RNA凝膠電泳試驗操作步驟
1、將制膠用具用70%乙醇沖洗一遍,晾干備用。 2、制膠:稱取0.5g瓊脂糖粉末,加入放有36.5mL的DEPC水(蒸餾水40ml)的錐形瓶中,加熱使瓊脂糖完全溶解。稍冷(60~70°)卻后加入5ml的10x電泳緩沖液、8.5(9)ml的甲醛(+0.5μl溴化乙錠)。然后在膠槽中灌制凝膠,插好梳子,水平放置待凝固后使用。 3、加樣:在一個潔凈的小離心管(DEPC處理過的500μl的)中混合以下試劑:電泳緩沖液(10x)2μl、甲醛3.5ml、甲酰胺10ml(μl)、RNA樣品3.5(4.5)μl。混勻,置60℃保溫10min,冰上速冷。加入3μl的上樣緩沖液(染料)混勻,取適量加樣于凝膠點樣孔內。同時點RNA標準樣品。 4、電泳:打開電泳儀(電泳槽內加入1XMOPS緩沖液),穩壓7.5V/cm(ml)電泳。 5、電泳結束后通過紫外透視儀觀察。......閱讀全文
RNA凝膠電泳試驗操作步驟
1、將制膠用具用70%乙醇沖洗一遍,晾干備用。 2、制膠:稱取0.5g瓊脂糖粉末,加入放有36.5mL的DEPC水(蒸餾水40ml)的錐形瓶中,加熱使瓊脂糖完全溶解。稍冷(60~70°)卻后加入5ml的10x電泳緩沖液、8.5(9)ml的甲醛(+0.5μl溴化乙錠)。然后在膠槽中灌制凝膠,插好
RNA凝膠電泳試驗操作注意事項
本實驗中必須保持RNase污染以免RNA降解。所有試劑用DEPC水配制,用具也用DEPC水沖洗,并滅菌。 ①電泳RNA所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。 ②用新的1XTBE配制1.2%瓊脂糖凝膠,倒膠時溴化乙錠(EB)直接加入凝膠中。 ③
RNA電泳操作步驟
試劑:?瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 ?步驟?一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc)?1、稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。?2. 加700mL DEPC水溶解
雙向凝膠電泳操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
實驗方法原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應可清晰看到18s
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
雙向凝膠電泳的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
RNA凝膠電泳試驗所需實驗試劑
1、0.1%DEPC水:200ml雙蒸去離子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混勻,室溫放置過夜,高壓滅菌。 2、10x電泳緩沖液:嗎啉代丙烷磺酸(MOPS)0.4mol/L(pH 7.0);NaAc 0.1mol/L;乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L; 3、50mL變性瓊脂糖凝
瓊脂糖凝膠電泳操作步驟
一.?為了制備凝膠,將瓊脂糖粉與電泳緩沖液混合至所需濃度,并在微波爐中加熱使其熔化。瓊脂糖凝膠濃度1.?所用瓊脂糖的百分比取決于要分離的片段的大小。2.?瓊脂糖的濃度是指瓊脂糖相對于緩沖液體積的百分比(w / v),瓊脂糖凝膠通常在0.2%至3%的范圍內。3.?瓊脂糖濃度越低,DNA片段遷移越快。4
血RNA快速提取的操作步驟
操作步驟:提示:(1) 第一次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量無水乙醇!(2) 使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X。(3) 操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1 ml RLT 中加入10μlβ-巰基乙醇。此裂解液最好現用現配。配好的RLT
電泳技術RNA電泳操作步驟
試劑: 瓊脂糖(Agarose)、甲醛、甲酰胺、MOPS、EDTA、DEPC水。 步驟 一 、5 x MOPS-EDTA Buffer的配制(0.1 M MOPS pH7; 5mM EDTA; 10mM NaAc) 1. 稱量20.9g的MOPS,置于1L燒杯中。 2. 加700mL
細胞總RNA的提取操作步驟
