常用生化實驗技術：分光光度法1
有色溶液對光線有選擇性的吸收作用，不同物質由于其分子結構不同，對不同波長光線的吸收能力也不同，因此，每種物質都具有其特異的吸收光譜。有些無色溶液，雖對可見光無吸收作用，但所含物質可以吸收特定波長的紫外線或紅外線。分光光度法主要是指利用物質特有的吸收光譜來鑒定物質性質及含量的技術，其理論依據是Lambert和Beer定律。分光光度法是比色法的發展。比色法只限于在可見光區，分光光度法則可以擴展到紫外光區和紅外光區。比色法用的單色光通過濾光片產生，譜帶寬度為40~120nm，精度不高，而分光光度法則要求近于真正單色光，其光譜帶寬最大不超過3~5nm，在紫外光區可到l nm以下。單色光通過棱鏡或光柵產生，具有較高的精度。第一節基本原理一、光的基本知識光是由光量子組成的，具有二重性，即不連續的微粒性和連續的波動性。波長和頻率是光的波動性的特征，可用下式表示：λ＝C／υ式中λ為波長，具有相同的振動相位的相鄰兩點間的距離叫波長。υ為頻率，......閱讀全文
分光光度法測定葉綠素含量——分光光度法
測定葉綠素含量可應用于： （1）測定該植物的光合作用能力,也即健康狀況； （2）作為數據研究以提高植物生存能力； （3）了解植物組織中葉綠素的分布及性質。實驗方法原理葉綠素廣泛存在于果蔬等綠色植物組織中，并在植物細胞中與蛋白質結合成葉綠體。當植物細胞死亡后，葉綠素即游離出來，游離葉綠素很不穩定，對光
紅外分光光度法－是原子吸收分光光度法嗎
不一樣的，紅外分光光度法和原子吸收分光光度法是兩種分析方法，紅外分光光度法的分析波長一般都在900nm以上，是測定被測物質中的分子（團）能級的；原子吸收一般都在紫外可見光區，波長在800nm以下，是被測物質在火焰或石墨爐的高溫下原子化，測定原子能級的，大多數情況下分析微量或痕量金屬含量
原子吸收分光光度法檢測原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問接測定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。1.1以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法以銀離子作為氧化劑的間接原子吸收分光光度法，是利用維生素C分子中的有二烯醇基具強還原性，可被硝酸
分光光度法和紫外分光光度法有何區別
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內的光吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。 1. 基本原理 單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，即朗伯 - 比爾定律，這是吸收光譜法定量的理論依據，其關系式如式 3-1 ： A = E
分光光度法簡介
分光光度法是在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性或定量分析。常用的波長范圍為：(1)200～380nm的紫外光區，(2)380～780nm的可見光區，(3)2.5～25μm（按波數計為4000cm～400cm）的紅外光區。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比色計）、紅
火焰分光光度法
火焰分光光度法的簡史 1859年R.W.本生利用本生燈進行焰色反應，就是火焰分光光度法的起源，用此法發現了許多新元素。1928年瑞典植物生理學家H.G.龍德加德用火焰光譜法研究植物新陳代謝作用中微量元素的定量變化，并使用了參考元素技術。由于當時使用照相方法記錄譜線，致使準確定量分析工作較為繁瑣。1
COD分光光度法
分光光度法 測定原理：這種方法的原理與國標法相同。其測定原理也是在酸性溶液中，試液中還原性物質與重鉻酸鉀反應，生成三價鉻離子，三價鉻離子對波長為600nm的光有很大的吸收能力，其吸光度與三價鉻離子濃度的關系服從郎伯一比爾定律。三價鉻離子與試液中還原性物質的量有關，因而通過測定三價鉻的吸光度可
紫外分光光度法與可見分光光度法有何異同
1、測量的范圍不同：?（1）紫外分光光度計量程為200nm~600nm間，其中包括部分可見光。（2）可見分光光度計量程為320nm-1100nm，能滿足不同物質的測試。2、所用的燈不同：?（1）紫外分光光度計通常用氫燈或氘燈。（2）可見分光光度計通常采用鎢燈或鹵鎢燈。3、原理不同：?（1）紫外分光光
