檢測方法可分為3H-TdR摻入法、形態學法和MTT法等。
1、3H-TdR摻入法 T淋巴細胞受PHA或特異性抗原刺激后,發生有絲分裂,細胞進入S期,且伴隨新的DNA合成,若此時加入氚標記的胸腺嘧啶核苷3H-TdR,則3H-TdR可被淋巴細胞作為合成DNA的原料攝入,根據3H-TdR的攝入量,可判斷細胞的增殖程度。培養細胞用液體閃爍儀測量,記錄每分鐘脈沖數(cpm),通過計算,得出刺激數(SI),以此表示轉化能力。計算公式為SI (刺激指數)=PHA刺激管cpm均值/對照管cpm均值。
2、形態學法 T淋巴細胞與有絲分裂原(PHA)或特異性抗原置37℃孵育72h,淋巴細胞會發生一系列形態變化,如細胞體積增大、胞漿深染、胞核增大、染色質疏松、核仁明顯等,此即為淋巴母細胞,然后通過顯微鏡計數,測出淋巴母細胞的百分率。
3、MTT法 MTT為淡黃色偶氮唑鹽,活細胞特別是增殖細胞的線粒體脫氫酶活性增高,通過線粒體能量代謝過程,可將MTT代謝形成藍紫色的甲臜沉積于細胞內或細胞周圍,而且甲臜形成量與細胞增殖程度呈正相關,因此通過比色分析就能判斷出淋巴細胞的增殖程度。計算公式為:SI(刺激指數)=PHA刺激組吸光度(A)均值/對照管組吸光度(A)均值。