半制備規模單鏈RNA純化（一）
Sean M. McCarthy and Martin GilarWaters Corporation, Milford, MA, U.S.引言寡核苷酸合成是非常高效和高產率的過程。在固相載體上進行寡核苷酸反應的典型產率為每耦合階98～99.5%。在典型的多階寡核苷酸合成中，雜質聚集在一起，即使是一般大小的21基體寡核苷酸的總產率也達到67～90%，較長鏈的寡核苷酸的產率相應較低。研究人員通常需要使用純度高于初步合成混合物的材料。因此，用于基因敲除、基因分型和診斷目的寡核苷酸通常需要在合成后進行純化。適合實驗室規模寡核苷酸純化的經濟可行的解決方案很少，而現有的方法（比如離子交換色譜分析法和聚丙烯酰胺凝膠電泳法）通常比較繁瑣和費時。在本應用說明書中，我們介紹了一種成本低、速度快的中等數量材料的純化方法，單次進樣載量高達140 nmoles，采用沃特世 ACQUITY UPLC?系統和寡核苷酸分離技術（OST）色譜柱化學技術可達......閱讀全文
半制備規模單鏈RNA純化（一）
Sean M. McCarthy and Martin GilarWaters Corporation, Milford, MA, U.S.引言寡核苷酸合成是非常高效和高產率的過程。在固相載體上進行寡核苷酸反應的典型產率為每耦合階98～99.5%。在典型的多階寡核苷酸合成中，雜質聚集在一起，即使是一
半制備規模單鏈RNA純化
引言寡核苷酸合成是非常高效和高產率的過程。在固相載體上進行寡核苷酸反應的典型產率為每耦合階98～99.5%。在典型的多階寡核苷酸合成中，雜質聚集在一起，即使是一般大小的21基體寡核苷酸的總產率也達到67～90%，較長鏈的寡核苷酸的產率相應較低。研究人員通常需要使用純度高于初步合成混合物的材料。因此，
半制備規模單鏈RNA純化
寡核苷酸合成是非常高效和高產率的過程。在固相載體上進行寡核苷酸反應的典型產率為每耦合階98～99.5%。在典型的多階寡核苷酸合成中，雜質聚集在一起，即使是一般大小的21基體寡核苷酸的總產率也達到67～90%，較長鏈的寡核苷酸的產率相應較低。研究人員通常需要使用純度高于初步合成混合物的材料。因此，
半制備規模單鏈RNA純化（二）
圖2中所示被選中的餾份收集窗表示不同的質量負荷。峰值采集后，樣品可以根據需要對等分和干燥，以便長期儲存。TEAA的揮發性使離子對緩沖組分的去除非常容易。溶劑蒸發后被純化的寡核苷酸實際上是不含鹽的。?UPLC條件純化RNA寡核苷酸的純度通過ACQUITY UPLC系統來驗證。如圖3所示，我們的純化方法
單鏈和雙鏈M13噬菌體DNA的大規模制備
實驗方法原理 這個方案主要用于制備大量 M13 噬菌體的雙鏈 DNA，因在實驗室中 M13 噬菌體經常被用作克隆載體，以及在某些特殊用途時需要制備大量的單鏈噬菌體 DNA，如當一個特定的重組體被多次用于制備反射性標記探針或構建大量定點突變體時。實驗材料 大腸桿菌 F' 菌株M13 噬菌體原液
單鏈和雙鏈M13噬菌體DNA的大規模制備
這個方案主要用于制備大量 M13 噬菌體的雙鏈 DNA，因在實驗室中 M13 噬菌體經常被用作克隆載體，以及在某些特殊用途時需要制備大量的單鏈噬菌體 DNA，如當一個特定的重組體被多次用于制備反射性標記探針或構建大量定點突變體時。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理這個方案主
