wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白轉移，所用緩沖液少。電泳現象在確定的條件下，帶電粒子在單位電場強度作用下，單位時間內移動的距離（即遷移率）為常數，是該帶電粒子的物化特征性常數。不同帶電粒子因所帶電荷不同，或雖所帶電荷相同但荷質比不同，在同一電場中電泳，經一定時間后，由于移動距離不同而相互分離。分開的距離與外加電場的電壓與電泳時間成正比。......閱讀全文
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜條件公式
wb轉膜條件公式：10% SDS溶液(m/v)。將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如NC膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白
wb轉膜到半個小時改變電壓會影響嗎
轉膜的時候電壓40v，可以看到電流先下降后上升。我轉膜的時候就這樣的，轉膜效果挺好的。轉膜液隨著使用次數增多，電阻增大，相應電流下，電壓增大，建議每次轉膜液使用2～3次就換新的，這個是正常的，恒壓的時候，電流也是會變化的，這是關于電泳液的問題，用的時間久了就會出現這樣的問題，可以經常換電泳液
WB轉膜時間與分子量及膠厚度的關系
分子量越大轉膜時間越長，60KD轉膜可以用300毫安恒流100min，20KD的話一個小時足夠了，膠越厚越不容易轉完全，不建議用1.5的膠。
電泳、轉膜
轉膜是把DNA從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物（一般是尼龍膜）上固定，是進行各種后續研究（如RFLP分析，陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究）的前提。實驗目的：掌握Southern blotting的原理及操作步驟。實驗原理：1. 轉膜的方式： 向上的毛細管轉移 向下的毛細管轉移 同時向
wb膜甲醇活化時間
不超過15秒。根據該物質簡介可知，該物質的活化時間不超過15秒。pvdf膜在使用是需預處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結合。pvdf膜具有較高的機械強度。
wb膜甲醇活化時間
不超過15秒。根據該物質簡介可知，該物質的活化時間不超過15秒。pvdf膜在使用是需預處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團，使其更容易與帶負電的蛋白結合。pvdf膜具有較高的機械強度。
Western轉膜步驟
下面的步驟適用于通過Xcell Ⅱ轉印系統進行蛋白印記的大部分應用。為達到最佳效果，用戶的優化是必要的。I. 所需材料：?Xcell SureLock?或Xcell Ⅱ? Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）?電泳后的迷你膠
電泳、轉膜概述
轉膜是把DNA 從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物（一般是尼龍膜）上固定，是進行各種后續研究（如 RFLP 分析，陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究）的前提。實驗目的：掌握 Southern blotting 的原理及操作步驟實驗原理：1．轉膜的方式：向上的毛細管轉移向下的毛細管轉移同時向兩張膜
Southern轉膜方法
Southern轉膜方法（毛細管虹吸印跡法、電轉移法與真空轉移法）將凝膠中的DNA進行堿變性并將pH值恢復至中性后，即可將凝膠中的DNA片段轉移到固相支持物上。用于轉膜的固相支持物有多種，包括硝酸纖維素濾膜(NCM)、尼龍膜、化學活性膜和濾紙等，Southern轉膜時可根據需要選擇不同的固相支持物用
小分子轉膜時間
小分子的話就不要過夜轉,采取100V一小時應該就可以了,注意降溫。知識補充蛋白的分子量 是理論的分子量 其實還可能有一些修飾的 比如乙酰化 糖基化等那么要考慮分子量的問題 其次 你買的抗體怎么樣？特異性 效價 親和力等 是否適合做WB？ 再次 你可以用預染的蛋白marker試一試 確定你的目的蛋白沒
western轉膜放置問題
1. 定義轉膜時與膠接觸的一面為“正”2. 封閉時使用封閉液，液體蓋過膜就好，所以無所謂正反3. 假如用暗室顯影法，將顯影的試劑與“正”面接觸，膠片與“正面”接觸4. 假如用熒光的話，理論上“正”面朝下，掃描，但實際操作過程中貌似都可以的
轉膜后怎么分清楚膜的正反
轉膜后分清楚膜的正反的方法：定義轉膜時與膠接觸的一面為“正”。封閉時使用封閉液，液體蓋過膜就好，所以無所謂正反，假如用暗室顯影法，將顯影的試劑與“正”面接觸，膠片與“正面”接觸，假如用熒光的話，理論上“正”面朝下，掃描，但實際操作過程中貌似都可以的。濕電轉膜儀：濕電轉膜儀是用來轉印蛋白的儀器。轉移蛋
轉膜后怎么分清楚膜的正反
轉膜后分清楚膜的正反的方法：定義轉膜時與膠接觸的一面為“正”。封閉時使用封閉液，液體蓋過膜就好，所以無所謂正反，假如用暗室顯影法，將顯影的試劑與“正”面接觸，膠片與“正面”接觸，假如用熒光的話，理論上“正”面朝下，掃描，但實際操作過程中貌似都可以的。濕電轉膜儀：濕電轉膜儀是用來轉印蛋白的儀器。轉移蛋
轉膜后怎么分清楚膜的正反
轉膜后分清楚膜的正反的方法：定義轉膜時與膠接觸的一面為“正”。封閉時使用封閉液，液體蓋過膜就好，所以無所謂正反，假如用暗室顯影法，將顯影的試劑與“正”面接觸，膠片與“正面”接觸，假如用熒光的話，理論上“正”面朝下，掃描，但實際操作過程中貌似都可以的。濕電轉膜儀：濕電轉膜儀是用來轉印蛋白的儀器。轉移蛋
WB－PVDF膜為什么要用甲醇泡
SDS-PAGE蛋白跑膠過的蛋白質帶負電荷，用甲醇處理PVDF膜的目的是活化膜上的正電基團，這樣其就更容易與帶負電荷的蛋白質結合
半干轉是否要去膜？
半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小，因為膠大小不一定規則，膜和濾紙會大一點，那樣會不會短路？可以相等，但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了，上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸，這樣會短路，電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行，正常的半干轉是慢慢變高的，最后結束時一般是開始的1.
