幾種標記實驗的特點
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段，一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段，利用凝膠電泳分開擴增的片段，從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術，并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術，因此簡便易行。SSR 真核生物的基因組中散布著大量的串聯重復序列，其中， 2-4 個 bp 的微衛星序列 (Microsatellite 或叫簡單序列重復 SSR:Simple Sequence Repeats) 具有高度多態性。 微衛星在結構上的最大特點是兩端序列較保守， SSR 引物根據與微衛星重復序兩端的特定短序列設計，用來擴增重復序列本身，從而揭示微衛星的多態性。 SSR 是檢測多態性的一種有效方法。微衛星（ SSR ）是廣泛分布于真核生物基因組中的短串聯重復序列（ 1 － 7bp ）， SSR 實驗一般檢測到的是一個單一的多等位基因位點；是共顯性遺傳，可鑒......閱讀全文
實驗動物標記實驗
實驗材料 兔子 小鼠試劑、試劑盒 3%～5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟 1. 染色法 適用于小動物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上，以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有：3%～5%苦味酸溶液（黃色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀（咖啡色）
實驗動物標記實驗
實驗材料兔子 小鼠試劑、試劑盒3%～5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟1.?染色法 適用于小動物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上，以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有：3%～5%苦味酸溶液（黃色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀（咖啡色）。標記的原則是
ULS標記實驗
實驗方法原理Universal Linkage System(ULS?;KREATECH Biotechnology BV）是用鉑染色絡合物與鳥嘌呤核苷的N7殘基反應進行標記的方法。反應使核酸與鉑熒光基團之間形成穩定的化學鍵。依據反應條件，ULS化合物在較低的程度上也與腺嘌呤形成絡合物。該方法已用于
ULS標記實驗
實驗方法原理 Universal Linkage System(ULS?;KREATECH Biotechnology BV）是用鉑染色絡合物與鳥嘌呤核苷的N7殘基反應進行標記的方法。反應使核酸與鉑熒光基團之間形成穩定的化學鍵。依據反應條件，ULS化合物在較低的程度上也與腺嘌呤形成絡合物。該
ULS標記實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Universal Linkage System(ULS?;KREATECH Biotechnology BV
AFLP分子標記實驗
其基本原理是：以PCR(聚合酶鏈式反應)為基礎，結合了RFLP、RAPD的分子標記技術。把DNA進行限制性內切酶酶切，然后選擇特定的片段進行PCR擴增(在所有的限制性片段兩端加上帶有特定序列的“接頭”，用與接頭互補的但3-端有幾個隨機選擇的核苷酸的引物進行特異PCR擴增，只有那些與3-端嚴格配對的片
SSR標記實驗步驟
SSR簡單序列重復標記可以用于：用微衛星區域特定順序設計成對引物，通過PCR技術，經聚丙烯酰胺凝膠電泳，即可顯示SSR位點在不同個體間的多態性。實驗方法原理與其它分子標記相比，SSR標記具有以下優點：(1)數量豐富，覆蓋整個基因組，揭示的多態性高；(2)具有多等位基因的特性，提供的信息量高；(3)以
標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞）基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞）SDS煮沸法裂解細胞實驗方法原理實驗材料待標記的培養細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒37℃標記培養液 ? ? ?
SSR標記實驗步驟
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 與其它分子標記相比，SSR標記具有以下優點：(1)數量豐富，覆蓋整個基因組，揭示的多態性高；(2)具有多等位基因的特性，提供的信息量高；(3)以 孟德爾方式遺傳，呈共顯性；(4)每個位點由設計的引物順序決定，便于不同的實
實驗動物編號標記方法
動物在實驗前常常需要作適當的分組，那么就要將其標記使各組加以區別。標記的方法很多，良好的標記方法應滿足標號清晰、耐久、簡便、適用的要求。 常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。 （一）顏料涂染 這種標記方法在實驗室最常使用，也很方便。使用的顏料一般有3-5%苦味酸溶
SSR標記實驗步驟
一、簡介：SSR簡單序列重復標記（Simple sequence repeat, 簡稱SSR標記），也叫微衛星序列重復，是由一類由幾個核苷酸（1-5個）為重復單位組成的長達幾十個核苷酸的重復序列，長度較短，廣泛分布在染色體上。由于重復單位的次數的不同或重復程度的不完全相同，造成了SSR長度的高度變異
核酸探針標記的實驗過程
