離心機沉降系數測定實例

　　⑴樣品：牛血清白蛋白

　　⑵樣品溶液與離心：按0.6%濃度將牛血清白蛋白溶于0.14M NaCl、0.01M磷酸緩沖液中，pH7.0。用12mm厚雙槽分析池，一邊加入溶液一邊加入溶劑，約各0.3ml。分析池與平衡池平衡重量，使平衡池比分析池輕0.5g以內，然后分別裝入分析轉頭。分析轉頭裝于分析離心為什么，關轉動腔，抽真空。開 Schlieren光光源，選擇工作速度一60000轉/分，離心室溫。轉動腔達到真空后離以機開始運轉加速，此時在觀察窗口可以看到離心圖型。達到工作速度后即為恒速離心。待看到樣品峰的尖端后即可以6分 鐘間隔照相，共照6張。照完相即可關機，取出樣品液，清理轉頭和分析池。照相用強反差顯影沖洗后即得Schlieren光路沉降圖形照片。

　　⑶沉降圖象測量：Schlieren沉降圖可以用比長儀，讀數顯微鏡，或投影儀測量。要求測量的橫向量程為6cm，測量精度應優于10μm。通常讀數顯微鏡已能滿足要求。投影儀可以使圖象放大于屏幕上，讀測比較容易，眼睛不易疲勞。測量時把沉降圖象的底片放于測量儀器上，使液面的垂直線與測量儀中的垂直線重合，然后用十字標線依次測量內參孔，液面，界面峰尖，和外參考孔的位置，每個圖象至少讀測三次，取平均值。依次把每個圖象依同樣方法測量，把數據列成表5。

　　照相號 x1(mm) x2(mm) x3(mm) x4(mm) (x3-x1)/a log[5.65+(x3-x1)/a]

　　1 45.426 37.626 33.807 13.810 0.6125 0.7967

　　2 45.640 37.830 33.351 13.420 0.6485 0.7992

　　3 45.890 38.070 32.895 13.663 0.6854 0.8017

　　4 45.733 37.921 32.163 13.523 0.7161 0.8039

　　5 45.802 38.000 31.580 13.593 0.7507 0.8062

　　6 46.009 38.211 31.172 13.800 0.7830 0.8084

　　(4)沉降系數S的計算：沉降圖測量完，先檢查每一張圖和第六張圖的x2-x1值，二張圖的x2-x1值的差應該小于界面峰位置的測量誤差。實測x2-x1的差值為0.002，說明液面在離心30分鐘內變動為 0.002mm。界面峰在30分鐘內移動距離是第六號圖的x1-x3減第一號圖的x1-x3，是3.208mm,其峰位測量意味著允許為0.03。可內陸液面變動0.002mm遠小于峰位測量誤差0.03mm，說明離心時沒有發生漏液。

　　按a=(x4-x1)/1.7求算光路對分析池的放大倍數，然后按(x3-x1)/a求算界面峰離開內參考孔的實際距離，再按x=5.65+(x3-x1)/a求算界面峰離開旋轉中心的實際距離，再由對數表求算logx植，計算數據亦列于表5中。