沉降系數的測定方法
沉降系數通過分析離心機測定。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。 (1)樣品:蛋白質(2)樣品溶液與離心:將樣品溶于緩沖液中,用一定規格的雙槽分析池,一邊加入溶液一邊加入溶劑。分析池與平衡池平衡重量,使平衡池比分析池輕0.5g以內,然后分別裝入分析轉頭。抽真空。開Schlieren光光源,選擇工作速度,室溫離心。轉動腔達到真空后離心機開始運轉加速,此時在觀察窗口可以看到離心圖型。達到工作速度后恒速離心。以蛋白質為例待看到樣品峰的尖端后即可以間隔照相。照完相即可關機,取出樣品液,清理轉頭和分析池。照相用強反差顯影沖洗后即得Schlieren光路沉降圖形照片。(3)沉降圖像測量:Schlieren沉降圖可......閱讀全文
沉降系數的測定方法
沉降系數通過分析離心機測定。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。?(1)樣品:
沉降系數測定
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。
離心機沉降系數的測定方法!
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。1.
沉降系數的測定原理
基本原理沉降系數的測定原理就是在恒定的離心力場下測定樣品顆粒的沉降速度。因為樣品顆粒很小,不能直接看到它們的沉降運動,所以把離心時樣品顆粒的界面移動速度看作是樣品顆粒的平均沉降速度。通常使用Schlieren和吸收光學系統來記錄界面沉降圖。在沉降圖樣品界面一般表現為一個對稱的峰,峰的最高點代表界面位
離心機沉降系數的測定
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。
離心機沉降系數測定
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。
離心機沉降系數的測定原理
沉降系數測定是分析離心機最主要的用途。通常只需要幾十毫克甚至幾十微克樣品,配制成1~2毫升溶液,裝入分析池,以幾小時的分析離心,就可以獲得一系列的樣品離心沉降圖。根據沉降圖可以作樣品所含組分的定性分析,亦可以測定各組分的沉降系數和估計分子大小,作樣品純度檢定和不均一性測定,以組分的相對含量測定。
離心機沉降系數測定實例
⑴樣品:牛血清白蛋白 ⑵樣品溶液與離心:按0.6%濃度將牛血清白蛋白溶于0.14M NaCl、0.01M磷酸緩沖液中,pH7.0。用12mm厚雙槽分析池,一邊加入溶液一邊加入溶劑,約各0.3ml。分析池與平衡池平衡重量,使平衡池比分析池輕0.5g以內,然后分別裝入分析轉頭。分析轉頭裝于分析離心
沉降系數的應用
根據樣品的質量、密度和摩擦系數進行分離的離心技術,已大量應用于生物大分子研究領域。沉降常數反映的是一定條件下沉降微粒的物理性質,當條件一定時為一常數,代表生物大分子的沉降特征和結構,可以研究生物大分子的自身聚合狀態與均一性、大分子復合物的裝配機制等。
超高速冷凍離心機測定生物大分子沉降系數的方法
? ? ? ? 生物大分子的沉降系數是一個很重要的物理化學參數,可用超高速冷凍離心機的界面移動法測定。??????? 超高速冷凍離心機的界面移動法可采用單扇形杯,使用Schlieren光學系統,將生物大分子樣品溶液充注到分析池后,在離心力場的作用下,生物大分子在池中離開氣液彎月面,從而測定其沉降速度
超高速冷凍離心機測定生物大分子沉降系數的方法
生物大分子的沉降系數是一個很重要的物理化學參數,可用超高速冷凍離心機的界面移動法測定。超高速冷凍離心機的界面移動法可采用單扇形杯,使用Schlieren光學系統,將生物大分子樣品溶液充注到分析池后,在離心力場的作用下,生物大分子在池中離開氣液彎月面,從而測定其沉降速度。若樣品為蛋白質溶液,可配置成1
超高速冷凍離心機測定生物大分子沉降系數的方法
??生物大分子的沉降系數是一個很重要的物理化學參數,可用超高速冷凍離心機的界面移動法測定。??超高速冷凍離心機的界面移動法可采用單扇形杯,使用Schlieren光學系統,將生物大分子樣品溶液充注到分析池后,在離心力場的作用下,生物大分子在池中離開氣液彎月面,從而測定其沉降速度。若樣品為蛋白質溶液,可
沉降系數的圖像分析
當離心剛開始時如果見到有快速沉降的峰,幾分鐘內就到達分析池底部,一般多是由于樣品發生部分聚合形成快速沉降的高聚物。離心達速后樣品的的記心圖像顯示一個對稱的峰形,一般可以認為樣品是離心均一的。但是對樣品的真正均一性還應用其他方法進一步檢測,如電泳,層析等。某些混合樣品偶然亦會給出一個對稱峰的。峰形通常
什么是沉降系數?