分光光度法的概念
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點，是生物化學實驗中最常用的實驗方法。許多物質的測定都采用分光光度法。在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收
什么是分光光度法？
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸光度或發光強度，對該物質進行定性和定量分析的方法。 在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長（λ）為橫坐標，吸收強度（A）為縱坐標，就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利
分光光度法的簡介
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸光度或發光強度，對該物質進行定性和定量分析的方法。 在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長（λ）為橫坐標，吸收強度（A）為縱坐標，就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利
原子吸收分光光度法
原子吸收分光光度法是基于元素所產生的原子蒸氣中待測元素的基態原子，對所發射的特征譜線的吸收作用進行定量分析的一種技術，常用的定量方法有： 1.標準曲線法：將一系列濃度不同的標準溶液按照一定操作過程分別進行測定，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線。在相同條件下處理待測物質并測定其吸光度，即
分光光度法的概念
分光光度法是通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點，是生物化學實驗中最常用的實驗方法。許多物質的測定都采用分光光度法。在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收
微量紫外分光光度法
檢測原理 微量紫外分光光度法檢測的是核酸的純度和含量，DNA和RNA在260nm處有最大的吸收峰，蛋白質在280nm處有最大的吸收峰，鹽和小分子則集中在230nm處。因此，可以用260nm波長的吸光度測定DNA或RNA濃度，其吸收強度與DNA和RNA的濃度成正比。 對于一個核酸樣品，建議先電
分光光度法的簡介
在分光光度計中，將不同波長的光連續地照射到一定濃度的樣品溶液時，便可得到與不同波長相對應的吸收強度。如以波長（λ）為橫坐標，吸收強度（A）為縱坐標，就可繪出該物質的吸收光譜曲線。利用該曲線進行物質定性、定量的分析方法，稱為分光光度法，也稱為吸收光譜法。用紫外光源測定無色物質的方法，稱為紫外分光光度法
定量溶血分光光度法
該法又稱B細胞介導的紅細胞定量溶血分光光度法醫學教育網|搜集整理，是根據溶血空斑試驗的原理衍化而來，可用以測定由B細胞產生和分泌的抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白（以吸光值表示），從而反映機體的體液免疫功能。試驗時，將免疫的脾細胞與SRBC及新鮮豚鼠血清等體積混合，于37℃水浴1小時，離心后測上清
分光光度法的原理
當一束強度為I0的單色光垂直照射某物質的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至I,則溶液的透光率T為:根據朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:A=abc式中A為吸光度，b為溶液層厚度（cm），c為溶液的濃度（g/dm^3)， a為吸光系數。其中吸光系數 與溶液的本性、溫度以及
分光光度法測COD
分光光度法以經典標準方法為基礎，重鉻酸鉀氧化有機物物質，六價鉻生成三價鉻，通過六價鉻或三價鉻的吸光度值與水樣COD 值建立的關系，來測定水樣COD 值。采用上述原理，國外最主要代表方法是美國環保局EPA.Method 0410.4 《自動手動比色法》、美國材料與試驗協會ASTM：D1252—2000
分光光度法的原理