實驗原理分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將
DNA探針的標記實驗
實驗方法原理?分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一條用某種可以檢測的進行標記，這條鏈就稱為核酸探針。因此，核酸探針的制備是分子雜交技術的關鍵。放射性同位素標記是最早采用的也是目前最常用的核酸探針標記方法。
核酸探針標記的實驗過程
實驗原理分子生物研究中，zui常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可將
核酸探針標記的實驗過程
?實驗原理分子生物研究中，zui常用的探針即為雙鏈DNA探針，它廣泛應用于轉基因植物拷貝數的鑒定、臨床診斷等方面。雙鏈DNA探針的合成方法主要有下列兩種:切口平移法和隨機引物合成法。切口平移法(nick translation) 當雙鏈DNA分子的一條鏈上產生切口時,E.coli DNA聚合酶Ⅰ就可
非標記抗體免疫電鏡實驗
實驗方法原理 標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組
DNA探針的標記實驗
探針標記法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 分子雜交是核酸鏈以堿基配對規則的一種結合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子雜交這一特性來對特定核酸序列進行檢測，必須將雜交鏈中的一
DNA探針的標記實驗
核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針；根據標記物不同，可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類；根據是否存在互補鏈，可分為單鏈和雙鏈探針；根據放射性標記物摻入情況，可分為均勻
微衛星標記的實驗步驟
1. 客戶收集標本(血液或組織等標本)并提取DNA。2. 設計引物序列并擴增，瓊脂糖電泳檢測結果。3. 合成熒光標記引物。4. 進行PCR擴增，產物通過測序儀器電泳檢測, 獲得擴增片段大小。5. 分析測序儀器讀出的數據，給結果圖譜。
幾種標記實驗的特點
RAPD利用 10 個堿基的一個或幾個隨機引物非定點地擴增 DNA 片段，一般一個引物可擴增 6-12 條 DNA 片段，利用凝膠電泳分開擴增的片段，從而進行基因多態性研究。 RAPD 是一種能快速進行基因多態性研究的技術，并且由于不涉及印跡雜交、放射性自顯影等技術，因此簡便易行。SSR 真核生物的
實驗動物常用的標記法
常用的標記法有染色、耳緣剪孔、烙印、號牌等方法。二）烙印法用刺數鉗在動物耳上刺上號碼，然后用棉簽蘸著溶在酒精中的黑墨在刺號上加以涂抹，烙印前最好對烙印部位預先用酒精消毒。（三）針刺法用七號或八號針頭蘸取少量碳素墨水，在耳部、前后肢以及尾部等處刺入皮下，在受刺部位留有一黑色標記。該法適用于大小鼠、豚鼠
用[32P]磷酸標記細胞實驗_標記單層培養細胞
實驗材料HeLa 細胞試劑、試劑盒FCS磷酸鹽儀器、耗材無磷酸培養基實驗步驟1. 在含 10% FCS 的培養基中單層培養 HeLa 細胞至鋪滿 50% 左右。2. 倒掉完全培養基，加入新鮮的無磷酸培養基，培養 3~4 小時以耗盡胞內的磷酸儲備。3. 換新鮮的無磷酸培養基，并加?32P 磷酸鹽至 2
抗原標記蛋白復合體純化實驗——條件性表達FLAG標記
實驗方法原理有時導入的 FLAG 標記蛋白編碼序列在逆轉錄病毒介導的轉基因和藥物篩選建立的克隆化細胞系中不表達。這可能是由于外源基因產物沒有被調控的或組成型表達所造成的細胞毒性。為了克服這個問題，基于四環素的使用，一個可誘導的哺乳動物表達系統可以用來“打開”或“關閉” FLAG 標記蛋白的表達。在建
抗原標記蛋白復合體純化實驗——組成型表達FLAG標記
實驗方法原理首先通過逆轉錄病毒介導的轉基因（用于組成型表達）或四環素調控的系統（用于可誘導表達）建立表達抗原決定簇標記的蛋白復合體亞基的穩定細胞系。然后用抗原決定簇特異的單克隆抗體偶聯的小珠進行免疫親和純化，以沉降抗原決定簇標記的多亞基蛋白復合體。最后在中性 pH 或生理條件下洗脫回收，即可用于功能
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
(一) 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱;化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響;結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織
32－P－標記裂解培養細胞實驗
基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對貼壁細胞） 基本方案 ?溫和去垢劑裂解法（對非貼壁細胞） SDS煮沸法裂解細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
RNA抽提和標記實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 從組織培養收獲的細胞 在組織培養中的細胞 凍存的整個組織
非標記抗體免疫電鏡實驗技術
實驗概要本文介紹了非標記抗體免疫電鏡實驗技術的具體操作方法。實驗原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的
單個神經細胞標記實驗
實驗方法原理本例所用技術和結果引自Bishop和King(1982)，在該文獻中也可找到更詳細的技術指導（也可參考Kitai and Bishop 1981)。實驗材料貓的小腦 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