薄層層析的定性檢測
薄層層析的定性檢測:展開完畢后,把薄層從層析缸中取出,用鉛筆劃出或小針刺出展開劑前緣的位置,隨即進行顯色,以確定各個斑點的位置、Rf值和顯色情況,從而判斷試樣中含有哪些組分。有色物質經展開后呈現明顯的色斑,很易判斷。對于無色物質,可根據化合物的性質,用物理檢出法、化學檢出法、酶與生物檢出法和放射性檢出法進行顯色。 1)物理檢出法:紫外光、碘、水 2)化學檢出法:化學檢出法是在薄層上使用一種或數種化學試劑與被檢出物質反應,生成有顏色的化合物而定位。這種試劑叫顯色劑。顯色劑一般分為兩類,即通用顯色劑和專屬性顯色劑 (1)通用顯色劑:a.濃硫酸或50%的硫酸溶液:極大多數有機物質,噴此種顯色劑后立刻或在加熱到110—120℃并經數分鐘后出現棕色到黑色斑點。b.酸堿指示劑溶液:例如0.3%溴甲酚綠甲醇溶液,在綠色背景上顯現黃色斑,表示是脂肪族羧酸。......閱讀全文
薄層層析的定性檢測
薄層層析的定性檢測:展開完畢后,把薄層從層析缸中取出,用鉛筆劃出或小針刺出展開劑前緣的位置,隨即進行顯色,以確定各個斑點的位置、Rf值和顯色情況,從而判斷試樣中含有哪些組分。有色物質經展開后呈現明顯的色斑,很易判斷。對于無色物質,可根據化合物的性質,用物理檢出法、化學檢出法、酶與生物檢出法和放射性檢
薄層層析法是如何定性與定量的?
定性:樣品點與標準點的比移值進行比較若與標準點在同一位置,則存在所測物;定量:根據斑點顏色深淺進行半定量及面積大小,并對照標準濃度。
薄層層析的薄層層析的分析程序
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察,否
糖的硅膠G薄層層析實驗——薄層層析
實驗方法原理硅膠 G 是一種添加了粘合劑的硅膠粉,約含12 %-13 %的石膏,它可以把一些物質從溶液中吸附于自身的表面上,利用它對各種物質的吸附能力不同,再用適當的溶劑系統展層,使不同的物質得以分開,使用顯色劑顯色,得到不同的 Rf 值。糖在硅膠 G 薄層上的移動速度與糖的分子量和羥基數有關,經過
薄層層析
Reaction volume 100 ul5 ul NADPH (100 mM)x ul cell extract so you get 50 % conversion0.2 uM C14-Testosteroneadd Tris-Citrate Buffer pH 6 to an endvolu
薄層色譜的定性
定性分析薄層色譜的定性依據主要是根據待測組分的Rf值和純品的Rf值對照定性。將待測物質與一性質相近的標準物質在同一薄層上點樣,于同一條件下展開、顯色,根據測得的相對Rf值進行確證。如果它們的Rf值一樣,則表示待測組分就是這個純物質。為了考查其定性的準確性,常常將制成的板點樣后,在不同的展開劑中展開,
薄層層析和紙層析的異同
一、性質不同1、紙層析:用紙作為載體的一種色譜法。2、薄層層析:色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術。二、用途不同1、紙層析用途:常用于葉綠素色素、氨基酸的鑒定和測定、桔皮精油成分的測定和一些特定細胞的篩選實驗。2、薄層層析用途:適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用
薄層層析和紙層析的異同
一、性質不同1、紙層析:用紙作為載體的一種色譜法。2、薄層層析:色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術。二、用途不同1、紙層析用途:常用于葉綠素色素、氨基酸的鑒定和測定、桔皮精油成分的測定和一些特定細胞的篩選實驗。2、薄層層析用途:適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用
薄層層析的分析程序
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察,否
