乙二醛/DMSO變性瓊脂糖凝膠電泳
試劑、試劑盒 10XBPTE 電泳緩沖液 二甲基亞砜(DMSO) 去離子乙二醛 乙一醛反府混合液 上樣緩沖液儀器、耗材 水平電泳裝置實驗步驟 (一)村料與設備1)10XBPTE 電泳緩沖液:100 mmol/LPIPES,300 mmol/LTris,lOmmol/LEDTA(pH8.0)2) 二甲基亞砜(DMSO)3) 去離子乙二醛4) 乙一醛反府混合液:6 mlDMSO,2 ml 去離子乙二醛,2 mL10XBPTE 電泳緩沖液,0.6 ml80% 甘油,0.2 ml 溴化乙錠(10 mg/ml)5) 上樣緩沖液:50% 甘油.10 mmol/L 磷酸鈉 (PH7.0),0.25% 溴酚藍,0.25% 二甲苯青6) 水平電泳裝置(二)操作方法1) 制備凝膠:用 1XBPTE 電泳緩沖液配制 1.2% 的瓊脂糖凝膠2) 電泳:向 1?2ulRNA 樣品 (總共 10ug)中加入 10ul 乙二醛反應混合液,55℃ 保溫lh......閱讀全文
乙二醛/DMSO-變性瓊脂糖凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 10XBPTE 電泳緩沖液 二甲基亞砜(DMSO) 去離子乙二醛 乙一醛反府混合液 上樣緩沖液
乙二醛/DMSO-變性瓊脂糖凝膠電泳
試劑、試劑盒 10XBPTE 電泳緩沖液 二甲基亞砜(DMSO) 去離子乙二醛 乙一醛反府混合液 上樣緩沖液儀器、耗材 水平電泳裝置實驗步驟 (一)村料與設備1)10XBPTE 電泳緩沖液:100 mmol/LPIPES,300 mmol/LTris,lOmmol/LEDTA(pH8.0)2) 二甲
5.2.2-乙二醛/DMSO-變性瓊脂糖凝膠電泳
在微酸的條件下,乙二醛的兩個乙醛基與鳥苷的亞氨基相互作用形成環狀化合物,抑制了鏈間 Watson-Crick 鍵的形成,使 RNA不能形成穩定的二級結構,它在瓊脂糖凝膠電泳中的遷移率與其大小的對數成正比。試劑、試劑盒10XBPTE 電泳緩沖液二甲基亞砜(DMSO)去離子乙二醛乙一醛反府混合液上樣緩沖
根據大小分離RNA:乙二醛化RNA的瓊脂糖凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這個方法將乙二醛變性和瓊脂糖凝膠電泳結合了起來(從 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而來)。RNA 的自動乙二醛化、溴化乙錠染色及電泳緩沖液的修改由 Burne
根據大小分離RNA:乙二醛化RNA的瓊脂糖凝膠電泳
這個方法將乙二醛變性和瓊脂糖凝膠電泳結合了起來(從 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而來)。RNA 的自動乙二醛化、溴化乙錠染色及電泳緩沖液的修改由 Burnett (1977)提供。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗
根據大小分離RNA:乙二醛化RNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗方法原理 這個方法將乙二醛變性和瓊脂糖凝膠電泳結合了起來(從 McMaster 和 Carmichael (1977), Thomas(1983) 的方法修改而來)。RNA 的自動乙二醛化、溴化乙錠染色及電泳緩沖液的修改由 Burnett (1977)提供。實驗材料 RNA 樣品RNA 大小標準
甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 10XMOPS 電泳緩沖液 甲醛 甲酰胺 10X 加樣緩沖液 溴化乙錠 瓊脂糖
甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳
試劑、試劑盒 10XMOPS 電泳緩沖液 甲醛 甲酰胺 10X 加樣緩沖液 溴化乙錠 瓊脂糖 DEPC 處理的水儀器、耗材 水平電泳裝置 水浴實驗步驟 (一)材料與設備1) 水平電泳裝置2) 水浴3)10XMOPS 電泳緩沖液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸鈉,10
5.2.1-甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳
試劑、試劑盒10XMOPS 電泳緩沖液甲醛甲酰胺10X 加樣緩沖液溴化乙錠瓊脂糖DEPC 處理的水儀器、耗材水平電泳裝置水浴實驗步驟(一)材料與設備1) 水平電泳裝置2) 水浴3)10XMOPS 電泳緩沖液:0.2mol/LMOPS(PH7.0),20 mmol/L 乙酸鈉,10 mmol/LEDT
經乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進行的RNA電泳
這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進行電泳, 因為前者泳動速率較慢而且需將電泳液時行循環以避免電泳過程中形成過高的H+梯度。盡管上述兩種凝膠具有近乎相等的分辨率(Miller,1987),但用含朋乙二醛-DMSO的凝
經乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進行的RNA電泳
這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。 含有乙二醛-DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進行電泳, 因為前者泳動速率較慢而且需將電泳液時行循環以避免電泳過程中形成過高的H+梯度。盡管上述兩種凝膠具有近乎相等的分辨率(Miller,1987),但用含朋乙二醛-DMSO的凝膠對
變性梯度凝膠電泳實驗(二)
實驗過程1、將兩塊玻璃對齊放入電泳支架上(帶缺口的玻璃缺口朝上并位于內側),旋緊固定螺絲并夾好夾子。注入去離子水,檢測是否漏水后倒出去離子水。2、配制高變性劑濃度凝膠溶液和低變性劑濃度凝膠溶液,在灌膠前加入適量的10%過硫酸銨溶液和TEMED作為聚合引發劑和催化劑并充分混勻。關閉梯度混合儀的兩個閥門
Northern雜交操作步驟和DNA探針的制備與標記(1)
