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  • 做western轉膜,用濕轉電泳,還是半干轉電泳好

    半干轉要用專門的半干轉膜儀,而濕轉用電泳儀配附件即可;半干轉所需時間較短,但控制不好,中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞;而濕轉耗時較長,尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講,還是濕法轉膜的實驗室多一些。......閱讀全文

    做western轉膜,用濕轉電泳,還是半干轉電泳好

    半干轉要用專門的半干轉膜儀,而濕轉用電泳儀配附件即可;半干轉所需時間較短,但控制不好,中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞;而濕轉耗時較長,尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講,還是濕法轉膜的實驗室多一些。

    電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽

    電泳儀,半干轉(半干轉印電泳槽)一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳Mini P-4小型垂直電泳槽?

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    半干電轉印法

    實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜,然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間,采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜,但使用100次后必須更換)制成的,也可以是鉑金的(這種子板價格較貴,但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至

    半干轉是否要去膜?

    半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小,因為膠大小不一定規則,膜和濾紙會大一點,那樣會不會短路?可以相等,但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了,上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸,這樣會短路,電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行,正常的半干轉是慢慢變高的,最后結束時一般是開始的1.

    半干電轉印法

    先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜,然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間,采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上(Kyhse-Andersen1984)。平板可以是石墨(這種平板較便宜,但使用100次后必須更換)制成的,也可以是鉑金的(這種子板價格較貴,但使用壽命較長)。通過電洗

    半干轉膜儀如何使用

    以WEALTEC的YRDIMES半干轉膜儀為例,首先確認是轉蛋白質還是核酸。蛋白質可參考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn緩沖液系統配置緩沖液,電泳后將凝膠浸入緩沖液平衡5分鐘,將轉印膜和濾紙裁切并浸入緩沖液,合上上蓋,按說明書墊上BP-C紙,普通轉印1或

    半干轉印系統操作使用說明

    一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上,其運用了電泳檢測的方法,使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上,由于硝酸纖維素膜的可支撐性,使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做

    western-blot-半干轉時濾紙上出現藍色

    western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了western blot 半干轉一般是電壓10V轉膜30分鐘就可以了,時間長了就轉到濾紙上去了所以western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了

    半干轉印與濕式轉印的區別-|-WEALTEC-威泰克

    剛接觸 Western Blot 不久的用戶,在選購 WB 設備時,經常會遇到儀器選型的問題:為什么常見的蛋白質電泳的轉膜有兩種方式可以選擇,干式和濕式,那么哪種方法更適合我們呢?這里我們結合美國 WEALTEC 公司的 E-Blotter 濕轉槽和 YRDIMES 快速半干轉印槽舉例說明。

    電泳、轉膜

    轉膜是把DNA從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進行各種后續研究(如RFLP分析,陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實驗目的:掌握Southern blotting的原理及操作步驟。實驗原理:1. 轉膜的方式:  向上的毛細管轉移  向下的毛細管轉移  同時向

    濕轉和干轉,哪個方法更好

      對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。   對于轉印來說,使用濕轉的方法是比較好的,因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中,在半干轉的條件下,轉印是在兩個電極板之間發

    濕轉和干轉,哪個方法更好?

    對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。對于轉印來說,使用濕轉的方法是比較好的,因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中,在半干轉的條件下,轉印是在兩個電極板之間發生,這種類型

    電泳、轉膜概述

    轉膜是把DNA 從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進行各種后續研究(如 RFLP 分析,陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實驗目的:掌握 Southern blotting 的原理及操作步驟實驗原理:1.轉膜的方式:向上的毛細管轉移向下的毛細管轉移同時向兩張膜

    免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質

    實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品,并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層,除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層:Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽

    Western-轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好

    關鍵看效果怎么細分,干轉,速度快,效率稍低,濕轉,速度比較慢,轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主,干轉就挺好的,效率非常高,幾分鐘就做完了。分子量特別大,又沒有其他人的方案做參考,可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話,真是等到花兒也謝了。至于說效果,不是

    Western-轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好?