薄層層析的相關介紹
在玻璃片、金屬箔或塑料片上鋪上一層約1~2毫米的支持物,如纖維素、硅膠、離子交換劑、氧化鋁或聚酰胺等,根據需要做不同類型的層析。聚酰胺薄膜是一種特異的薄層,將尼龍溶解于濃甲酸中,涂在滌綸片基上,當甲酸揮發后,在滌綸片基上形成一層多孔的薄膜,其分辨力超過了用尼龍粉鋪成的薄層。薄層層析較紙層析優越在
關于薄層層析的簡介
英文為thin layer chromatography 又稱薄層色譜,色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種重要實驗技術,屬固—液吸附色譜,兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精
薄層層析的操作步驟
1.點樣: ⑴ 樣品的溶解:將樣品溶于展開劑極性相近、揮發性高的有機溶劑。 ⑵ 薄層點樣:用毛細管(0.5mm以下)或用專業點樣器進行點樣。 點樣的要求:樣點位置應在距離底邊1-1.5cm處;點樣量適當;樣點直徑小于2-3mm;間隔反復點樣;多個樣點時,間隔為2cm且處于同一條直線上。
薄層層析的定量測定
薄層層析的定量測定:? ? 1)直接測定法:色譜分離后,直接用肉眼觀察比較或用儀器掃描斑點而測定其含量。? ? a.目測法樣品經色譜分離后,直接觀察所得斑點的大小和顏色的深淺,并與標準品在相同條件下展開所得到的一系列已知不同濃度的標準斑點相比較,而近似地判斷樣品中所測成分的含量。? ? b.測面積法
薄層層析分離中的薄層板制作
???薄層層析分離中的薄層板制作是指將經離心機處理后的固定相支持劑均勻地涂布在玻璃板上形成薄層。玻璃板要求表面平滑、清潔,大小按需要選定。一、干板制作:??????? 干板是將不加粘合劑的支持劑干粉均勻地涂布在玻璃板上制成的薄層板。干板制作簡單,展開快,但極易吹散。制作方法如下:? 1、選直徑約為5
薄層層析分離中的薄層板制作
薄層層析分離中的薄層板制作是指將經離心機處理后的固定相支持劑均勻地涂布在玻璃板上形成薄層。玻璃板要求表面平滑、清潔,大小按需要選定。一、干板制作:干板是將不加粘合劑的支持劑干粉均勻地涂布在玻璃板上制成的薄層板。干板制作簡單,展開快,但極易吹散。制作方法如下:1、選直徑約為50mm的玻璃管一根,根據薄
薄層層析操作要點
鋪板鋪板用的勻漿不宜過稠或過稀:過稠,板容易出現拖動或停頓造成的層紋;過稀,水蒸發后,板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G:水=1:2~3,硅膠G:羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間,根據經驗來定,與空氣濕度有關,一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷,越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑
薄層層析法原理
層析須在兩相系統間進行。一相是固定相,需支持物,是固體或液體。另一相為流動相,是液體或氣體。當流動相流經固定相時,被分離物質在兩相間的分配,由平衡狀態到失去平衡到又恢復平衡,即不斷經歷吸附和解吸的過程。隨著流動相不斷向前流動,被分離物質間出現向前移動的速率差異,由開始的單一區帶逐漸分離出許多區帶,這
薄層層析法原理
層析須在兩相系統間進行。一相是固定相,需支持物,是固體或液體。另一相為流動相,是液體或氣體。當流動相流經固定相時,被分離物質在兩相間的分配,由平衡狀態到失去平衡到又恢復平衡,即不斷經歷吸附和解吸的過程。隨著流動相不斷向前流動,被分離物質間出現向前移動的速率差異,由開始的單一區帶逐漸分離出許多區帶
薄層層析法原理
薄層層析又叫薄層色譜,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大,因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發性較小或較高溫度
