RNA電泳操作步驟
試劑: 瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc) 1、稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。 2. 加700mL DEPC水溶解。 3. 用2N NaOH調節pH**7.0 4. 在上述溶液中加入10mL的1M的NaAC 5. 溶液中加入10mL的0.5M的EDTA pH=8.0 6. 加DEPC水定容**1L 7. 用0.45um濾膜過濾后避光保存 二 、RNA樣品處理方法混合均勻后,70°C加熱5min,迅速冷卻**室溫。(PCR儀操作) 三 、甲醛變性瓊脂糖凝膠的制備 加1g瓊脂糖到31mL DEPC水中,另加10mL 5 x MOPS-ED......閱讀全文
RNA電泳操作步驟
試劑:?瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 ?步驟?一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc)?1、稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。?2. 加700mL DEPC水溶解
電泳技術RNA電泳操作步驟
試劑： 瓊脂糖（Agarose）、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制（0.1 M MOPS pH7； 5mM EDTA； 10mM NaAc） 1. 稱量20.9g的MOPS，置于1L燒杯中。 2. 加700mL
RNA凝膠電泳試驗操作步驟
1、將制膠用具用70%乙醇沖洗一遍，晾干備用。 2、制膠：稱取0.5g瓊脂糖粉末，加入放有36.5mL的DEPC水（蒸餾水40ml）的錐形瓶中，加熱使瓊脂糖完全溶解。稍冷（60~70°）卻后加入5ml的10x電泳緩沖液、8.5（9）ml的甲醛（+0.5μl溴化乙錠）。然后在膠槽中灌制凝膠，插好
RNA電泳鑒定步驟
? ? 一，準備工作? ? 1，實驗器具與材料:? ? (1)移液槍:10ul? ? (2)吸頭:20ul? ? (3)吸頭臺:放置 200ul 和 20ul 的吸頭一個 (4)三角燒瓶:50ml 一個? ? (5)瓊脂糖 2，實驗器具的處理與準備? ? (1) 塑料制品:(包括吸頭等)? ? 送至
雙向電泳操作步驟——雙向電泳操作步驟
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
雙向電泳操作步驟
一、等電聚焦 1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。 3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖
雙向電泳操作步驟
水化上樣( 被動上樣)1. 從冰箱中取出 IPG 膠條，室溫放置 10min。2. 沿水化盤槽的邊緣從左向右線性加入樣品，槽兩端各 1cm 左右不加樣，中間的樣品液一定要連貫。注意：不要產生氣泡，否則會影響膠條中蛋白質的分布。3. 用鑷子輕輕撕去 IPG 膠條上的保護層。注意：堿性端較脆弱，應小心操
雙向電泳操作步驟
雙向電泳操作步驟 第一向凝膠 第二向凝膠 組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 雙向電泳（two-dimensiona
雙向電泳操作步驟
實驗材料 細胞樣品試劑、試劑盒 ddH2O溴酚藍指示劑礦物油丙烯酰胺乙醇MilliQ 水飽和正丁醇SDS瓊脂糖儀器、耗材 樣品水化盤冰箱厚濾紙搖床電泳槽電泳儀鑷子二向電泳制冷儀手套實驗步驟 1. ?樣品制備。2. ?第一向等電聚焦。3. ?第二向SDS電泳。4. ?凝膠的染色。5. ?凝膠掃描和分析
雙向電泳完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣
雙向電泳的操作步驟
第一向等電聚焦⒈ 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含IPG buffer）一小管（1ml/管），置室溫溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT， 0.5% 對應膠條pH范圍的IPG buffer，充分混勻。⒊ 從小管中取出400微升水化上樣緩沖液，加入100微升樣品（
雙向電泳完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣
雙向電泳的操作步驟
第一向等電聚焦⒈ 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含IPG buffer）一小管（1ml/管），置室溫溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT， 0.5% 對應膠條pH范圍的IPG buffer，充分混勻。⒊ 從小管中取出400微升水化上樣緩沖液，加入100微升樣品（
雙向凝膠電泳操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
實驗方法原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應可清晰看到18s
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
血RNA快速提取的操作步驟
操作步驟：提示：（1） 第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇！（2） 使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X。（3） 操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%，如1 ml RLT 中加入10μlβ-巰基乙醇。此裂解液最好現用現配。配好的RLT
細胞總RNA的提取操作步驟
一、準備1、 物品：Trizol、氯仿（三氯甲烷）、異丙醇、75%滅酶異醇、冷PBS、1.5ml滅酶EP管、滅酶槍頭、一次性手套、EP管架、吸管 2、 打開冷凍離心機4℃預冷 二、操作步驟： 將Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、滅酶槍頭、一次性手套、EP管架、吸管等物品帶入細胞室。
RNA甲醛變性電泳實驗原理和操作
[原理] 用溴化乙錠等熒光染料示蹤的核酸電泳結果可用于判定核酸的純度。由于DNA分子較RNA分子大許多，電泳遷移率低；而RNA中以rRNA最多，占到80%~85%，tRNA及核內小分子RNA占15%~20%，mRNA占1%~5%。故總RNA電泳后可呈現特征性的三條帶。在原核生物為明顯可見的23S
火箭免疫電泳的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法，選取最小抗原量與最低抗體濃度，在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰，長達2～5cm者為標準。一般抗原用量為0.5～5微克，抗血清用量為5～10微升，稀釋度于1：10～1：200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
雙向電泳完整的操作步驟
（一）第一向等電聚焦1.從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT,不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管）,置室溫溶解.2.在小管中加入0.01g DTT,Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混勻.3.從小管中取出400ml水化上樣緩沖液,加入100ml樣品,充分
火箭免疫電泳的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法，選取最小抗原量與最低抗體濃度，在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰，長達2～5cm者為標準。一般抗原用量為0.5～5微克，抗血清用量為5～10微升，稀釋度于1：10～1：200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
雙向電泳完整的操作步驟
（一）第一向等電聚焦?1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。?2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。?3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
SDS－PAGE電泳的操作步驟
1、清洗玻璃板一只手扣緊玻璃板，另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。兩面都擦洗過后用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。2、灌膠與上樣（1）玻璃板對齊后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠（操作時要使兩玻璃對齊，以免漏膠）。垂直電泳槽（2） 按前面方法配10%分離膠，加入TEMED后立即搖勻即可