單鏈和雙鏈M13噬菌體DNA的大規模制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這個方案主要用于制備大量 M13 噬菌體的雙鏈 DNA，因在實驗室中 M13 噬菌體經常被用作克隆載體，以及在某些特殊用途時需要制備大量的單鏈噬菌體 DNA，如當一個特定的重組體被多次用于制備反射性標記探針或構建大量定點突變體時
細胞化學詞匯單鏈RNA
中文名稱：單鏈RNA英文名稱：single-stranded RNA;ssRNA定 義：只含有一條鏈的RNA分子。生物體中絕大部分RNA是單鏈RNA，形成二級結構時，是既有單鏈、又有雙鏈結構域的RNA分子；只有某些RNA病毒是由兩條鏈互補而成的雙鏈RNA。應用學科：生物化學與分子生物學（一級學科）
單鏈RNA的結構特點
中文名稱單鏈RNA英文名稱single-stranded RNA;ssRNA定 義只含有一條鏈的RNA分子。生物體中絕大部分RNA是單鏈RNA，形成二級結構時，是既有單鏈、又有雙鏈結構域的RNA分子；只有某些RNA病毒是由兩條鏈互補而成的雙鏈RNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與
小規模快速制備果蠅RNA
小規模快速制備果蠅RNA ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Northern 樣品緩沖液 ?lmol L 乙酸
小規模快速制備果蠅RNA
試劑、試劑盒 Northern 樣品緩沖液 lmol L 乙酸 酚氯仿 DEPC 處理的水 GHCL 溶液 無水乙醇實驗步驟 一 材料與設備1)Northern 樣品緩沖液：2.2mol/L 甲醛，1mol/LMOPS，50% 甲酰胺2)lmol/L 乙酸3) 酚：氯仿（1:1)4)DEPC 處理的
單鏈RNA的基本信息
中文名稱單鏈RNA英文名稱single-stranded RNA;ssRNA定 義只含有一條鏈的RNA分子。生物體中絕大部分RNA是單鏈RNA，形成二級結構時，是既有單鏈、又有雙鏈結構域的RNA分子；只有某些RNA病毒是由兩條鏈互補而成的雙鏈RNA。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與
2.3.3－小規模快速制備果蠅RNA
鹽酸胍可在裂解細胞的同時快速抑制 RNA 酶的活性，本方法利用這特點來分離果蠅 RNA試劑、試劑盒Northern 樣品緩沖液lmol L 乙酸酚氯仿DEPC 處理的水GHCL 溶液無水乙醇實驗步驟一 材料與設備1)Northern 樣品緩沖液：2.2mol/L 甲醛，1mol/LMOPS，50%
果蠅RNA的大規模制備
試劑、試劑盒 5mol LLiCl 70% 乙醇 酚：氯仿（1:1) 20 mg ml 蛋白酶 K 95%(V V) 乙醇 .RNA 勻漿緩沖液 3mol L 乙酸鈉實驗步驟 一 材料與設備1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)Ethanol，l0 mmol/L Tris-H
果蠅RNA的大規模制備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 5mol LLiCl ?70% 乙醇 ?酚：氯仿（1:1) 20 mg ml 蛋白酶 K ?95%(V V) 乙醇 ?
