靶蛋白的放射標記實驗
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標記哺乳動物細胞 酵母和細菌蛋白質的代謝放射標記 實驗材料 細胞 儀器、耗材 培養基 實驗步驟 1. 制備活躍生長著的細胞。從單層培養細胞(約鋪滿 75% 表面積)中吸去培養基。用預熱至 37℃ 的無血清培養基沖洗兩次(培養基中應該不含蛋氨酸和半胱氨酸)。對于懸浮培養細胞,通過 400 g 離心 5 分鐘收集細胞。用頂熱至 37℃ 的無蛋氨酸培養基重懸沉淀......閱讀全文
靶蛋白的放射標記實驗
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標記哺乳動物細胞酵母和細菌蛋白質的代謝放射標記實驗材料細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?儀器、耗材培養基 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
靶蛋白的放射標記實驗
實驗材料 細胞儀器、耗材 培養基實驗步驟 1. 制備活躍生長著的細胞。從單層培養細胞(約鋪滿 75% 表面積)中吸去培養基。用預熱至 37℃ 的無血清培養基沖洗兩次(培養基中應該不含蛋氨酸和半胱氨酸)。對于懸浮培養細胞,通過 400 g 離心 5 分鐘收集細胞。用頂熱至 37℃ 的無蛋氨
靶蛋白的放射標記實驗
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標記哺乳動物細胞 酵母和細菌蛋白質的代謝放射標記 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
靶蛋白的放射標記實驗2
用[35S]蛋氨酸和[35S]半胱氨酸標記哺乳動物細胞實驗材料細胞儀器、耗材培養基實驗步驟1. 制備活躍生長著的細胞。從單層培養細胞(約鋪滿 75% 表面積)中吸去培養基。用預熱至 37℃ 的無血清培養基沖洗兩次(培養基中應該不含蛋氨酸和半胱氨酸)。對于懸浮培養細胞,通過 400 g 離心 5 分鐘
靶蛋白的放射標記實驗—酵母和細菌蛋白質代謝放射標記
實驗材料 細胞 儀器、耗材 基本培養基 實驗步驟 1. 接種細胞于只含有必需氨基酸和輔因子的已知成分的基本培養基,于合適溫度中度振蕩培養過夜。 2. 用新鮮的基本培養基稀釋培養物,繼續溫育至 107?細胞/ml (酵母)或對數期中期(細菌)。 3. 5000
放射性碘標記
在RIA中,標記抗原質量的優劣,直接影響測定結果,必須制備比放射性強、純度高的標記抗原,并保持免疫活性不受喪失。 一、同位素的選擇 同位素有穩定性和放射性兩種。放射性同位素可利用其衰變時放出的放射線進行測量,這種測量較靈敏而方便,故多用放射性同位素。標記抗原,常用的放射性同位素有3H、14C、1
RNA 放射性標記
實驗材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP 牛小腸磷酸酶T4RNA 連接酶 [32P]pCpATP2Oumol L 無 tRNA 酶的牛血清白蛋白試劑、試劑盒 10XT4 多核苷酸激酶緩沖液 DEPC 處理的
放射免疫標記技術
一、放射免疫標記技術放射免疫標記技術是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性相結合,以放射性同位素作為示蹤物的標記免疫測定方法,由于此項技術具有靈敏度高 (可檢測出毫微克(ng)至微微克(pg),甚至毫微微克(fg)的超微量物質,特異性強(可分辨結構類似的抗原)、重復性強、樣品及試劑用量少
RNA 放射性標記
? ? ? ? ? ? 實驗材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml 10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶 (γ32P)ATP
放射性標記化合物的標記方法
放射性標記化合物的常用標記方法有化學合成法、同位素交換法和 生物化學法。通常是根據所需標記化合物的組成、結構及應用要求來選擇合適的放射性核素,然后再根據可提供的含有所需放射性核素的原料,結合應用要求來設計其標記路線。原料的物理化學性質不同,所采用的標記路線也不同(見放射性標記方法)。常用于標記的放射