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  • 發布時間:2018-11-10 19:39 原文鏈接: 超高速冷凍離心機測定生物大分子沉降系數的方法

      生物大分子的沉降系數是一個很重要的物理化學參數,可用超高速冷凍離心機的界面移動法測定。

      超高速冷凍離心機的界面移動法可采用單扇形杯,使用Schlieren光學系統,將生物大分子樣品溶液充注到分析池后,在離心力場的作用下,生物大分子在池中離開氣液彎月面,從而測定其沉降速度。若樣品為蛋白質溶液,可配置成1mg/mL濃度,在加入到分析池前,樣品預先對緩沖液進行透析。另一只平衡用的單扇形杯加入緩沖液,其彎月面應與樣品充注杯一樣高。離心轉速的選擇應以該目標蛋白質分子能在1.5~2小時內完全沉降到池底為準。離心時間確定后,調節光電掃描或照相時間間隔,使之在整個實驗時間內能掃描或照相6~10次。然后對Schlieren圖進行分析計算,得出沉降系數值。


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