TEMSpecimenPreparation：PreparativeTechniquesfortheTEM
For routine transmission electron microscopy (TEM), it is generally accepted that specimens should be thin, dry and contain molecules which diffract electrons. Biological specimens, which are large and consist of large amounts of water, also do not defract electrons and are therefore difficult to see in the TEM. Preparing biological specimens for the TEM, whilst retaining the structural morphology of the material, is......閱讀全文
TEM－Specimen－Preparation：Preparative－Techniques－for－the－TEM
For routine transmission electron microscopy (TEM), it is generally accepted that specimens should be thin, dry and contain molecules which diffract e
顯微鏡技術——電子顯微技術
The Transmission Electron Microscope (TEM)?(HEI)An explanation of how the TEM works.??TEM Specimen Preparation?(HEI)??Serial Sectioning?(Walter Steffe
Aseptic－Techniques
Aseptic techniques ensure that all cell culture procedures are performed to a standard that will prevent contamination from bacteria, fungi, mycoplasm
Specimen－Preparation－for－Scanning－Electron－Microscopy
Specimen Preparation for Scanning Electron MicroscopyWe recommend consultation with one of the lab directors before preparing specimens. The methods p
Basic－Protein－Chemistry－Techniques
Coomassie Blue Stain:? (for gels)?1) Combine 225 ml Methanol with 225 ml ddH2O.?2) Add 0.5 grams of Coomassie Blue.?3) Just before use, add 50 ml acet
Basic－Protein－Chemistry－Techniques
實驗概要Basic Protein Chemistry Techniques實驗步驟Coomassie Blue Stain:? (for gels)?1) Combine 225 ml Methanol with 225 ml ddH2O.?2) Add 0.5 grams of Coomassi
Bleeding－and－intravenous－techniques－in－pigs
The ear veinsThe marginal ear veins are the only veins that are easily visible on pigs of any size. Usually there are three prominent veins. The later
Analysis－of－murine－BM:－specimen－choice,－sampling－and－processing.
Histologic analysis of murine BM is a necessary complement to flow cytometric or in vitro analysis.?Techniques to do this are well established in huma
Bleeding－and－intravenous－techniques－in－pigs2
Bleeding techniques for smaller pigsThis picture depicts the venous drainage in the neck of piglets.A: the cephalic vein. This drains into:B: the exte
Azalea－Phylogeny－Reconstructed－by－Means－of－Molecular－Techniques
Plants belonging to the Rhododendron subgenera Pentanthera (deciduous) and Tsutsusi and Azaleastrum (evergreen) are called azaleas. Concerning their m
助力半導體工業－日本電子推出高通量分析電鏡JEMACE200F
分析測試百科網訊?近日，日本電子總裁Gon-emon Kurihara對外宣布，日本電子將在2018年12月發布一款新型高通量分析電子顯微鏡—JEM-ACE200F，公司預設銷售數量為30臺/年。 產品開發背景 隨著半導體工業中元器件進一步小型化，透射電鏡已經成為元器件表征多種手段中必不可少
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介2
⒈材料與試劑 醋酸纖維素膜一般使用市售商品，常用的電泳緩沖液為pH8.6的巴比妥緩沖液，濃度在0.05-0.09mol/L。⒉操作要點⑴膜的預處理：必須于電泳前將膜片浸泡于緩沖液，浸透后，取出膜片并用濾紙吸去多余的緩沖液，不可吸得過干。⑵加樣：樣品用量依樣品濃度、本身性質、染色方法及檢測方法等因素決
蛋白質組技術（Proteomic－Techniques）
一、研究材料1995年，Wasinger等在第一篇蛋白質組研究文章中研究的對象為目前已知最小但能自主復制的原核微生物——支原體Mycoplasma genitalium。1996年，研究對象即擴展到單細胞真核生物——酵母以及人體正常組織及病理標本[28]，進而突破了早期人們普遍認為的“蛋白質組研