Dry－Transfer－干法蛋白轉膜
Trans-Bot SD Assembly1. Prepare the transfer buffer.2. Following electrophoresis, equilibrate the gels in transfer buffer.? Equilibration facilitates
western－blot轉膜的原理
電場力作用條件下，帶電粒子（PAGE膠中的蛋白）會發生定向遷移；蛋白大小如果超過膜孔徑（0.22μm or 0.45μm），不會透過膜；WB用的膜具有蛋白吸附作用；
western轉膜時間和電流
300mA90分鐘,我們是1.0的膠厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚膠要時間長一些,另外你做的蛋白如果超過100kd建議時間更長一些,若是小蛋白就減少轉模時間,立春紅確定最適時間
轉膜時甲醇的作用
轉膜 將電泳后分離的蛋白質從凝膠中轉移到固相載體（例如 NC 膜）上，通常有兩種方法：毛細管印跡法和電泳印跡法毛細管印跡法和電泳印跡法。常用的電泳轉移方法有濕轉和半干轉。兩者的原理完全相同，只是用于固定膠/膜疊層和施加電場的機械裝置不同。前者操作容易，轉移效率高；而后者適用于大膠的蛋白轉移，所
Western－轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好
關鍵看效果怎么細分，干轉，速度快，效率稍低，濕轉，速度比較慢，轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主，干轉就挺好的，效率非常高，幾分鐘就做完了。分子量特別大，又沒有其他人的方案做參考，可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話，真是等到花兒也謝了。至于說效果，不是
做western轉膜，用濕轉電泳，還是半干轉電泳好
半干轉要用專門的半干轉膜儀，而濕轉用電泳儀配附件即可；半干轉所需時間較短，但控制不好，中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞；而濕轉耗時較長，尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講，還是濕法轉膜的實驗室多一些。
Western－轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好？
關鍵看效果怎么細分，干轉，速度快，效率稍低，濕轉，速度比較慢，轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主，干轉就挺好的，效率非常高，幾分鐘就做完了。分子量特別大，又沒有其他人的方案做參考，可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話，真是等到花兒也謝了。至于說效果，不是
western－blot－試驗中蛋白轉膜總轉不上去
當然，首先要考慮的問題是你轉過頭了，蛋白質跑出去了。其次你的電流有點大，你也沒說轉了多久？用的干轉還是濕轉？是不是拿出來的時候很熱？這種情況有可能使蛋白質降解。我們一般是濕轉用100mA轉2小時， 干轉所需電流更小。
雜交膜轉印膜*纖維素膜NC膜與PVDF膜的區別
1.?*纖維素膜*纖維素膜是蛋白印跡廣泛使用的轉移介質，對蛋白有很強的結合能力，而且適用于各種顯色方法，包括同位素，化學發光(Luminol類)、常規顯色、染色和熒光顯色；背景低，信噪比高。NC膜的使用也很簡便，比如不需要甲醛預處理，只要在無離子水面浸潤排出膜內氣泡，再在電泳緩沖液中平衡幾分鐘就可以
半干轉膜儀如何使用
以WEALTEC的YRDIMES半干轉膜儀為例，首先確認是轉蛋白質還是核酸。蛋白質可參考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn緩沖液系統配置緩沖液，電泳后將凝膠浸入緩沖液平衡5分鐘，將轉印膜和濾紙裁切并浸入緩沖液，合上上蓋，按說明書墊上BP-C紙，普通轉印1或