一、準備1、 物品:Trizol、氯仿(三氯甲烷)、異丙醇、75%滅酶異醇、冷PBS、1.5ml滅酶EP管、滅酶槍頭、一次性手套、EP管架、吸管 2、 打開冷凍離心機4℃預冷 二、操作步驟: 將Trizol、氯仿、冷PBS、EP管、滅酶槍頭、一次性手套、EP管架、吸管等物品帶入細胞室。
RNA凝膠電泳試驗基本原理
RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。 判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應可清晰看到18s rR
雙向凝膠電泳技術的操作步驟
樣品要求1、建議使用的蛋白質溶解體系為8M尿素/4%CHAPS /40mMTris(Base)/65mM DTT;2、樣品濃度大于2 μg/ μl;樣品制備雙向電泳成功的關鍵在于建立一套有效的、可重復的樣品制備方法。樣品制備的影響因素包括蛋白質的溶解性、分子量、電荷數及等電點等。對于不同的樣品性質及
瓊脂糖凝膠電泳的操作步驟
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進行電泳分離。 瓊脂糖凝膠約可區分相差100bp的DNA片段,其分辨率雖比聚丙烯酰胺凝膠低,但它制備容易,分離范圍廣,尤其適于分離大片段DNA。普通瓊脂糖凝膠分離D
細胞質RNA提取實驗操作步驟
由于RNA的種類來源很多,因而提取制備方法各異,一般有苯酚法,去污劑法和鹽酸胍法,其中苯酚法實驗室最常用。組織勻漿后用苯酚處理離心,RNA即溶于上層被酚飽和的水相中,向水相加冷乙醇后, RNA即以白色絮狀沉淀析出。此法較好除去DNA和蛋白質,且獲得生物活性的RNA。實驗方法基本方案實驗材料RNA
信使RNA提取分離的操作步驟介紹
1.將0.5-1.0g寡聚(dT)-纖維懸浮于0.1M的NaOH溶液中。 2.用DEPC處理的1ml注射器或適當的吸管,將寡聚(dT)-纖維素裝柱0.5-1ml,用3倍柱床體積的DEPC H2O洗柱。 3.使用1×上樣緩沖液洗柱,直至洗出液pH值小于8.0。 4.將RNA溶解于DEPC H
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下,RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時,一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
實驗目的 掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。 二、實驗原理 RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下,RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下,RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時,一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下,RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時,一定要用變
RNA的瓊脂糖凝膠電泳實驗原理和步驟
一、實驗目的掌握植物總RNA非變性膠電泳的原理和方法。二、實驗原理RNA電泳可以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電泳使用1.0%--1.4%的凝膠,不同的RNA條帶也能分開,但無法判斷其分子量。只有在完全變性的條件下,RNA的泳動率才與分子量的對數呈線性關系。因此要測定RNA分子量時,一定要用變
單細胞凝膠電泳技術的試驗步驟
試劑及材料:1)PBS2)0.8%正常熔點凝膠(PBS配制)3)0.6%低熔點凝膠(PBS配制)4)毛玻璃片5)蓋玻片6)堿性裂解液(2.5mol/L NaCl;100mmol/L Na2EDTA;10mmol/L Tris;1%肌氨酸鈉),臨用前加10%DNMSO,1%Triton X-1007)
雙臂跌落試驗機操作試驗步驟
雙臂跌落試驗機操作試驗步驟:環境可靠性試驗是為了保證產品在規定的壽命期間,在預期的使用,運輸和貯存的所有環境下,保持功能可靠性而進行的活動。是將產品暴露在自然的或人工的環境條件下經受其作用,以評價產品在實際使用,運輸和貯存的環境條件下的性能,并分析研究環境因素的影響程度及其作用機理。通過使用各種環境
瓊脂糖凝膠電泳具體操作步驟
一、操作步驟:1、電泳方法一般的核酸檢測只需要瓊脂糖凝膠電泳就可以;如果需要分辨率高的電泳,特別是只有幾個bp的差別應該選擇聚丙烯酰胺凝膠電泳;用普通電泳不合適的巨大DNA鏈應該使用脈沖凝膠電泳。2、凝膠濃度對于瓊脂糖凝膠電泳,濃度通常在0.5~2%之間,低濃度的用來進行大片段核酸的電泳,高濃度的用