數字PCR技術的應用舉例
EGFR突變的肺癌治療過程中 的液體活檢檢測是一個非常具有挑戰性的工作 ，但這個基因在亞洲人群的高突變頻率使非常多的肺癌患者在接受對應靶向藥中受益（約30%）。數字PCR可以以肺癌患者的血漿中游離腫瘤DNA（CTDNA）為樣品，檢測EGFR敏感性和藥物抗性相關的突變。 運用數字PCR為精準治療保駕護航，以數字PCR技術獨有的絕對定量和高敏感性， 提供非小細胞肺癌EGFR的相關敏感性和藥物抗性相關突變，以數字PCR獨有的絕對定量和高敏感性，提供遠比其他檢測手段的檢出率。......閱讀全文
AFM應用舉例
?AFM應用舉例由于原子力顯微鏡對所分析樣品的導電性無要求，因此使其在諸多材料領域中得到了廣泛應用。透明導電的ITO薄膜，隨著成膜方法、膜厚、基底溫度等成膜條件變化，而表面形貌不同。將膜厚120nm（左）與450nm（右）的ITO薄膜進行比較時，隨著膜厚的增加，每個結晶顆粒明顯地長大。另外，明顯地觀
XPS應用舉例
（1）例1 硅晶體表面薄膜的物相分析對薄膜全掃描分析得下圖，含有Zn和S元素，但化學態未知。為得知Zn和S的存在形態，對Zn的最強峰進行窄掃描，其峰位1022eV比純Zn峰1021.4eV更高，說明Zn內層電子的結合能增加了，即Zn的價態變正，根據含有S元素并查文獻中Zn的標準譜圖，確定薄膜中Zn是
PCR技術的應用
PCR技術的應用1、生命科學a、人類基因組計劃 隨著的PCR日臻完善，科學家于2003年在完成的人類基因組“工作框架圖”的基礎上，經過整理、分類和排列后得到的更加準確、清晰、完整的基因組圖譜。這是對人類基因組基本面貌的首次揭示，表明科學家們開始部分“讀”出人類生命“天書”所蘊涵的內容。b、后基因組計
PCR技術（六）：PCR技術應用進展
PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應，它結
多重數字PCR技術介紹（二）
3.探針成本太高，沒關系我們用染料法也可以做多重數字PCR來源：Anal?Chem.2013?Dec?3;85(23):11619-27通過改變擴增產物的長度，或者調整引物的量，或者改變反應的Tm值等條件，可以輕松嘗試多重數字PCR反應。4.染料法也可以檢測點突變來源：Anal?Chem.2014?
數字PCR技術研究與發展
數字PCR即Digital PCR（dPCR)，它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR，數字PCR可讓你能夠直接數出DNA分子的個數，是對起始樣品的絕對定量。數字PCR是一種核酸分子絕對定量技術。相較于qPCR，數字PCR能夠直接讀出DNA/RNA分子的個數，是對起始樣品核酸分子的絕對定量。1
多重數字PCR技術介紹（一）
什么是數字PCR？數字PCR是一種新的絕對定量PCR，通過對PCR反應物進行有限稀釋，隨后在不同的反應腔室里進行PCR擴增，最后根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例得出靶分子的起始拷貝數或濃度的技術。什么是多重PCR？多重PCR又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上兩對以上
數字PCR在基因表達差異研究的應用
數字PCR由于檢測時完全不依賴傳統的Ct值即可實現真正意義上的絕對定量，因而可以提供比實時熒光定量PCR更精確的基因差異表達研究，尤其對于那些靶基因表達差異微小的情況，如：mRNA、microRNA、lncRNAs等的表達分析；等位基因的不平衡表達；單細胞基因表達分析；外泌體核酸分子定量分析等。
數字PCR在移植排斥監控中的應用
為了降低器官移植中移植物排斥導致的風險，數字PCR技術通過監測受體中移植器官供體的循環DNA水平來檢測早期移植排斥。
數字PCR在腸道菌群分析的應用
數字PCR技術直接計算目的序列的拷貝數，對樣品中的微生物實現了絕對定量，可用于微生物檢測，以便進一步研究腸道菌群的結構、功能以及數量。
