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  • 常見RNA探針的技術特點

    cRNA探針:是以cDNA為模板,通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針,因此也避免了應用雙鏈cDNA探針做雜交反應時存在的兩條之間的復性問題。cRNA與RNA之間形成的雜交體要比cDNA-RNA雜交體穩定。cRNA-RNA之間形成的雜交體不受RNA酶的影響。因此雜交反應后可用RNA酶處理,以除去未結合的探針。由于cRNA探針具有以上這些優點,cRNA探針的雜交飽和水平又比雙鏈DNA探針高出8倍,因此在原位雜交中應用廣泛。cRNA探針的缺點是:探針的制備過程比較復雜,需要較好的分子生物學實驗設備,它對RNA酶敏感,易受破壞,操作中要謹防RNA酶污染。 單鏈cDNA探針:由于cDNA中不存在內含子及其它高度重復序列,又克服了雙鏈cDNA探針在雜交反應中兩條鏈之間復性的缺點,從而提高了雜交反應的敏感性。但由于單鏈cDNA探針的制備比較困難,在RNA原位雜交中已很少見有應用。 寡核苷酸探針:人工合成的寡核苷探針......閱讀全文

    常見RNA探針的技術特點

    cRNA探針:是以cDNA為模板,通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針,因此也避免了應用雙鏈cDNA探針做雜交反應時存在的兩條之間的復性問題。cRNA與RNA之間形成的雜交體要比cDNA-RNA雜交體穩定。cRNA-RNA之間形成的雜交體不受RNA酶的影響。因此雜交反應后可用RNA酶處理,以除

    常見RNA探針及其特點

    常見RNA探針及其特點:RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。?cRNA探針:是以cDNA為模板,通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針

    RNA探針技術簡介

    許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優點,

    分子雜交RNA探針的技術特點及應用介紹

    在DNA序列未知而必須首先進行克隆以便繪制酶譜和測序時,也常應用克隆。克隆探針一般較寡核苷酸探針特異性強,復雜度也高,從統計學角度而言,較長的序列隨機碰撞互補序列的機會較短序列少,克隆探針的另一優點是,可獲得較強的雜交信號,因為克隆探針較寡核苷酸探針摻入的可檢測標記基因更多。但是,較長的探針對于靶序

    分子雜交RNA探針的技術特點及應用介紹

    RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩

    RNA探針技術的應用介紹

    這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclear run on transcrip-tion

    分子雜交技術RNA探針的相關介紹

      許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優

    RNA探針的概念

    RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。

    RNA探針的簡介

      許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP,則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優

    RNA干擾技術的特點

    1.高效性:Elbashir等在研究中發現分別為25 nmol/L與100 nmol/L的起始雙鏈RNA產生的結果是一樣的,只是高濃度起始的更有效些。將雙鏈RNA濃度降低到1.5 nmol/L時產生的基因沉默效果變化不大,只有當濃度降低到0.05 nmol/L時,沉默的效果才消失。Holen等也證實

    RNA轉錄的技術特點

    轉錄時,細胞通過堿基互補的原則來生成一條帶有互補堿基的mRNA,通過它攜帶密碼子到核糖體中可以實現蛋白質的合成。與DNA的復制相比,轉錄有很多相同或相似之處,亦有其自己的特點。轉錄中,一個基因會被讀取并復制為mRNA。就是說,以特定的DNA片段作為模板,以DNA依賴的RNA聚合酶作為催化劑,合成前體

    RNA探針的應用介紹

    這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,在篩選逆轉錄病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)的基因組DNA克隆時,因無DNA探針可利用,就利用HIV的全套標記mRNA作為探針,成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進行中的轉錄分析(nuclear run on transcrip-tion

    HBV-RNA檢測技術盤點——RTqPCR-VS-RNA捕獲探針法

    慢性乙型肝炎影響著世界上超過2.4億人口[1],難以治愈已成為公認的事實。大多研究認為難以治愈與肝細胞核內HBV共價閉合環狀DNA(cccDNA)半衰期過長且難以清除有關。[2]因此,肝內檢測cccDNA對評估抗病毒治療療效和治療終點具有重要意義。但直接檢測cccDNA十分困難,通常需要進行肝組織活

    掃描探針顯微鏡的技術特點

    SPM作為新型的顯微工具與以往的各種顯微鏡和分析儀器相比有著其明顯的優勢:首先,SPM具有極高的分辨率。它可以輕易的“看到”原子,這是一般顯微鏡甚至電子顯微鏡所難以達到的。其次,SPM得到的是實時的、真實的樣品表面的高分辨率圖像。而不同于某些分析儀器是通過間接的或計算的方法來推算樣品的表面結構。也就

    俘獲性探針的技術特點和應用

    中文名稱俘獲性探針英文名稱capture probe定  義為捕獲目的分子而使用的探針。此類探針常是固相化的。如用結合在磁性顆粒(磁珠)表面的寡核苷酸為探針,從核酸文庫中篩選出特定的核酸克隆;為尋求能與某蛋白質特異結合的多肽序列,以吸附在反應板上的該蛋白質為探針,從重組噬菌體呈現文庫中捕獲特定的噬菌