沉降常數,又稱為沉降系數(sedimentation coefficient)是指用離心法時,大分子沉降速度的量度,等于每單位離心場的速度。或s=v/(ω2?r)。s是沉降系數,ω是離心轉子的角速度(弧度/秒),r是到旋轉中心的距離,v是沉降速度。沉降系數以每單位重力的沉降時間表示,并且通常為1~5
沉降系數的定義和發現
根據1924年Svedberg(離心法創始人--瑞典蛋白質化學家)對沉降系數下的定義:顆粒在單位離心力場中粒子移動的速度。沉降系數是以時間表示的。蛋白質,核酸等生物大分子的S實際上時常在10-13秒左右,故把沉降系數10-13秒稱為一個Svedberg單位,簡寫S,量綱為秒。因隨溶劑的種類、溫度的變
沉降系數的基本原理
沉降系數的測定原理就是在恒定的離心力場下測定樣品顆粒的沉降速度。因為樣品顆粒很小,不能直接看到它們的沉降運動,所以把離心時樣品顆粒的界面移動速度看作是樣品顆粒的平均沉降速度。通常使用Schlieren和吸收光學系統來記錄界面沉降圖。在沉降圖樣品界面一般表現為一個對稱的峰,峰的最高點代表界面位置。通常
離心常用術語解析沉降系數
迄今為止,離心工作的重點的就是生物顆粒的制備,所以了解顆粒的沉降特性是至關重要的。沉降系數是生物大分子極其重要的物理參數,通過它可以了解生物大分子的相對分子量、分子形狀和水化程度等。早在1940 年,Svedberg 和Pedersen 發展了用分析超速離心技術來測量生物大分子的沉降系數和分
離心機沉降系數值的校正
??在了解了各種因素對測定值的影響后,便可擬定測定值實驗方案,這包括:? ? ? ?1.實驗應在幾個離心機離心速度下進行,每個速度差應為50%;? ? ? ?2.溶液的pH值應在樣品等電點附近;? ? ? ?3.避免電荷影響。介質離子強度應在0.05-1.0mol/L;? ? ? ?4.實驗應在四種
離心機沉降系數值的校正
? ? ? ?在了解了各種因素對測定值的影響后,便可擬定測定值實驗方案,這包括:? ? ? ?1.實驗應在幾個離心機離心速度下進行,每個速度差應為50%;? ? ? ?2.溶液的pH值應在樣品等電點附近;? ? ? ?3.避免電荷影響。介質離子強度應在0.05-1.0mol/L;? ? ? ?4.實
顆粒的沉降速度與沉降系數
一個顆粒要沉降,它必須置換出位于它下方等體積的溶液,這只有當顆粒的質量大于被置換出的液體的質量時才能通過離心的手段達到,否則,在離心過程中顆粒將發生向上漂浮,而不是下沉。當顆粒在運動時,不論方向如何,它都要穿過溶劑分子,所產生的摩擦力總是與顆粒運動的方向相反。摩擦力的大小與顆粒的運動速度成正比,并且
顆粒的沉降速度與沉降系數
一個顆粒要沉降,它必須置換出位于它下方等體積的溶液,這只有當顆粒的質量大于被置換出的液體的質量時才能通過離心的手段達到,否則,在離心過程中顆粒將發生向上漂浮,而不是下沉。當顆粒在運動時,不論方向如何,它都要穿過溶劑分子,所產生的摩擦力總是與顆粒運動的方向相反。 摩擦力的大小與顆粒的運動速度成正比,
低速大容量冷凍離心機的沉降系數
? ???低速大容量冷凍離心機的沉降系數是低速大容量冷凍離心機中顆粒沉降速度的量度,數值上等于每單位離心力場的沉降速度,單位是秒。一、沉降系數的作用:? 1、描述顆粒大小。? 2、預計沉降時間。? 3、測定物質的分子量。二、影響沉降系數的因素:? 1、顆粒大小。? 2、顆粒形狀。? 3、顆粒密度。?