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介3
（三）等電聚焦電泳技術等電聚焦（isoelectric focusing，IEF）是60年代中期問世的一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。由于其分辨率可達0.01pH單位，因此特別適合于分離分子量相近而等電點不同的蛋白質組分。⒈IEF的基本原理 在IEF的電泳中，具有pH梯
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介5
三、瓊脂糖凝膠電泳法1.儀器裝置電泳室及直流電源同紙電泳。2.試劑(1)醋酸－鋰鹽緩沖液(pH3.0)取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氫氧化鋰調節pH至3.0，再加水至1000ml。(2)甲苯胺藍溶液取甲苯胺藍0.1g，加水100ml使溶解。3.操作法(1)制膠取瓊脂糖約0.2g，加水10
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介1
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。電泳技術的基本原理和分類在電場中，推動帶電質點運
電泳技術(electrophoretic－techniques)簡介4
各電泳法，除另有規定外，照下述方法操作。一、紙電泳法1.儀器裝置包括電泳室及直流電源兩部分。常用的水平式電泳室裝置如圖，包括兩個電泳槽A和一個可以密封的玻璃(或相應材料)蓋B；兩側的電泳槽均用有機玻璃（或相應材料）板C分成兩部分；外格裝有鉑電極(直徑0.5～0.8cm)D；里格為可放濾紙E的有機玻璃
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。（一）PCR產物的克隆策略獲得PCR
Techniques:培養、鑒定、和16s測序
微生物識別和診斷的分子技術 依賴培養的方法太慢，于是可以使用一些分子信號，如核苷酸、蛋白質、代謝化合物。 16s rRNA gene PCR在診斷微生物方面廣泛使用。PCR-based 方法更為敏感和定量化： 1.qPCR：對擴增進行定量。擴增時在特定的靶向探針上加上熒光染料，裂解后造成熒
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接 獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。 （一
TEM物鏡
物鏡（object lens）????????處于樣品室下面，緊貼樣品臺，是電鏡中的第1個成像元件，在物鏡上產生哪怕是極微小的誤差，都會經過多級高倍率放大而明顯地暴露出來，所以這是電鏡的一個最重要部件，決定了一臺電鏡的分辨本領，可看作是電鏡的心臟。????????（1）特點?物鏡是一塊強磁透鏡，焦距
TEM樣品
1. 樣品一般應為厚度小于100nm的固體。2. 感興趣的區域與其它區域有反差。3. 樣品在高真空中能保持穩定。4. 不含有水分或其它易揮發物，含有水分或其他易揮發物的試樣應先烘干除去。5. 對磁性試樣要預先去磁，以免觀察時電子束受到磁場的影響。TEM樣品常放置在直徑為3mm的200目樣品網上，在樣
TEM原理
原 理透射電鏡和光學顯微鏡的各透鏡及光路圖基本一致，都是光源經過聚光鏡會聚之后照到樣品，光束透過樣品后進入物鏡，由物鏡會聚成像，之后物鏡所成的一次放大像在光鏡中再由物鏡二次放大后進入觀察者的眼睛，而在電鏡中則是由中間鏡和投影鏡再進行兩次接力放大后最終在熒光屏上形成投影供觀察者觀察。電鏡物鏡成像光路圖
Microscopes－in－Cell－Biology
Microscopes in Cell BiologyIntroductionMicroscopy has a major role in the study of cells. From the very beginning, researchers have tried to develop w
蛋白質分析技術(Analytical－Techniques－for－Protein)2
二、透析和超濾1.透析（Dialysis）：就是利用蛋白質分子不能通過半透膜（Semipermeable membrane）而小分子可以自由透過的性質，使蛋白質與小分子物質分開。作用：脫鹽、無機離子和小分子物質等。透析膜：動物膜、羊皮紙、火棉膠、賽璐玢或其他材料等。2.超濾（ultrafiltrat
蛋白質分析技術(Analytical－Techniques－for－Protein)3
六、SDS-PAGE1.SDS及SDS-PAGE（1）SDS：十二烷基硫酸鈉（sodium decyl sulfate，SDS），一種陰離子去污劑，它能以一定的比例和蛋白質結合，形成一種SDS—protein的復合物。（2）SDS- PAGE：具有SDS的PAGE，分離SDS—protein復合物，
蛋白質分析技術(Analytical－Techniques－for－Protein)1
第一節 蛋白質分離純化與鑒定的基本原理一、蛋白質的理化性質（一）蛋白質的兩性電離 pI：當蛋白質溶液處于某一pH時，蛋白質解離成正、負離子的趨勢相等，即成為兼性離子，凈電荷為0，此時的溶液的pH稱為~。 體內大多數蛋白質：pI≈pH 5.0。在pH 7.4，大多數蛋白質解離成陰離子。少數蛋白
DAPI－Counterstaining－Protocols
實驗概要The ?blue-fluorescent DAPI nucleic acid stain preferentially stains dsDNA; ?it appears to associate with AT clusters in the minor groove. Binding
TEM照相室
照相室????????在觀察中電子束長時間轟擊生物醫學樣品標本，必會使樣品污染或損傷。所以對有診斷分析價值的區域，若想長久地觀察分析和反復使用電鏡成像結果，應該盡快把它保留下來，將因為電子束轟擊生物醫學樣品造成的污染或損傷降低到最小。此外，熒光屏上的粉質顆粒的解像力還不夠高，尚不能充分反映出電鏡成像
TEM－Visualization－of－Microtubules
LEVEL IIMaterialsCoated grid for TEM0.1 M ammonium acetate5% ethanol saturated uranyl acetateTransmission electron microscopeProcedureAt the conclusio