數字PCR在基因型鑒定的應用
PCR也可以用于檢測一個生物中是否存在某特定DNA序列，這被稱為基因型鑒定。例如，基因型鑒定可通過發現樣品中是否存在某種群特異性序列來判斷樣本的真實性。基因型鑒定還可用于法醫分析判斷在現場發現的DNA樣品是否和嫌疑人的吻合，令兇手無處遁形。
數字PCR在早期精準檢驗疫情的應用
? 2016年，全球首例數字PCR動物疫病檢測試劑研發成功，包括禽流感、禽流感H7N9、藍耳病、高致病性美州株、豬的流行性腹瀉等動物疫病檢測試劑盒。此項技術的推出，將有助于在食品安全的源頭及早發現疫情，盡早處理避免更大面積的傳染，更好地控制漏檢，減少傳染人的幾率；也將有助于國家建立規范化、規模化的動
數字PCR在食品安全檢測的應用
食品安全日益成為一個重要的公共衛生問題, 受到社會及國家的高度重視。食源性疾病、食品原料造假、轉基因食品等逐漸呈現出普遍增長的趨勢。食源性疾病是指通過攝食而進入人體的有毒有害物質等致病因子所造成的疾病。比如常見的食物中毒、腸道傳染病、人畜共患傳染病、寄生蟲病等。食源性疾患的發病率居各類疾病總發病率的
數字PCR在病毒臨床檢測中的應用
概述2015年剛成歷史，2016年已在眼前。就這樣，年復一年間滄海成桑田。生命科學領域，新方法層出不窮，老方法不斷升級，好不熱鬧。也如孔子的感嘆：逝者如斯夫，不舍晝夜。就拿PCR技術來說，熒光定量PCR作為一種進行基因表達分析的技術，截至目前最大的應用市場是病原微生物的核酸體外診斷。展望未來，作為q
PCR測序技術的應用
PCR測序是對生物遺傳信息的最終判定。隨著各種基因組計劃的開展,PCR測序工作在不斷加強和完善,特別是全自動DNA測序儀的開發,為提前完成人類基因組計劃奠定了基礎。此外,在臨床遺傳病、傳染性疾病和癌癥的基因診斷、農業畜牧業的動植物育種、法醫鑒定等領域上有廣泛的應用前景。過去由于全自動DNA測序的儀器
數字PCR在腫瘤的液體活檢中的應用
?腫瘤學研究是數字PCR的重要應用領域，該技術作為極為重要的工具，能夠識別DNA突變（例如EGFR）、腫瘤患者用藥監控、基因擴增檢測、循環腫瘤細胞（CTC）特性研究、長鏈非編碼RNA檢測、液體活檢中循環的核酸（cfDNA）和腫瘤細胞（CTC）的絕對定量等研究中。
數字PCR在腫瘤治療的伴隨診斷的應用
?常用體液來源（如血液，胸腹水，唾液及尿液等）的待檢標本中的DNA，有正常脫落體細胞和病變脫落細胞兩種來源，前者的量遠大于后者。通過微液滴處理能在每個微液滴中有效減少正常體細胞DNA的干擾，實現腫瘤標記物的有效檢測，如EGFR，ALK，ROS1，KRAS、BRAF等基因的突變檢測、乳腺癌/胃癌的HE
Naica數字PCR技術對NSCLC患者血漿中EGFR相關突變檢測的應用
非小細胞肺癌（NSCLC）肺癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，已成為我國城市人口惡性腫瘤死亡原因的第一位。其中，非小細胞肺癌約占所有肺癌的80%，約75%的患者發現時已處于中晚期，5年生存率很低。而非小細胞肺癌中最常見，且有針對性靶向藥物的突變就是“表皮生長因子受體”（EGFR）突變。表皮生長因子受體
PCR技術應用進展
? PCR技術自1985年建立以來，發展之迅速、應用之廣泛，表明其具有強大的生命力.近些年來，基于PCR的基本原理，許多學者充分發揮創造性思維，對PCR技術進行研究和改進，使PCR技術得到了進上步地完善，并在此基礎上派生出了許多新的用途.?原位PCR技術 原位PCR就是在組織細胞里進行PCR反應
詳細舉例介紹PCR引物設計的流程
?先幾個比較好用的PCR引物數據庫? ? Primerbank（HS and MM)? ? http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/? ? OriGene? ? https://www.origene.com/category/gene-expression/qp
數字PCR的原理