薄層層析定量方法
可分為洗脫測定法、薄層層析法和原位掃描法:洗脫測定法①洗脫測定法,將展開后的組分斑點處的吸附劑刮下,用適宜溶劑將組分洗脫溶出,然后用適當方法進行定量測定。常用方法為比色法、紫外-可見分光光度法,也可用電化學分析法等。原位掃描法②原位掃描法,將展開后的薄層板放在光密度計內,以一定波長的光照射,同時使斑
化學顯色法和薄層層析檢測法檢測可卡因的介紹
化學顯色法,薄層層析檢測法(TLC)操作簡單、方便,但樣品用量大,檢測靈敏度和精密度均不高。儀器分析方法具有極高的靈敏度和精密度,但需要昂貴的儀器、設備和經過專門培訓的技術人員,不能實現現場即時檢測。
薄層色譜用于-定性鑒別
薄層色譜應用:定性鑒別化學上經典的定性鑒別,例如經典的有機定性分析或經典的毒物分析,是利用各種化合物的溶解度不同和所含功能基的不同,用溶劑提取或用試劑處理,把它們分組或分為單一組分,然后作試管反應或點滴反應(顏色反應),或根據它們衍生物的理化性質進行定性鑒別。這種方法的缺點是樣品用量較大,分離手續麻
氨基酸的薄層層析
原理 介紹層析的概念 所謂層析,就是利用樣品中各組成成分的理化性質的差異,使各組分以不同程度分布在固定相和流動相兩相中,由于各組分隨流動相前進的速率不同,從而把它們分離開來的技術。這些物理特性包括分子的大小、形狀、所帶電荷、揮發性、溶解性及吸附性質等。層析系統的必要組分有:
薄層層析的應用和發展
廣泛應用于石油、化工、醫藥、生化等方面。樣品用量一般為幾至幾百微克,是一種較實用、有效的微量分離分析方法。此法也可用于分離制備較大量的樣品,即使用較大較厚的薄層板,將樣品溶液在起始點處點成條帶狀,這樣可以分離毫克量樣品。
薄層層析的原理是什么
1.薄層層析法也叫薄層色譜法,是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法。2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力
糖的聚酰胺薄層層析
一、實驗目的1.熟悉掌握薄層層析的實驗操作。2.了解聚酰胺薄層層析法測定糖的原理和方法。二、實驗原理用于層析的聚酰胺有兩類,一類是錦綸66(尼龍),另一類是錦綸6。在這兩類材質中,都含有大量酰胺基團,故統稱聚酰胺。聚酰胺以其-CO-或-NH-與極性化合物的-OH 或=O 之間形成氫鍵,從而發
概述薄層層析的分析程序
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察
薄層層析的分析程序介紹
將樣品溶液用毛細管點在薄層板的一端,置密閉槽中,加入適宜溶劑為流動相。由于毛細管原理,溶劑被吸上,沿板移動,并帶動樣品中各組分向前移動,這個過程稱為展開。由于各組分性質不同,移動距離不同,展開一定距離后,即得互相分離的組分斑點。可用適當方法使各組分在板上顯示其位置,如組分本身有顏色,即可直接觀察,否
薄層層析的原理是什么
1.薄層層析法也叫薄層色譜法,是以涂布于支持板上的支持物作為固定相,以合適的溶劑為流動相,對混合樣品進行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術,這是一種快速分離諸如脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質的特別有效的層析方法。2.基本原理:吸附薄層色譜分離法,它利用各成分對同一吸附劑吸附能力
薄層層析分離原理
薄層層析分離是把支持劑均勻涂布于支持板(常用玻璃板和滌綸布等)上形成薄層,待分離樣品點在支持板上,然后用相應的溶劑進行展開,使樣品中各組分得到分離的過程。薄層層析分離根據固定相支持劑的不同,分薄層吸附層析分離、薄層分配層析分離、薄層離子交換層析分離和薄層凝膠層析分離等。一般實驗中應用較多的是薄層吸附