細胞增殖檢測：H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)滲入法材料
一、材料及試劑 1、培養基：RPMI-1640或TC199培養液 2、PHA；同形態學方法 3、小牛血清 4、3H-TdR；選用比活性為2Mci~10Mci/mg分子的制品，將1Mci/ml溶液以生理鹽水稀釋成100uci/ml，于4℃保存備用。臨用時再用培養液稀釋成10uci/ml溶液。 5、3%冰醋酸 6、濃甲醛 7、30%H2O2液 8、閃爍液 PPO（2，5二苯基噁唑）；5.00g POPOP[1，4-雙（5-苯基噁唑基-2苯；0.30g 無水乙醇；200.00ml 甲苯；800.00ml 混合即可 二、操作方法 1、培養液中按1%的體積加雙抗（含青霉素1萬U/ml，鏈霉素0.01g/ml）及肝素液（含肝素100U/ml）。用3.5%NaHCO3液調pH值為7.2~7.4，......閱讀全文
細胞增殖檢測：H胸腺嘧啶核苷(3HTdR)滲入法材料
一、材料及試劑?1、培養基：RPMI-1640或TC199培養液?2、PHA；同形態學方法?3、小牛血清?4、3H-TdR；選用比活性為2Mci~10Mci/mg分子的制品，將1Mci/ml溶液以生理鹽水稀釋成100uci/ml，于4℃保存備用。臨用時再用培養液稀釋成10uci/ml溶液。?5、3%
細胞增殖檢測：3HTdR滲入法原理和操作步驟
一、原理 T細胞、B細胞表面具有識別抗原的受體和有絲分裂原受體，在特異性抗原刺激下可使相應淋巴細胞克隆發生增殖。植物血凝素（PHA）、刀豆蛋白A（ConA），抗CD2、抗CD3McAb作為多克隆刺激劑可選擇性地刺激T細胞增殖；而抗IgM、含葡萄球菌A蛋白的菌體（SAC）、脂多糖（LPS，對小鼠有
H胸腺嘧啶脫氧核苷的標記指數實驗
實驗方法原理細胞培養至適當密度，用1H -胸腺嘧啶脫氧核苷標記 30min，清洗后固定細胞，除去未摻入的前體物，準備同位素放射自顯術。實驗步驟材料無菌培養細胞生長液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脫氧核苷，2.0MBq/ml (約 50uCi/ml)，75 GBq/mmol (約
細胞增殖檢測方法
一、胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）滲入法?胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的堿基，也是DNA合成的必需物質。用同位素3H標記TdR即3H-TdR作為DNA合成的前體能摻入DAN合成代謝過程，通過測定細胞的放射性強度，可以反映細胞DAN的代謝及細胞增殖情況。但是具有放射性。?二、MTT檢測法?MTT檢
細胞化學詞匯胸腺嘧啶核糖核苷
中文名稱：胸腺嘧啶核糖核苷英文名稱：thymine ribnucleoside定 義：由胸腺嘧啶的N-1與D-核糖的C-1通過β糖苷鍵連成的化合物，其磷酸酯是胸苷酸。在轉移核糖核酸中發現。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
細胞生長的檢查方法（一）
1.直接計數法是zui簡單的檢測細胞生長的方法。計數細胞一般利用臺盼藍(錐蟲藍染色，臺盼藍(錐蟲藍)不能透過活細胞正常完整的細胞膜，故活細胞不著色。而死亡細胞的細胞膜通透性增高，可使染料進入細胞內而使細胞著色。因此，鏡下未染色細胞認為是活細胞，而染色細胞認為是死亡細胞。經典的細胞計數常用到血細胞計數
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性
實驗概要IL-1可協同有絲分裂原(如ConA或PHA)刺激的T細胞或胸腺細胞發生增殖反應，通過3H-TdR DNA摻入法，即可測定IL-1生物活性。此法是目前測定IL-1活性常用而簡便的方法，其敏感度達10-50pg/ml。但本法缺乏特異性，因為IL-1亦可刺激T細胞或胸腺細胞產生一些細胞因
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性
實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1.?3H-TdR、β-液閃汁數儀，微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器，不誘鋼網或者毛玻璃片
