DNA探針的種類及其特點
核酸探針按性質劃分可分為基因組 DNA 探針、cDNA 探針、RNA 探針和人工合成的寡核苷酸探針等幾類。作為診斷試劑,較常使用的是基因組 DNA 探針和 cDNA 探針。其中,前者的應用最為廣泛,它的制備可通過酶切或聚合酶鏈反應(PCR)從基因組中獲得特異的 DNA 后將其克隆到質粒或噬菌體載體中,隨著質粒的復制或噬菌體的增殖而獲得大量高純度的 DNA 探針。將 RNA 進行逆轉錄,所獲得的產物即為 cDNA。cDNA 探針適用于 RNA 病毒的檢測。cDNA 探針序列也可克隆到質粒或噬菌體中,以便大量制備。將信息 RNA(mRNA)標記也可作為核酸分子雜交的探針。但由于來源極不方便,且 RNA 極易被環境中大量存在的核酸酶所降解,操作不便,因此應用較少。用人工合成的寡聚核苷酸片段作為核酸雜交探針的應用十分廣泛,可根據需要合成相應的序列,可合成僅有幾十個 bp 的探針序列,對于檢測點突變和小段堿基的缺失或插入尤為適用。核酸探針......閱讀全文
DNA探針的種類及其特點
核酸探針按性質劃分可分為基因組 DNA 探針、cDNA 探針、RNA 探針和人工合成的寡核苷酸探針等幾類。作為診斷試劑,較常使用的是基因組 DNA 探針和 cDNA 探針。其中,前者的應用最為廣泛,它的制備可通過酶切或聚合酶鏈反應(PCR)從基因組中獲得特異的 DNA 后將其克隆到質粒或噬菌體載體中
常見RNA探針及其特點
常見RNA探針及其特點：RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種：即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。?cRNA探針：是以cDNA為模板，通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針
DNA探針根據其來源劃分的種類
一種來自基因組中有關的基因本身，稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA，再通過逆轉錄得到的探針，稱為cDNa 探針（cDNa probe）。與基因組探針不同的是，cDNA探針不含有內含子序列。此外，還可在體外人工合成堿基數不多的與基因序列互補的DNA片段
羧肽酶的種類及其特點
根據羧肽酶活性中心含有絲氨酸殘基、金屬離子和半胱氨酸殘基的不同，將羧肽酶分為絲氨酸羧肽酶(EC3.4.16.-).金屬羧肽酶(EC3.4.17.-)和半胱氨酸羧肽酶(EC3.4.18.-)。絲氨酸羧肽酶絲氨酸羧肽酶(Seinecarboxypeptidases,SCP)又稱酸性羧肽酶，是一類真核生物
羧肽酶的種類及其特點
根據羧肽酶活性中心含有絲氨酸殘基、金屬離子和半胱氨酸殘基的不同，將羧肽酶分為絲氨酸羧肽酶(EC3.4.16.-).金屬羧肽酶(EC3.4.17.-)和半胱氨酸羧肽酶(EC3.4.18.-)。絲氨酸羧肽酶絲氨酸羧肽酶(Seinecarboxypeptidases,SCP)又稱酸性羧肽酶，是一類真核生物
DNA探針的概念和應用特點
DNA探針（DNA probe）是最常用的核酸探針，為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA，用特殊示蹤劑（如同位素、酶或有色基團）進行標記；在適當的pH值、溫度和離子強度下，DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性，能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
“DNA探針”的技術依據
DNA探針根據其來源分為3種:一種來源于基因組中的基因本身,稱為基因組探針(genomic probe),可以是基因的全序列,或者基因上的一段序列;另一種是從相應的基因經轉錄獲得mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針(cDNA probe);此外,還可在體外人工合成20～50個堿基的與基
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的性能優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中,制備方法簡便;②DNA探針相對RNA探針(RNA probe)而言不易降解,一般能有效抑制DNA酶活性;③DNA探針的標記方法較成熟,可用同位素或非同位素標記,有多種方法可供選擇。
“DNA探針”的制備過程
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針,常常是比較煩瑣的。以細菌為例,細菌的基因組大小約為5×106堿基,約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針,通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法,即將細菌DNA切成小片段后(如用限制性內切酶做不完全水解)分別
DNA探針的制備方法
基因組DNA探針的獲得有賴于分子克隆技術的發展和應用。要得到一種特異性DNA探針，常常是比較煩瑣的。以細菌為例，細菌的基因組大小約為5×106堿基，約含3000個基因。要獲得某細菌特異的核酸探針，通常要采取建立細菌基因組DNA文庫的辦法，即將細菌DNA切成小片段后（如用限制性內切酶做不完全水解）分別
DNA探針的功能特性
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板,人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段,可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合,經放射自顯影或其他檢測手段就可以
DNA探針的來源介紹