    掃描探針顯微鏡的技術特點

    SPM作為新型的顯微工具與以往的各種顯微鏡和分析儀器相比有著其明顯的優勢:首先,SPM具有極高的分辨率。它可以輕易的“看到”原子,這是一般顯微鏡甚至電子顯微鏡所難以達到的。其次,SPM得到的是實時的、真實的樣品表面的高分辨率圖像。而不同于某些分析儀器是通過間接的或計算的方法來推算樣品的表面結構。也就

    基因探針的技術分類及應用特點

    探針是能與特異靶分子反應并帶有供反應后檢測的合適標記物的分子。利用核苷酸堿基順序互補的原理,用特異的基因探針即識別特異堿基序列的有標記的一段單鏈DNA(或RNA)分子,與被測定的靶序列互補,以檢測被測靶序列的技術叫核酸探針技術。探針制備就是將目的基因進行標記。特異性探針有三種形式——cDNA、RNA

    雜交探針的技術特點和應用介紹

    雜交探針是核酸分子上帶有可能被檢測的信號分子,如同位素或熒光標記的核酸分子。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈,隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、螢光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團中,而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。分為cDNA探

    RNA探針的概念和分類

    RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。

    RNA探針的相關內容

      RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,

    RNA探針的基本信息介紹

      RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,

    研究發展RNA“緩沖熒光探針”

    原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/519783.shtm

    研究發展RNA“緩沖熒光探針”

    近日,中國科學院大連化學物理研究所副研究員喬慶龍和徐兆超研究員團隊發展了能夠與RNA特異性可逆結合,在活細胞內對細胞核核仁穩定成像的“緩沖熒光探針”Nu-AN,實現了對核仁動態輪廓的成像,并通過活細胞內藥物誘導下核仁特定形態的可視化,為核仁應激試劑的篩選提供可視化的工具。相關成果發表在《先進科學》。

    分子雜交CDNA探針的技術特點及應用介紹

    cDNA(complementary DNA)是指互補于mRNA的DNA分子。cDNA是由RNA經一種稱為逆轉錄酶(reversetranscriptase)的DNA聚合酶催化產生的,這種逆錄酶是Temin等在70年代初研究致癌RNA病毒時發現的。該酶以RNA為模板,根據堿基配對原則,按照RNA的核

    常見的RNA病毒介紹

    常見的RNA病毒有:艾滋病病毒(為逆轉錄病毒),丙型肝炎病毒,乙型腦炎病毒,全部流感病毒,鼻病毒,脊髓灰質炎病毒,柯薩奇病毒,登革熱病毒,輪狀病毒,煙草花葉病毒,SARS 病毒,MERS病毒,埃博拉病毒(Ebola virus),馬爾堡病毒,一小部分噬菌體(大部分噬菌體都是DNA病毒)、新型冠狀病毒

    常見RNA堿基介紹

    四個常見RNA堿基---腺嘌呤,尿嘧啶,鳥嘌呤和胞嘧啶顯然不能提供足夠的空間以形成一個堅固的結構,因為這些堿基大部分被修飾過以延長它們的結構。有兩個奇特的例子,看37號反密碼子相鄰的堿基,位于甲硫氨酸tRNA(1yfg)或苯丙氨酸tRNA(4tna和6tna)的起始部位。

    RNA探針的基本介紹和重要意義

      RNA探針是一類很有前途的核酸探針,由于RNA是單鏈分子,所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針,這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的,標記效率往往不高,且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的,而不是用于檢測。例如,

    關于RNA探針的基本原理介紹

      體外轉錄技術不斷完善,已相繼建立了單向和雙向體外轉錄系統。該系統主要基于一類新型載體pSP和pGEM,這類載體在多克隆位點兩側分別帶有SP6啟動子和T7啟動子,在SP6RNA聚合酶或T7RNA聚合酶作用下可以進行RNA轉錄,如果在多克隆位點接頭中插入了外源DNA片段,則可以此DNA兩條鏈中的一條

    RNA探針實時監測神經網絡活動

      過去十年,神經生物學家的注意力一直集中在神經網絡功能研究,而非單個神經細胞。但是大腦的關鍵功能(信息處理、儲存和傳輸)都需要在單細胞水平執行。   很長一段時間,神經網絡研究工作者面臨一些方法上的困難,旨在研究單個神經元電活動和代謝活動的傳統方法無法提供神經網絡結構或功能信息。常用的方法

    體外轉錄合成單鏈RNA探針

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 制備特異性的單鏈 RNA 探針不僅比 DNA 探針更容易,在雜交反應中一般也比具相同比活性的 DNA 探針產生更強的信號,這可能是由于含有 RNA 的雜合鏈固有的更高穩定性的緣故(Casey and Davidson 197

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