一.原理Northern 雜交是用來測量真核生物RNA的量和大小估計其豐度的實驗方法,可以從大量的RNA樣本同時獲得這些信息。其基本步驟包括:1. 完整mRNA的分離2. 根據RNA的大小通過瓊脂糖凝膠電泳對RNA進行分離3. 將RNA 轉移到固相支持物上,在轉移的過程中,要保持RNA 在凝膠中的相
Northern-blot實驗操作步驟(1)
一、經乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進行的RNA電泳這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進行電泳,因為前者泳動速率較慢而且需將電泳液時行循環以避免電泳過程中形成過高的H+梯度。盡管上述兩種凝膠具有近乎相等的分辨率(Miller
瓊脂糖凝膠電泳實驗——瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳可應用于:(1)DNA切膠回收;(2)DNA分離;(3)佐證DNA是否重組,質粒等是否切開以及其他分子生物學研究。實驗方法原理用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳的最主要區別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構,物質分子通過時會受到阻
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
實驗方法原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應可清晰看到18s
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的
RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳實驗原理、材料和操作步驟
一、實驗目的學習RNA瓊脂糖凝膠電泳的使用技術。二、實驗原理RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中,可以分離混合物中不同分子量的RNA分子,凡是無法確定分子量。只有在變性情況下,RNA分子完全伸展,其泳動率才與分子量成正比。判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的
變性梯度凝膠電泳
實驗材料?DNA樣品試劑、試劑盒?尿素去離子甲酰胺丙烯酰胺甲叉雙丙烯酰胺瓊脂糖 儀器、耗材?PCR擴增儀變性梯度凝膠電泳儀凝膠成像及分析系統紫外透射儀高速離心機電泳儀電泳槽微量加樣器Tip頭Tip頭盒Eppendorf管Eppendorf管架
變性梯度凝膠電泳
變性梯度凝膠電泳(DGGE) ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 變性梯度凝膠電泳(DGGE)是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。核酸的雙螺旋結構在一定條
變性梯度凝膠電泳
變性梯度凝膠電泳(DGGE)是一種根據DNA片段的熔解性質而使之分離的凝膠系統。(1)將凝膠設置在雙重變性條件下,可以檢測DNA分子中的任何一種單堿基的替代、移碼突變以及少于10個堿基的缺失突變,被廣泛應用于基因突變檢測及相關研究。(2) 用于癌癥和遺傳病的篩查及診斷,而且,在癌癥(殘存性病灶、突變
Northern雜交技術
經乙二醛和二甲基亞砜變性處理后進行的RNA電泳這一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。?含有乙二醛-DMSO的凝膠比含有甲醛的凝膠更難于進行電泳,因為前者泳動速率較慢而且需將電泳液時行循環以避免電泳過程中形成過高的H+梯度。盡管上述兩種凝膠具有近乎相等的分辨率(Miller,
大鼠乙二醛酶Ⅰ(GLO1)酶聯免疫分析(ELISA)
大鼠乙二醛酶Ⅰ(GLO1)酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中乙二醛酶Ⅰ(GLO1)的活性。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠乙二醛酶Ⅰ(GLO1)水平。用純化的大鼠乙二醛酶Ⅰ(GLO1)抗體
瓊脂糖凝膠電泳
在凝膠電泳中,首先應用的是瓊脂電泳,它具有下列優點:(1)瓊脂含液體量 大,可達98-99%,近似自由電泳,但是樣品的擴散度比自由電泳小,對蛋白質的吸附 極微。(2)瓊脂作為支持體有均勻,區帶整齊,分辨率高,重復性好等優點。(3) 電泳速度快。(4)透明而不吸收紫外線,可以直接用紫外檢測儀作定量測定
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳1.??????用封邊帶封住塑料托盤開放的兩邊或清潔干燥的玻璃板的邊緣形成一個模具,置一個水平支架上。2.??????配制足量的電泳緩沖液(1×TAE或0.5×TBE)用以灌滿電泳槽和配制凝膠。?配膠和灌滿電泳槽使用同一批緩沖液。3.??????根據欲分離DNA片段大小用電泳緩沖液配制
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳可以用于:(1)檢測PCR結果;(2)分離不同大小的DNA條帶。實驗方法原理瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維,后者再聚合成半徑 20~30 n
瓊脂糖凝膠電泳
實驗方法原理 瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維,后者再聚合成半徑 20~30 nm 的超螺旋結構。實驗材料 DNA 樣品DNA 大小標準品試劑、試劑盒 瓊脂
瓊脂糖凝膠電泳
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 瓊脂糖是 D- 和 L- 半乳糖殘基通過 α (1→3)和 β (1→4) 糖苷鍵交替構成的線狀聚合物。L- 半乳糖殘基在 3 和 6 位之間形成脫水連接。瓊脂糖鏈形成螺旋纖維,后者再聚合成半徑 20~30 nm 的超螺旋結構。
瓊脂糖凝膠電泳
學習瓊脂糖凝膠電泳的基本原理; (2) 掌握使用水平式電泳儀的方法; (3)掌握核酸瓊脂糖凝膠電泳的基本操作 2實驗原理 瓊脂糖凝膠具有網絡結構,物質分子通過時會受到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決于凈電荷的性質和數量,而且還取決于分子大小