DNA探針根據其來源有3種：一種來自基因組中有關的基因本身,稱為基因組探針（genomic probe）；另一種是從相應的基因轉錄獲得了mRNA,再通過逆轉錄得到的探針,稱為cDNA探針（cDNA probe）。與基因組探針不同的是,cDNA探針不含有內含子序列。此外,還可在體外人工合成堿基數不
什么是“DNA探針”？
DNA探針(DNA probe)是最常用的核酸探針,為長度在幾十到幾百甚至上千堿基對的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團)進行標記;在適當的pH值、溫度和離子強度下,DNA探針利用分子的變性、復性以及堿基互補配對的高度精確性,能與待測樣本中互補的非標記單鏈DNA或RNA以氫鍵結合
DNA突變的種類
基因突變可以是自發的也可以是誘發的。自發產生的基因突變型和誘發產生的基因突變型之間沒有本質上的不同，基因突變誘變劑的作用也只是提高了基因的突變率。 按照表型效應，突變型可以區分為形態突變型、生化突變型以及致死突變型等。這樣的區分并不涉及突變的本質，而且也不嚴格。因為形態的突變和致死的突變必然有
DNA片段探針的應用實驗
實驗材料 DNA試劑、試劑盒 雜交液洗膜液儀器、耗材 注射器超聲儀水浴鍋實驗步驟 1. ?用5~20 ml 雜交液Ⅰ依次浸泡10~20張硝酸纖維素濾膜。濾膜裝入雜交袋中，加入足夠的雜交液，密封后42℃預雜交1 h。?2. ?往帶螺蓋的試管中，加入放射性探針和2 mg 超聲波處理的鯡魚精DNA，煮沸1
DNA探針的標記實驗
探針標記法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一
DNA片段探針的應用實驗
甲酰胺法 水溶液中雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒
關于DNA探針的應用介紹
DNA探針可以用來診斷寄生蟲病，現場調查及蟲種鑒定，可用于病毒性肝炎的診斷，遺傳性疾病的診斷，可用于檢測飲用水病毒含量。具體方法：用一個特定的DNA片段制成探針，與被測的病毒DNA雜交，從而把病毒檢測出來。與傳統方法相比具有快速、靈敏的特點。傳統的檢測一次，需幾天或幾個星期的時間，精確度不高，而
DNA探針的技術優勢
①DNA探針多克隆在質粒載體中，制備方法簡便；②DNA探針相對RNA探針（RNA probe）而言不易降解，一般能有效抑制DNA酶活性；③DNA探針的標記方法較成熟，可用同位素或非同位素標記，有多種方法可供選擇。
DNA探針的標記實驗
核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針；根據標記物不同，可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類；根據是否存在互補鏈，可分為單鏈和雙鏈探針；根據放射性標記物摻入情況，可分為均勻
DNA探針的標記實驗
實驗方法原理?分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一條用某種可以檢測的進行標記，這條鏈就稱為核酸探針。因此，核酸探針的制備是分子雜交技術的關鍵。放射性同位素標記是最早采用的也是目前最常用的核酸探針標記方法。
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素
DNA探針檢測法的原理
原理：堿基互補配對。。探針：DNA單鏈－化學連接的標記基團探針和目標DNA（經過加熱，分成單鏈）混合，探針結合的目標DNA就會被標記
DNA探針原位雜交
1、4—6微米切片,用防脫片膠（多聚賴氨酸）處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟,10minX2（趁熱脫蠟） 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸餾水稀釋,濃度為25μg/ml）,37℃消化1
羧肽酶的種類及其作用
羧肽酶A能水解蛋白質和多肽底物C端芳香族或中性脂肪族氨基酸殘基，釋放除脯氨酸、羥脯氨酸、精氨酸和賴氨酸之外的所有C末端氨基酸，更易于水解具有芳香族側鏈和大脂肪側鏈的羧基端氨基酸。比如酪氨酸，苯丙氨酸，丙氨酸等。 羧肽酶A（carboxypeptidase A）,CPA， 因其底物的首位字“A”而得名
血細胞的種類及其分類
臨床最有價值的是白細胞的分類:白細胞無色呈球形，有細胞核，體積比紅細胞大，直徑在7～20μm之間。正常人白細胞計數在4000～10000/mm3范圍內，平均為7000/mm3。血涂片中白細胞，經復合染料染色后，可根據其形態差異和細胞質內有無特有的顆粒可分為兩大類五種細胞。粒細胞 此類白細胞的細胞質內
電子探針，有幾種類型
何為電子探針，有幾種類型電子探針是一種分析儀器，可以用來分析薄片中礦物微區的化學組成。該儀器將高度聚焦的電子束聚焦在礦物上，激發組成礦物元素的特征X射線。用分光器或檢波器測定熒光X射線的波長，并將其強度與標準樣品對比，或根據不同強度校正直接計數出組分含量。電子探針可以對試樣中微小區域（微米級）的化學
DNA探針標記常用試劑的配制
（1）10 ×缺口平移緩沖液：200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2；100mmol/Lβ-巰基乙醇、1mg/ml BSA。 （2）缺口平移反應終止液：200mmol/L NaCl；10mmol/l Tris-HCl,pH7.4； 11mmol/L
DNA探針的基本信息介紹
DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標記的單鏈DNA片段，可用來快速檢測病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標記后制成的探針。可與固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進行互補結合，經放射自顯影或其他檢測手段就可以