    關鍵看效果怎么細分,干轉,速度快,效率稍低,濕轉,速度比較慢,轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主,干轉就挺好的,效率非常高,幾分鐘就做完了。分子量特別大,又沒有其他人的方案做參考,可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話,真是等到花兒也謝了。至于說效果,不是

    電泳及轉膜技術

    實驗概要掌握 Southern blotting 的原理及操作步驟實驗原理?1.轉膜的方式:????? 向上的毛細管轉移????? 向下的毛細管轉移????? 同時向兩張膜轉移????? 電轉移????? 真空轉移?2.固相支持物的種類及選擇:???? 硝酸纖維素膜:非共價結合,易脆,易丟失 DNA

    RNA的電泳,轉膜和雜交

    實驗原理:基本同 Southern Blotting,但因RNA 是單鏈分子,必須消除局部區域形成的二級結構,在電場中泳動的距離才能反映它本身的大小,因而需使用變性膠進行電泳;另應特別注意防止RNA 的降解。實驗材料:經檢測質量好的 RNA實驗步驟:1.制膠:Agarose 1%-1.2% , 1×

    轉膜后為什么要電泳

    、轉膜后的mark非常歪的原因是膠、膜以及濾紙(三明治組合)之間氣泡沒趕干凈導致的。2、而條帶特別不清晰就得看你的轉膜時間了:轉膜時間不夠會導致膠上的蛋白包括mark沒有完全轉到膜上,轉膜時間長了會導致膠上的蛋白包括mark已經穿過膜到濾紙上了。建議電泳后膠進行考馬斯亮藍染色、轉膜后的膜進行麗春紅染

    飼料風干樣本與半干樣品制作方法

    應將兩樣品全部制成風干品,再取樣粉碎,篩上網物應返回到樣品中。原因是:兩中樣品基本水份不一樣粉碎時損耗不一樣,主要是水份。所以制成同樣的風干品;另外篩上物含有的成份密度不一樣,應返還樣品中混勻秤取,要不然檢測結果相對偏差不合格。

    western-blot轉膜是怎么做的

    蛋白免疫印跡( Western Blot) 是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是電轉印法,分為濕式轉印與半干轉印。濕式轉印是將膠塊垂直方向夾在濕式轉印槽內進行電轉印。以E-Blotter濕轉槽為例,一般使用垂直電泳槽的緩沖液槽體,將內部垂直電

    電泳和Western轉印的常見問題

    表1?Common problems for electrophoresis and western bloting問 題可能原因建議解決方法推薦電壓條件下電泳時間過長。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液,使用1X稀釋液。推薦電壓條件下電流過高,熱量過大。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液,使用1X稀釋液。

    電泳儀相關介紹

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    進口葡萄酒背標或將不強制標明干型或半干型

       日前,有酒商表示葡萄酒進口報檢時,將不對產品類型(干紅、半干紅、干白、半干白等)做強制性檢測,也不強制標注在背標上。  事實是否如此?這個新規對進口葡萄酒有何好處?  廣州:不強制標注產品類型  昨日,WBO看見廣州傳世夏渡貿易有限公司總經理張強在朋友圈發布了一條消息:8月起,葡萄酒中文標簽可

    如何選擇合適的電泳槽?

    常有一些用戶在電泳槽的選購時存在一些疑問,我們特作一些提示,以供購置時參考。根據用戶的不同實驗需要,可將最常用的電泳槽分類如下:1 水平電泳槽用于對少量或大批量核酸(DNA或RNA)進行瓊脂糖電泳。水平電泳槽有不同型號,一般分為迷你型,小號,中號和大號,主要差別是凝膠板規格大小和試樣格齒數及厚度。迷

    轉膜時間過長,電壓過大會不會對蛋白有影響

    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~

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    確定是轉膜不穩定造成的而不是電泳的問題?電泳后的條帶正常?可能很多原因~轉膜液離子強度不對~轉膜電壓電流不穩定~轉膜儀的問題~一般來說濕轉比半干轉更穩定一些~只不過時間長~

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