小鼠胸腺細胞增殖3HTdR摻入法檢測IL1的生物活性實驗
實驗試劑1. 75%酒精2. 5% FCS-RPMI-1640完全培養液與RPMI-1640完全培養液3. ConA或PHA4. IL-1標準品：倍比稀釋成至少6個不同濃度值。實驗設備1. 3H-TdR、β-液閃汁數儀，微量細胞收集儀2. 解剖刀、剪、單皿、研磨工具(玻璃勻漿器，不誘鋼網或者毛玻璃片
胸腺嘧啶核苷的原理
在單抗制備中，由于需要進行選擇性殺死非目標細胞，所以使用添加HAT的選擇性培養基。
胸腺嘧啶核苷的性質
一般核苷為無色的高熔點結晶；易溶于熱水，難溶于冷水，嘧啶核苷較嘌呤核苷更易溶于水，難溶于有機溶劑，苯甲酰化后可溶于醇。腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷為弱堿性，尿嘧啶核苷為弱酸性，溶于強堿中；可制成鉛鹽、銀鹽、苦味酸鹽、苦酮酸鹽。核苷上的羥基可起烷基化反應，如二苯甲基化、甲基化、芐基化、硅烷化等反應；也可進行
檢測細胞增殖的種類以及方法步驟
目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法，通過直接測定進行分裂的細胞數來評價細胞的增殖能力。另一種是間接的方法，即細胞活力（cell viability）檢測方法，通過檢測樣品中健康細胞的數目來評價細胞的增殖能力。顯然，細胞活力檢測法并不能最終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞
檢測細胞增殖的種類以及方法步驟
目前主要有兩種用于檢測細胞增殖能力的方法。一種是直接的方法，通過直接測定進行分裂的細胞數來評價細胞的增殖能力。另一種是間接的方法，即細胞活力（cellviability）檢測方法，通過檢測樣品中健康細胞的數目來評價細胞的增殖能力。顯然，細胞活力檢測法并不能最終證明檢測樣品中的細胞是否在增殖。如細胞在
T淋巴細胞轉化試驗的詳細介紹
樣本要求 肝素抗凝血5ml，室溫 參考值 形態學檢測法：60.1%±7.6%。 3H-TdR滲入法：0～2%。 刺激指數（SI）>2為有意義。 臨床意義 1、T淋巴細胞在體外培養過程中受有絲分裂原刺激，可轉化成為體積較大的母細胞。計數轉化的細胞可反映機體的細胞免功能。 2、細胞免疫功
胸腺嘧啶核苷的常見類型
常見的核苷有：尿嘧啶核苷（尿嘧啶－1-β-D-呋喃核糖核苷）（見結構式a）、腺嘌呤核苷（腺嘌呤-9-β-D－呋喃核糖核苷）(b)、胞嘧啶核苷（胞嘧啶-1-β-D-呋喃核糖核苷）(c)、鳥嘌呤核苷（鳥嘌呤－9-β-D－呋喃核糖核苷）(d)、胸腺嘧啶核苷（胸腺嘧啶－1-β-D-2′－脫氧呋喃核糖核苷）(
胸腺嘧啶核苷的制備方法
核苷可從水解核酸來制備。用吡啶水溶液、氧化鋁或酶促水解核糖核酸RNA，可得到核糖核苷；用氧化鋁或酶水解脫氧核糖核酸DNA可得到脫氧核糖核苷。核苷也可用化學方法合成。適當保護的核糖或脫氧核糖與堿基衍生物縮合，可得到相應的核糖核苷和脫氧核糖核苷。或在糖的C1上先形成碳－氮和碳－碳鍵，然后閉環成雜環堿基而
胸腺嘧啶核苷的形成過程
核酸中的核苷由嘌呤或嘧啶堿與核糖或脫氧核糖縮合而成。核糖分子中的碳原子(C1)與嘧啶分子中的氮原子(N1)或嘌呤分子中的氮原子(N9)之間形成苷鍵，生成N－糖苷，即嘧啶或嘌呤的呋喃核糖苷，稱為核糖核苷。2-脫氧核糖分子中的碳原子(C1)與嘧啶分子中的氮原子(N1)或嘌呤分子中的氮原子(N9)之間形成
細胞增殖檢測：3H同位素滲入法實例
樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞，是目前發現的功能最強大的抗原遞呈細胞(APC)。 DC 是機體適應性 T 細胞免疫應答的始動者，主要在（1）腫瘤免疫反應（2）在疫苗生產過程中分別起著至關重要的作用。實驗方法原理樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來
3H胸腺嘧啶核苷摻入檢查法
實驗概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine，3HTdR)摻入試驗，是體外淋巴細胞轉化試驗較客觀、重復性好、結果準確的方法之一。實驗原理當淋巴細胞受分裂原(PHA等)或特異性抗原刺激發生轉化時，必然伴有DNA的大量合成，若將具有放射性的3HTdR加到培養液內，則可被作為合成DNA的原料而攝入轉化
