細胞介導細胞毒作用檢測法：時間分辯熒光分析法
1）銪熒光檢測法：標記靶細胞：1、EuCl3的制備：稱取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl攪拌至溶解，再用1N NaOH調節pH至4.0。加雙蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存備用。2、用預冷的標記液將靶細胞濃度調整到5×106/ml，加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖，置冰浴中20分鐘，其間搖晃數次。3、加入30μl 100mmol/L CaCl2溶液終止反應5分鐘。4、用含2mmol/L CaCl2的RPMI-1640培養液洗滌細胞5次。用含10％小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞配成5×104/ml。檢測方法：1、在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞懸液，每孔加100μl。2、向各孔加100μl效應細胞，效應細胞與靶細胞的比例根據要求而定，通常為5：1～20：1。自然釋放孔不加效應細胞只加100μl培養液，最大釋放孔中加100μl 0.5％ Triton X-100。每個實驗置三個復孔。......閱讀全文
細胞介導細胞毒作用檢測法：時間分辯熒光分析法
1）銪熒光檢測法：標記靶細胞：1、EuCl3的制備：稱取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl攪拌至溶解，再用1N NaOH調節pH至4.0。加雙蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存備用。2、用預冷的標記液將靶細胞濃度調整到5×106/ml，加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖
細胞介導細胞毒作用檢測法4：時間分辯熒光分析法
時間分辯熒光分析法1）銪熒光檢測法標記靶細胞1．EuCl3的制備：稱取58.08mg Eu2O3，用少量1N HCl攪拌至溶解，再用1N NaOH調節pH至4.0。加雙蒸水配成33～100mmol/L的保存液，4℃保存備用。2．用預冷的標記液將靶細胞濃度調整到5×106/ml，加50μl 10mg/
細胞介導細胞毒作用檢測法6：熒光法檢測CMC
熒光法檢測CMC1．用含10％小牛血清和抗生素的RPMI-1640培養液將K562細胞配成1×105/ml濃度。用同樣培養液將PBMC配成1×106/ml濃度。2．取96孔圓底細胞培養板，每孔加0.1ml K562細胞懸液；每孔加適量PBMC使效靶比為1：1～5：1，每種處理3個復孔；3個對照孔只加
細胞介導細胞毒作用檢測法1：Cr釋放法
4小時51Cr釋放法檢測CMC活性1）用51Cr鉻酸鈉標記靶細胞短期標記法1．用RPMI-1640培養液洗滌107靶細胞，去上清液。用0.5ml不含碳酸氫鈉的完全培養液懸浮細胞。加入100μCi（3.7MBq）51Cr鉻酸鈉，37℃水浴中標記1小時，每5～10分鐘搖晃一次，混勻細胞。2．如上用RPM
細胞介導細胞毒作用檢測法3：LDH釋放法
LDH釋放法1）測定方法1．用含5％小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞調整到5×104～2×105/ml，此濃度需根據情況預先標定。2．在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞，每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞，只加100μl培養液。3．向各孔加100μl效應細胞，效應細胞與
細胞介導細胞毒作用檢測法7：單細胞CMC試驗
單細胞CMC試驗1．用細胞培養液等量混合效應細胞和靶細胞，30℃水浴10分鐘。室溫中250×g離心5分鐘，去上清液。同量靶細胞不加效應細胞同樣處理作為對照。2．用少量細胞培養液輕輕懸浮細胞，吸管上下吹打5～6次。這一分散細胞的步驟關系到試驗的準確性和重復性，應當設法保持技術的一致性。取少許細胞懸液，
細胞介導的細胞毒作用（CMC）檢測法：細胞的制備
CMC中效應細胞的制備1）用淋巴細胞分離液分離PBMC1．抽取正常人靜脈血加到肝素抗凝管中，加2倍量磷酸鹽（PBS）懸浮細胞。將此懸液小心加在淋巴細胞分離液上，400×g離心30分鐘。2．離心后紅細胞在管底，PBMC在血漿和淋巴細胞分離液的交界面。收集PBMC，用PBS洗滌細胞兩次，每次離心150×
細胞介導的細胞毒作用（CMC）檢測法：效應細胞和靶...