單鏈RNA的基本信息介紹
一般來說生物學家是根據RNA能否直接起mRNA作用而分成正鏈ssRNA病毒與負鏈ssRNA病毒兩種。 (1)正鏈RNA病毒（如脊髓灰質炎病毒）的ssRNA可直接起mRNA作用，轉譯早期蛋白質，包括RNA多聚酶和抑制宿主細胞合成代謝的調控蛋白。然后在RNA多聚酶的作用下，以ssRNA（正鏈）為模板
2.3.2－果蠅RNA的大規模制備
本方法可從 100 只果蠅或約 2g 果蠅胚胎中制備 RNA。試劑、試劑盒5mol LLiCl70% 乙醇酚：氯仿（1:1)20 mg ml 蛋白酶 K95%(V V) 乙醇.RNA 勻漿緩沖液3mol L 乙酸鈉實驗步驟一 材料與設備1)5mol/L LiCl2)70% 乙醇：70% (V/V)E
RNAi實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程
RNAi 實驗中雙鏈短RNA（dsRNA）制備過程，本實驗方法來自于加州大學Jim教授實驗，很權威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1.?Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
用噬菌粒載體制備單鏈DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 噬菌粒巧妙地組合了質粒和絲狀噬菌體的特征。除了基本特征外，這些質粒通常是高拷貝數的，并帶有一個修飾后的絲狀噬菌體的主要基因間區。這個區域 ( 野生型為 508 bp)不表達蛋白，但含有全部的順式作用序列，該作用是病毒 DNA
用噬菌粒載體制備單鏈DNA
實驗方法原理 噬菌粒巧妙地組合了質粒和絲狀噬菌體的特征。除了基本特征外，這些質粒通常是高拷貝數的，并帶有一個修飾后的絲狀噬菌體的主要基因間區。這個區域 ( 野生型為 508 bp)不表達蛋白，但含有全部的順式作用序列，該作用是病毒 DNA 合成起始和結束及噬菌體顆粒的形態發生必不可少的。實驗材料
用噬菌粒載體制備單鏈DNA
噬菌粒巧妙地組合了質粒和絲狀噬菌體的特征。除了基本特征外，這些質粒通常是高拷貝數的，并帶有一個修飾后的絲狀噬菌體的主要基因間區。這個區域 ( 野生型為 508 bp)不表達蛋白，但含有全部的順式作用序列，該作用是病毒 DNA 合成起始和結束及噬菌體顆粒的形態發生必不可少的。本實驗來源「分子克隆實驗指
M13噬菌體單鏈DNA的制備
M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌
M13噬菌體單鏈DNA的制備
實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。實驗材料 M13 單鏈噬菌體載體感染 M13 噬菌體的大腸桿菌培養物未感染的大腸桿菌的培養
M13噬菌體單鏈DNA的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 M13 噬菌體單鏈 DNA 是從感染細胞分泌至周圍培養液中的病毒顆粒中制備的，首先在高鹽存在下，絲狀病毒被聚乙二醇（PEG) 沉淀濃縮，然后用酚抽提釋放單鏈 DNA，最后乙醇沉淀收集單鏈 DNA。
純化RNA實驗——從組織中純化總RNA
實驗材料組織試劑、試劑盒RNA 抽提緩沖液氯仿實驗步驟1. 從動物取下組織，直接進行第 2 步或在液氮中快速冷凍新鮮解剖的組織。冷凍后的組織可以貯存在 -70℃。2. 組織（0.05~0.3 g）在 2.0 ml RNA 抽提緩沖液中勻漿。3. 每管加 200 μl 氯仿，混合均勻，冰浴 15 分鐘
純化RNA實驗
從培養的細胞中純化總RNA 從組織中純化總RNA ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
研究揭示正單鏈RNA病毒編碼小蛋白新策略
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/10/510524.shtm
Science：重大進展！開發出單鏈DNA/RNA折紙術
DNA折紙術科學家們正在夢想著各種各樣的比人的頭發小一千倍的形狀，并希望這些形狀有朝一日引發計算、電子學和醫學變革。 如今，在一項新的研究中，來自美國亞利桑那州立大學和哈佛大學的研究人員在DNA納米技術上取得一項重大的新進展。他們開發出的一種被稱作單鏈折紙術（single-stranded o
制備DNA測序模板實驗——制備單鏈M13噬菌體DNA
本實驗包含了用于制備適用于雙脫氧測序的模板及適用于末端標記和化學測序的DNA的實驗方案。所有用于雙脫氧測序的雙鏈模板在與引物退火前必須變性，在一般應用上，堿變性在測序中的效果比熱變性好。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LBTEM13聚乙二醇容易讓頂層瓊脂乙酸鈉乙醇儀器、耗材巴斯德吸管試管離心機實驗步驟1
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 β-巰基乙醇 儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Ra