3H胸腺嘧啶核苷摻入檢查法
實驗概要3H胸腺嘧啶核苷(3Hthymidine，3HTdR)摻入試驗，是體外淋巴細胞轉化試驗較客觀、重復性好、結果準確的方法之一。實驗原理當淋巴細胞受分裂原(PHA等)或特異性抗原刺激發生轉化時，必然伴有DNA的大量合成，若將具有放射性的3HTdR加到培養液內，則可被作為合成DNA的原料而攝入轉化
T淋巴細胞轉化試驗的注意事項
檢測方法可分為3H-TdR摻入法、形態學法和MTT法等。 1、3H-TdR摻入法 T淋巴細胞受PHA或特異性抗原刺激后，發生有絲分裂，細胞進入S期，且伴隨新的DNA合成，若此時加入氚標記的胸腺嘧啶核苷3H-TdR，則3H-TdR可被淋巴細胞作為合成DNA的原料攝入，根據3H-TdR的攝入量，可
胸腺嘧啶核糖核苷的結構組成
中文名稱胸腺嘧啶核糖核苷英文名稱thymine ribnucleoside定 義由胸腺嘧啶的N-1與D-核糖的C-1通過β糖苷鍵連成的化合物，其磷酸酯是胸苷酸。在轉移核糖核酸中發現。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
edu實驗和克隆形成試驗一樣嗎
我們在實驗過程中,經常被該如何設計實驗而困擾,不知從何下手開展實驗,細胞實驗作為被經常用到的體外實驗,在科研工作中占有很大的比例。下面就盤點一下實驗室常用的細胞實驗技術1細胞增殖常用來檢測細胞增殖的方法是CCK8法和Brdu法。CCK8主要通過分光光度計進行檢測,OD只越高,說明存活的細胞越多,增殖
5溴脫氧尿嘧啶核苷替換技術檢測細胞增值
5 - 溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU），是人工合成的胸腺嘧啶（thymidine）類似物，在 DNA 合成期（S 期）， BrdU 能夠代替胸腺嘧啶而滲入正在復制的 DNA 分子中，然后用熒光標記的 BrdU 抗體進行染色，就可以對細胞增殖進行檢測。在 BrdU 檢測同時加入DNA 染料同時對細胞周期
細胞活性檢測DNA合成增殖實驗
BrdU檢測法BrdU為胸腺嘧啶核苷（Thymine）的衍生物，可用于標記活細胞中新合成的DNA（細胞活性周期S期），BrdU可隨著DNA復制進入子細胞，因此在加入BrdU后分裂增殖的細胞DNA都會帶有BrdU標記，可通過抗BrdU單克隆抗體檢測，借此檢測細胞的增殖能力，但BrdU單克隆抗體檢測過程
胸腺嘧啶核糖核苷的基本信息
中文名稱胸腺嘧啶核糖核苷英文名稱thymine ribnucleoside定 義由胸腺嘧啶的N-1與D-核糖的C-1通過β糖苷鍵連成的化合物，其磷酸酯是胸苷酸。在轉移核糖核酸中發現。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法
細胞增殖檢測：3H同位素滲入實例
一、原理?淋巴細胞在有絲分裂原PHA、ConA 等的刺激下，產生增殖反應，DNA和RNA合成明顯增加，如在培養液中加入3H－胸腺嘧啶核苷（3H-TdR），則可被轉化中的細胞攝入。測定標記淋巴細胞的放射強度可反映淋巴細胞增殖的程度。?二、儀器和材料?RPMI-1640 細胞培養液、小牛血清、2-巰
T淋巴細胞轉化試驗的臨床意義及注意事項
臨床意義 1、T淋巴細胞在體外培養過程中受有絲分裂原刺激，可轉化成為體積較大的母細胞。計數轉化的細胞可反映機體的細胞免功能。 2、細胞免疫功能缺陷或低下者，其轉化率可明顯低于正常，如運動失調性毛細血管擴張癥。此外，惡性腫瘤、霍奇金病、淋巴瘤、淋巴肉芽腫、重癥真菌感染、重癥結核轉化率可低于正常
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理
T淋巴細胞轉化實驗的基本原理T細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后,可出現細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化.淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一.T 細胞在體外培養時,受到非特異性有絲分裂原