低速大容量冷凍離心機的沉降系數
低速大容量冷凍離心機的沉降系數是低速大容量冷凍離心機中顆粒沉降速度的量度,數值上等于每單位離心力場的沉降速度,單位是秒。一、沉降系數的作用:? 1、描述顆粒大小。? 2、預計沉降時間。? 3、測定物質的分子量。二、影響沉降系數的因素:? 1、顆粒大小。? 2、顆粒形狀。? 3、顆粒密度。? 4、介質
離心原理及沉降速度與沉降系數
離心是蛋白質、酶、核酸及細胞亞組分分離的最常用的方法之一,也是生化實驗室中常用的分離、純化或澄清的方法。尤其是超速冷凍離心已經成為研究生物大分子實驗室中的常用技術方法。離心機(centrifuge)是實施離心技術的裝置。離心機的種類很多,按照使用目的,可分為兩類,即制備型離心機和分析型離心機。前者主
水分測定的測定方法
包括:卡爾·費休水分測定、庫侖水分測定、露點水分測定等一.卡爾費休水分測定:卡爾費休法簡稱費休法,是1935年卡爾·費休(Karl·Fischer)提出的測定水分的容量分拆方法。費休法是測定物質水分的各類化學方法中,對水最為專一、最為準確的方法。經過不斷改進,提高了準確度,擴大了測量范圍,已被列為許
尿素測定的測定方法
(1)酶偶聯速率法(尿素酶法偶聯谷氨酸脫氫酶) 適于自動化分析,注意氨污染。 (2)二乙酰一肟顯色法(Fearon反應) 尿素與二乙酰一肟熱強酸溶液中生成紅色復合物,不穩定試劑腐蝕性強現臨床少用。
關于C肽測定方法的測定方法介紹
1、血清C肽測定 正常人用放射免疫測定法測C肽,一般為0.3~0.6pmoL/mL,均值為0.56±0.29pmoL/mL,葡萄糖負荷試驗后,高峰出現的時間與胰島素一致,比空腹時高5~6倍 2、24小時尿C肽測定 近年來國外已開展了24小時尿測定C肽水平的方法。這種方法不僅標本留取方便,病
血鈣測定的測定方法
(1)離子鈣測定:采用鈣離子選擇性電極進行測定。(2)總鈣測定:原子吸收分光光度法、染料結合法和滴定法等。普遍應用的是絡合滴定法,優點操作簡便,不需特殊設備,用血量少,準確性符合要求。(總鈣通常指血清或血漿鈣)原子吸收分光光度法是總鈣測定的參考方法,使用空氣-乙炔焰,鈣焰的光吸收特征是422.7nm
分析溶液的方法沉降速度法的應用
聚合物分子量的測試與表征 聚合物由一種或幾種單體通過共價鍵連接起來的高分子量化合物,又稱高分子化合物。對聚合物來說,通常所指的分子量是平均值,也就有了分子量分布。 超速離心機運轉的速度范圍很大,使它可測定小到蔗糖大到病毒的分子量值。它也可以測定多分散性大分子的平均分子量和分子量分布。超速離心
斯韋德貝里單位的定義
中文名稱斯韋德貝里單位英文名稱Svedberg unit定 義沉降系數的單位,用符號“S”表示。常用來表示生物大分子和細胞顆粒物質的沉降系數,1 S=10-13s。由于測定時的溫度和溶劑對沉降系數數值有影響,因此常以水為溶劑、溫度在20℃時的S值表示,寫作SW,20。應用學科生物化學與分子生物學(