數字 PCR 的工作原理在于將 DNA 或 cDNA 樣品分割為許多單獨、平行的 PCR 反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。 單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。 在擴增期間，TaqMan? 化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。 當不存在任何靶標序列時，沒有信
數字PCR的原理
數字 PCR 的工作原理在于將 DNA 或 cDNA 樣品分割為許多單獨、平行的 PCR 反應，部分這些反應包含了靶標分子（陽性），而其他不包含（陰性）。 單個分子可以被擴增一百萬倍或更多。 在擴增期間，TaqMan? 化學試劑及染料標記探針可用于檢測特定序列的靶標。 當不存在任何靶標序列時，沒有信
數字PCR的優勢
? ? 數字PCR是生命科學領域最引人矚目的創新之一。與其他傳統分子診斷技術相比，數字PCR技術的優勢在于:? ? 高靈敏度，可實現單分子級檢測dPCR本質上將一個傳統的PCR反應變成了數萬個PCR反應， 在這數萬個反應單元中分別獨立檢測目的序列，從而大大提高了檢測的靈敏度。? ? 高精度，可檢測微
PCR技術應用基因克隆的應用
運用 PCR 技術、基因克隆和亞克隆比傳統的方法具有更大的優點。由于 PCR 可以對單拷貝的基因放大上百萬倍,產生微克(μg)級的特異 DNA 片段,從而可省略從基因組 DNA 中克隆某一特定基因片段所需要的 DNA的酶切、連接到載體 DNA 上、轉化、建立 DNA 文庫及基因的篩選、鑒定、亞克隆等
熒光定量PCR數據分析舉例
? 首先看基線與閾值設置的是否合理；在基線和閾值設置合理的基礎上，得到的CT值才是準確可靠的；在CT值是準確的基礎上再進行相對定量或絕對定量實驗。? ??? ? 1 絕對定量實驗數據分析注意要點：? ? 1.1 絕對定量實驗對檢測體系的擴增效率不做硬性要求；? ? 1.2 檢測的樣本濃度必須落在標曲
數字PCR簡介
1985年美國科學家Kary Mullis發明PCR方法以后，PCR已經成為生命科學研究領域中最常規的實驗方法之一。PCR是用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，可看作是生物體外的特殊DNA復制。PCR的最大特點，是能將微量DNA大量擴增。最傳統的一代PCR采用瓊脂糖電泳的方式對PCR產物進
Nacia數字PCR在基因表達分析中的應用
華盛頓大學醫學院兒科和加利福尼亞大學圣地亞哥分校醫學院兒科的研究人員建立了一個穩定可靠的基于RNA磁珠提取和數字PCR的方法，可從糞便樣本中檢測與EE（熱帶腸病）關聯的人mRNA，靈敏度可達20拷貝GAPDH mRNA/200mg糞便樣本。已有報道表明病人糞便中存在人mRNA，可作為反應病人消化道病
數字PCR和HRM在腫瘤樣本中的應用
摘要：Vogelstein和Kinzler（美國國家科學院院刊，1999年）第一次描述了Digital PCR（dPCR）的概念，一種在微量細胞群中（如原發性腫瘤組織）鑒定突變的方法。通過稀釋樣品DNA到一個單個分子水平，它可以把PCR自然模擬指數轉化為數字信號。當PCR成功的擴增出這些單個
數字PCR在甲基化含量鑒定的應用
作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析，現階段有不同的方法或技術來進行研究：如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等受限于方法學的問題，不能獲得甲基化程度的精確定量，而數字PCR系統通過對樣品的微液滴處理及目標分子的絕對拷貝數定量，為甲基化程度的精確定量
數字PCR在糖尿病治療中的應用
? ? 數字PCR技術目前在糖尿病中的研究熱點，通過定量檢測非甲基化DNA的水平，對I型糖尿病β細胞死亡進行定量，從而監控病情發展。