RNA電泳操作步驟
試劑: 瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc) 1、稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。 2. 加700mL DEPC水溶解。 3. 用2N NaOH調節pH**7.0 4. 在上述溶液中加入10mL的1M的NaAC 5. 溶液中加入10mL的0.5M的EDTA pH=8.0 6. 加DEPC水定容**1L 7. 用0.45um濾膜過濾后避光保存 二 、RNA樣品處理方法混合均勻后,70°C加熱5min,迅速冷卻**室溫。(PCR儀操作) 三 、甲醛變性瓊脂糖凝膠的制備 加1g瓊脂糖到31mL DEPC水中,另加10mL 5 x MOPS-ED......閱讀全文
雙向電泳完整的操作步驟
（一）第一向等電聚焦?1. 從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。?2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。?3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
SDS－PAGE電泳的操作步驟
1、清洗玻璃板一只手扣緊玻璃板，另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。兩面都擦洗過后用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。2、灌膠與上樣（1）玻璃板對齊后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠（操作時要使兩玻璃對齊，以免漏膠）。垂直電泳槽（2） 按前面方法配10%分離膠，加入TEMED后立即搖勻即可
SDS－PAGE電泳的操作步驟
1、清洗玻璃板一只手扣緊玻璃板，另一只手蘸點洗衣粉輕輕擦洗。兩面都擦洗過后用自來水沖，再用蒸餾水沖洗干凈后立在筐里晾干。2、灌膠與上樣（1）玻璃板對齊后放入夾中卡緊。然后垂直卡在架子上準備灌膠（操作時要使兩玻璃對齊，以免漏膠）。垂直電泳槽（2） 按前面方法配10%分離膠，加入TEMED后立即搖勻即可
雙向電泳原理及操作步驟
實驗概要本文介紹了雙向電泳原理及操作步驟（第一向等電聚焦和第二向SDS-PAGE電泳）。實驗原理二維聚丙烯酰胺凝膠電泳技術結合了等電聚焦技術（根據蛋白質等電點進行分離）以及SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（根據蛋白質的大小進行分離）。這兩項技術結合形成的二維電泳是分離分析蛋白質最有效的一種電泳手段。通
細胞質RNA提取實驗操作步驟
由于RNA的種類來源很多，因而提取制備方法各異，一般有苯酚法，去污劑法和鹽酸胍法，其中苯酚法實驗室最常用。組織勻漿后用苯酚處理離心，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中，向水相加冷乙醇后， RNA即以白色絮狀沉淀析出。此法較好除去DNA和蛋白質，且獲得生物活性的RNA。實驗方法基本方案實驗材料RNA
信使RNA提取分離的操作步驟介紹
1．將0.5-1.0g寡聚（dT）-纖維懸浮于0.1M的NaOH溶液中。 2．用DEPC處理的1ml注射器或適當的吸管，將寡聚（dT）-纖維素裝柱0.5-1ml，用3倍柱床體積的DEPC H2O洗柱。 3．使用1×上樣緩沖液洗柱，直至洗出液pH值小于8.0。 4．將RNA溶解于DEPC H
RNA凝膠電泳試驗操作注意事項
本實驗中必須保持RNase污染以免RNA降解。所有試劑用DEPC水配制，用具也用DEPC水沖洗，并滅菌。 ①電泳RNA所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。 ②用新的1XTBE配制1.2%瓊脂糖凝膠，倒膠時溴化乙錠（EB）直接加入凝膠中。 ③
火箭免疫電泳實驗的操作步驟
1、抗原、抗體濃度的選擇以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法，選取最小抗原量與最低抗體濃度，在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰，長達2～5cm者為標準。一般抗原用量為0.5～5微克，抗血清用量為5～10微升，稀釋度于1：10～1：200之間進行選擇。2、預復瓊脂玻板的制備將溶化的1%預復
電泳做Western免疫印跡操作步驟
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。1、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠
瓊脂糖凝膠電泳操作步驟
一.?為了制備凝膠，將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度，并在微波爐中加熱使其熔化。瓊脂糖凝膠濃度1.?所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。2.?瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比（w / v），瓊脂糖凝膠通常在0.2％至3％的范圍內。3.?瓊脂糖濃度越低，DNA片段遷移越快。4
核酸電泳（RNA電泳與DNA電泳）
（一）DNA的凝膠電泳：凝膠電泳是分子克隆的中心技術之一。瓊脂糖凝膠用于分離大于200～1000bp的片段;操作簡單、快速，且分離范圍廣，分辨率高。2.聚丙烯酰胺凝膠用于分離5－500bp的片段; 效果好、分辨率極高，相差1bp的DNA片斷就能分開，能容納相對大量的DNA ，用于核苷酸多態性的分析。
雙向電泳操作步驟及相關溶液配置
A． 實驗過程一 實驗原理：? ? 2-DE的第一向電泳等電聚焦是基于等電點不同而將蛋白粗步分離,第二向SDS-PAGE是基于蛋白質分子量不同,而將一向分離后的蛋白進一步分離.這樣就可以得到蛋白質等電點和分子量的信息.二 實驗步驟：1. 樣品的溶解? ? 取純化后的晶體蛋白3.0mg,加入300ul