當一束強度為0的單色光垂直照射某物質的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至,則溶液的透光率為: 根據朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律: A=abc 式中為吸光度，為溶液層厚度（cm），為溶液的濃度（g/dm^3)， a為吸光系數。其中吸光系數 與溶液的本性、溫度
原子吸收分光光度法
原子吸收光譜法作為一種分析方法從1955年開始被應用至今，是基于物質所產生的原子蒸汽對特征譜線的吸收作用來進行定量分析的一種方法，用于分析痕量金屬元素。此方法具有哪些優點？你能區分共振吸收線、半寬度、原子吸收曲線、積分吸收、峰值吸收等基本概念嗎？你熟悉定量分析的四種基本方法嗎？你了解實驗條件該如何選
雙波長分光光度法
雙波長分光光度法是在傳統分光光度法的基礎上發展起來的，它的理論基礎是差吸光度和等吸收波長。在單位時間內有兩條波長不同的單色光以一定的頻率交替照射同一吸收池的溶液，然后經過檢測器和電子控制系統，計算出這兩個波長下吸收度的差值△A，與被測定物質的濃度成正比。它與傳統分光光度法的不同之處，在于它采用了兩個
分光光度法的特點
分光光度法是水質分析中最常用的分析測定方法之一,它主要應用于測定試樣中微量組分的含量。與化學分析法比較它具有如下特點。 (1)靈敏度高 可不經富集直接測定試樣中低至0.0005%的微量組分。一般情況下,測定濃度的下限也可達0.1~1g/g,相當于含量為0.001%~0.0001%的微量組分。
雙波長分光光度法
在單位時間內有兩條波長不同的單色光以一定的頻率交替照射同一吸收池的溶液，然后經過檢測器和電子控制系統，計算出這兩個波長下吸收度的差值△A，與被測定物質的濃度成正比，這個方法稱雙波長分光光度法。雙波長分光光度法的關鍵是正確選擇兩波長，要求被測組分合適。在兩波長處的QA足夠大，而干擾組分G和背景在兩波長
分光光度法測試錫
錫----苯芴酮比色法試樣經消化后，在弱酸性溶液中四價錫離子與苯芴酮形成微溶性橙紅色絡合物，在保護性膠體存在下與標準系列比較定量。1、酒石酸溶液(100 g/L) ?2、抗壞血酸溶液(10 g/L):臨用時配制。3、動物膠溶液(5 g/L):臨用時配制。4、酚酞指示液(10 g/L):用乙醇溶解。5
分光光度法定量方法
利用分光光度法對物質進行定量測定，主要有以下幾種方法：1、標準管法將待測溶液與已知濃度的標準溶液在相同條件下分別測定A值，然后按下式求得待測溶液中物質的含量。CT=（AT/AS）*CS2、標準曲線法先配制一系列濃度由小到大的標準溶液，分別測定出它們的A值，以A值為橫坐標，濃度為縱坐標，作標準曲線（A
紫外可見分光光度法和原子吸收分光光度法的關系
相同點： 二者都為吸收光譜，吸收有選擇性，主要測量溶液，定量公式：A=kc，儀器結構具有相似性．不同點：原子吸收光譜法 紫外――可見分光光度法(1) 原子吸收 分子吸收(2) 線性光源 連續光源(3) 吸收線窄，光柵作色散元件 吸收帶寬，光柵或棱鏡作色散元件
原子吸收分光光度法與紫外可見分光光度法的異同
從原理上講 相同點：都是基于A=KC來進行濃度測量，AAS與UV-Vis在一定濃度范圍內其吸光度與濃度成正比來完成濃度測測量。 不同點：雖然都是基于濃度?與光吸收之間關系來測量，但是對于AAS，是基態原子吸收空心陰極燈光源能量，所需能量較高；而UV-Vis是溶液中分子態物質吸收氘燈或鎢燈光源能量
原子吸收分光光度法和紫外可見分光光度法有何異同
原子吸收分光光度計與紫外可見分光光度計的區別1、原理：原子吸收觀察的是構成物質的元素（原子）中的電子在原子軌道中的躍遷，屬于原子吸收。紫外可見光吸收觀察的是構成物質的分子中的電子在分子軌道中的躍遷，屬于分子吸收。2、能量兩者有所同，又有所不同。定量分析的原則同，而測量所需的光能量不同：原子吸收為X射
原子吸收分光光度法和紫外可見分光光度法有何異同
一、相同之處：1、它們均是依據樣品對入射光的吸收來進行測量的。即經處理后的樣品，吸收來自光源發射的某一特征譜線，經過分離后，將剩余的特征譜線進行光電轉換，經過記錄器記錄吸收強度的大小來測定物質含量。2、這兩種方法都遵守朗伯比爾定律。3、就組成設備而言，這兩種方法均由光源、單色器、吸收池（或原子化器）
雙波長分光光度法和差示分光光度法有何異同點
1、雙波長分光光度法：（1）原理設兩個成分A、B，兩個波長1、2；設要測定的成分為A，干擾成分為B；設波長1為成分A的最大吸收波長，在此波長測A時，B也有吸收，則B可干擾A的測定。解決辦法：再測波長2處的吸收，選擇波長2的前提是，成分B在波長1和波長2處的吸收相等。這樣，同一個溶液，測定波長1和2處