀70年代，國內在20世紀80年代以來日漸活躍，磁珠表面通過共聚合和表面改性，可被修飾上多種活性功能基團，如羧基、醛基、氨基等，可以共價結合酶、細胞、抗體、蛋白質等多種生
磁珠法的檢測原理
在檢測杯中加入磁珠，應用兩個相對的、獨立的、可選擇性的磁力線圈產生恒定磁場，驅動磁珠在檢測杯中擺動，其中垂直方向的線圈感應并檢測磁珠的運動，血漿不發生凝固反應時，粘度不變，磁珠以恒定的振幅擺動；血漿凝固反應時，形成纖維蛋白，血漿粘度增加，磁珠的運動振幅衰減，當振幅衰減到原來的50％時，計為凝固終點。
磁珠法核酸提取過程
可參考BIOG磁珠法請自行準備：無水乙醇、異丙醇、1.5mL離心管，生理鹽水。↓取出洗滌液，按70%比例加入無水乙醇，如6mL加入14 mL無水乙醇，12mL加入28 mL無水乙醇，混勻。↓取10-20mg左右的組織，用液氮研磨為粉末，轉入1.5mL 離心管內，加入100 μL 生理鹽水，振蕩15秒