雙向電泳操作步驟——第二向凝膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒丙烯酰胺TEMED磷酸過硫酸銨溴酚藍NaOH儀器、耗材電泳儀墊片凝膠板尼龍篩子實驗步驟1. ?用墊片組裝凝膠平板。夾層每邊的墊片之上用夾子固定，并置于凝膠支架上。注意玻璃平板和墊片的平齊，收緊夾子以保證密封圈不發生泄漏。調整平板的水平和垂直，在平板間將放上凝膠識別標簽，使之
雙向凝膠電泳技術的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris（Base）/65mM DTT；2、樣品濃度大于2 μg/ μl；樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
毛細管電泳儀操作步驟
1、儀器型號 P/ACE MDQ 2、生產廠家 美國BACKMAN COVLTER公司 3、技術參數 ①操作方式：電壓、電流、功率 均可恒/梯度 ②進樣：壓力/真空/電動 ③電壓范圍：1－30KV ④電流范圍：3－300UA ⑤壓力范圍：5－100Psi ⑥樣品溫度：5－60
瓊脂糖凝膠電泳的操作步驟
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。 瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段，其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它制備容易，分離范圍廣，尤其適于分離大片段DNA。普通瓊脂糖凝膠分離D
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時，一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時，一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
實驗目的 掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。 二、實驗原理 RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時，一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能分開，但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時，一定要用變
柱式病毒RNA提取試劑盒操作步驟
1．如果有N個樣品，標記N+2個1.5～2mL螺旋蓋塑料離心管，多出的一個為陽性對照，一個為陰性對照。為避免污染，建議不要使用壓蓋式塑料離心管。在每個管上做個標記，以在后續操作時區別向心面和離心面。然后各加入0.2mL液體樣品(血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等)。不同樣品處理方法如下：① 如
苯酚法提取酵母RNA實驗原理和操作步驟
（一）原理細胞內大部分RNA 均與蛋白質結合在一起，以核蛋白的形式存在。因此，提取RNA時要把RNA與蛋白質分離并除去。將細胞置于含有十二烷基磺酸鈉（Sodium dodecyl sulfate,SDS）的緩沖液中，加等體積水飽和酚，通過劇裂振蕩，然后離心形成上層水相和下層酚相。核酸溶于
植物總RNA的提取實驗原理和操作步驟
一、實驗目的通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法二、實驗原理RNA是一類極易降解的分子，要得到完整的RNA，必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍，可溶解蛋白質，破壞細胞結構，使核蛋白與核酸分離，失活RNA酶，所以RNA從細胞中釋放出來時不
關于火箭免疫電泳的實驗操作步驟介紹
1、抗原、抗體濃度的選擇 以分別固定抗原含量與抗體濃度的方法，選取最小抗原量與最低抗體濃度，在免疫電泳后能出現最清晰項端狹窄且尖的錐形沉淀峰，長達2～5cm者為標準。一般抗原用量為0.5～5微克，抗血清用量為5～10微升，稀釋度于1：10～1：200之間進行選擇。 2、預復瓊脂玻板的制備
雙向電泳（twodimensional－electrophoresis）完整操作步驟
（一）第一向等電聚焦從冰箱中取-20℃冷凍保存的水化上樣緩沖液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室溫溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混勻。3. 從小管中取出400ml水化上樣緩沖液，加入100ml樣品，充
雙向電泳操作步驟——第一向凝膠
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒丙烯酰胺TEMED磷酸過硫酸銨溴酚藍NaOH儀器、耗材電泳儀離心機實驗步驟1. ?在干凈的1.5 mm 內徑的凝膠柱管上作好標記以指示應灌制凝膠柱的髙度。用橡皮筋將凝膠柱管捆綁成束，在一水平面上垂直豎起管束，從其頂部向下推壓，使各柱管的底部平齊。2. ?用三、四層Paraf
血清蛋白質電泳技術操作步驟
1. 點樣 將醋酸纖維薄膜 (2.5cm×8cm) 一條，浸于巴比妥緩沖液，待完全浸透后，取出輕輕夾于濾紙中，吸去多余的溶液，再于薄膜的無光澤面的一端 2.0cm 處，用小玻片蘸取少許血清，垂直印于膜上，待血清滲入薄膜后，以無光澤面向下，兩端用數層浸濕的濾紙 ( 或紗布 ) 貼緊，加蓋，平衡 2 ～
酵母RNA的提制實驗原理、儀器試劑和操作步驟
一、目的：學習和掌握從酵母中提制RNA 的原理和方法，從而加深對核酸性質的認識。二、原理：提取和制備RNA 的首要問題是選RNA 含量高的材料。微生物是工業上大量生產核酸的原料，其中RNA 的提制以酵母最為理想，因為酵母核酸中主要是RNA（2.67～10.0%），DNA 很少（0.03～0.51