細胞介導的細胞毒作用（CMC）檢測法：效應細胞和靶細胞的制備CMC中效應細胞的制備：1）用淋巴細胞分離液分離PBMC：1、抽取正常人靜脈血加到肝素抗凝管中，加2倍量磷酸鹽（PBS）懸浮細胞。將此懸液小心加在淋巴細胞分離液上，400×g離心30分鐘。2、離心后紅細胞在管底，PBMC在血漿和淋巴細胞分離
細胞介導細胞毒作用檢測法5：用MTT檢測法測定CMC
用MTT檢測法測定CMC1．?Fen細胞培養于含10％小牛血清的RPMI-1640培養液中，在625px2培養瓶中生長到接近匯合。用含0.05％胰蛋白酶，0.02％?EDTA的PBS消化細胞5分鐘，洗滌后，用細胞培養液將細胞配成1×105/ml。2．?取96孔細胞培養板，每孔加0.1ml細胞懸液，在
細胞介導細胞毒作用檢測法2：[3H]脫氧胸苷釋放法
[3H]脫氧胸苷釋放法1）標記靶細胞1．用含5％小牛血清的RPMI-1640培養液將靶細胞配成2×106/ml，取10μCi（370kBq）[3H]TdR加到1ml靶細胞中，37℃水浴標記4～6小時，每30分鐘搖晃一次。2．用RPMI-1640培養液洗滌細胞3次，每次400×g 10分鐘。用含5％小
補體介導的細胞毒實驗——補體介導法
細胞毒實驗可應用于：（1）檢查細胞膜抗原；（2）鑒定抗體的特異性。實驗方法原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死
抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用
ADCC是一種細胞毒反應，指表達FcR的具有殺傷活性細胞（如NK,單核巨噬）通過識別Ab的Fc段直接殺傷被抗體包被的靶細胞。
時間分辨熒光分析法（TRFIA）
時間分辨熒光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年發展起來的一測微量分析方法，是目前最靈敏的微量分析技術,其靈敏度高達10-19，較放射免疫分析（RIA）高出3個數量級。 時間分辨熒光分析法（TRFIA）實際上是在熒光分析（FIA）的基礎上
時間分辨熒光分析法（TRFIA）
時間分辨熒光分析法（Time resolved fluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年發展起來的一測微量分析方法，是目前最靈敏的微量分析技術,其靈敏度高達10-19，較放射免疫分析（RIA）高出3個數量級。 時間分辨熒光分析法（TRFIA）實際上是在熒光分析（FIA）的基礎上發
劃時代的檢測技術——時間分辨熒光分析法（TRFIA）
放射免疫分析（RIA），以其高度特異性靈敏度和實用性，吸引著各國的生物醫學工作者，但操作中始終存在放射性污染、同位素半衰期短及試劑盒穩定性問題。為此，人們發展了一系列非放射性標記技術，如酶標記、化學發光、生物發光標記等技術，其中，時間分辨熒光免疫分析技術。由于靈敏度及線性范圍明顯優于其它技術，最為引
時間分辨熒光免疫分析法的原理
在生物流體和血清中的許多復合物和蛋白本身就可以發熒光，因此使用傳統的發色團進而進行熒光檢測的靈敏度就會嚴重下降。大部分背景熒光信號是短時存在的，因此將長衰減壽命的標記物與時間分辨熒光技術相結合，就可以使瞬時熒光干擾減到最小化。時間分辨熒光分析法（TRFIA）實際上是在熒光分析（FIA）的基礎上發展起
補體介導的細胞毒實驗
實驗方法原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細胞
補體介導的細胞毒實驗
實驗方法原理 帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細
補體介導的細胞毒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或
補體介導的細胞毒試驗
一、實驗原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細胞
補體介導的細胞毒實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或
補體介導的細胞毒試驗
1、實驗原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細胞
補體介導的細胞毒試驗
【原理】??補體介導的細胞毒試驗（complement??dependent??cytotoxicity???test）的原理是特異性抗體與細胞膜上相應抗原結合后，在補體的參與下，可產生細胞膜損傷，細胞死亡；不帶相應抗原的細胞仍然存活。利用染料排斥實驗判定淋巴細胞死活狀態，活細胞不著色，具有折光性，
時間分辨熒光免疫分析法的分析原理
普通物質熒光光譜分為激發光譜和發射光譜，在選擇熒光物質作為標記物時，必須考慮激發光譜和發射光譜之間的波長差，即Stokes位移的大小。如果Stokes位移小，激發光譜和發射光譜常有重疊，相互干擾，影響檢測結果的準確性。鑭系元素的熒光光譜有較大的Stokes位移，最大可達290nm，激發光譜和發射光譜
時間分辨熒光免疫分析法的主要應用
1.激素：甲狀腺激素、甾體類激素。2.病毒性肝炎標志物。3.腫瘤相關抗原、胃蛋白酶原（PG）。4.藥物。5.多肽類。
關于免疫細胞的功能檢測—細胞介導的細胞毒試驗的介紹
一種細胞通過直接接觸將另一種細胞殺傷的現象，稱為細胞介導的細胞毒作用。在人體內有兩種能直接殺傷靶細胞的細胞，即自然殺傷細胞(NK細胞)和特異性殺傷T細胞(特異性Tc細胞)。NK細胞存在于未受抗原刺激的正常人體，對某些受感染的細胞、腫瘤細胞或正常的未成熟造血細胞有殺傷活性。特異性Tc細胞存在于受過
細胞技術專題：補體介導的細胞毒試驗
1、實驗原理帶有特異抗原的靶細胞（如正常細胞、腫瘤細胞、病毒感染細胞）與相應抗體結合后，在補體的參與下，引起靶細胞膜損傷，導致細胞膜的通透性增加、細胞死亡。染料（例如：伊紅-Y、臺盼藍）可通過細胞膜進入細胞內使細胞著色，故可用于指示死細胞或瀕死細胞，而活細胞不著色。此即補體依賴性細胞毒試驗，利用細胞
熒光分析法檢測苯并芘的介紹
該方法具有檢測限低、靈敏度高、選擇性好等優點，常用于痕量分析，是目前國際上公認的比較準確的方法。GB/T5750.8－2006規定用紙層析－熒光分光光度法測定生活飲用水及其水源水中苯并芘，先將樣品用有機溶液或皂化提取，再液－液分配或色譜凈化，然后在乙酰化濾紙上分離苯并芘，由于其在紫外燈照射下呈現
抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用是什么意思？
抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用是指表達IgGFc受體的NK細胞、巨噬細胞和中性粒細胞等，通過與已結合在病毒感染細胞和腫瘤細胞等靶細胞表面的IgG抗體的Fc段結合，而殺傷這些靶細胞的作用。
Maintrac分析法檢測腫瘤細胞
化療效果是癌癥治療過程中關鍵所在，也是令患者和醫生都感到困惑的問題。本文介紹了一種創新的Maintrac分析法，能在早期治療中幫助醫生選擇適合的個性化治療方案，以期達到更好的療效。 德國癌癥病患的數量每年都在不斷增加，根據羅伯特科赫研究所數據顯示：每年約有高達450000人罹患癌癥。對患者