放射免疫分析的標記方法
125I 標記化合物的制備方法可分為直接標記和間接標記兩類方法。(1)直接標記法最常用于肽類、蛋白質和酶的碘化標記,其原理是采用化學或酶促氧化反應直接將125I結合于被標記物分子中酪氨酸殘基或組胺殘基上。其特點是標記方法操作簡便,容易將較多的125I結合到被標記分子上,得到比放射性較高的標記物。但該法不適用于分子中不含前述可碘標記殘基的化合物或可碘化殘基位于被標記物的生物免疫活性功能域等情況。(2)間接標記法聯接標記(Bolton-Hunter)是最常用的間接碘標記方法。該法主要用于甾體類化合物等缺乏供碘標記部位的小分子化合物。該法避免了標記反應中的氧化/還原劑對待標記物免疫活性的損傷,尤其適用于對氧化敏感的肽類化合物,以及某些不含酪氨酸殘基的蛋白質(如半抗原)和酪氨酸殘基未暴露在分子表面化合物的標記。不足之處是標記物的添加基團可能影響被標記物的免疫活性。......閱讀全文
放射免疫分析的標記方法
125I?標記化合物的制備方法可分為直接標記和間接標記兩類方法。(1)直接標記法最常用于肽類、蛋白質和酶的碘化標記,其原理是采用化學或酶促氧化反應直接將125I結合于被標記物分子中酪氨酸殘基或組胺殘基上。其特點是標記方法操作簡便,容易將較多的125I結合到被標記分子上,得到比放射性較高的標記物。但該
放射免疫分析標記物的純化及鑒定
(1)純化不論使用何種制備方法,要獲得合格的標記化合物,都必須將反應物經過仔細的分離、純化。另外,一些標記化合物,經過一定時間的存放后,可發生脫碘和自身輻射造成蛋白質被破壞形成碎片,會出現不純物,故需對標記物重新純化。125I標記反應后的混合液需進行分離純化以除去游離 I 和其他試劑,純化標記物的方
放射免疫分析直接標記法與間接標記法的說法正確的是
正確答案:A解析：采用放射性碘制備標志物的基本原理是以放射性碘原子通過取代反應置換被標志物分子中酪氨酸或酪胺殘基以及組胺殘基上的氫原子。因此，凡蛋白質、肽類等化合物在結構上含有上述基團，均可用[SB125.gif]I直接標記。而對那些不含上述基團的甾體激素或藥物分子則必須在分子結構上連接相應基團才能
放射免疫分析的同位素標記介紹
標記物標記物是指通過直接或間接的化學反應將放射性核素連接到被標記分子上所形成的化合物。制備高比度、高純度和具完整免疫活性的標記物是建立高質量放射免疫分析法的重要條件。在放射免疫技術中,常用的放射性核素有放射γ射線和β射線兩大類。前者主要為?125I、131I、57Cr 和 60Co;后者為3H、14
放射免疫分析的常用方法
（1）液相法：將待檢標本（例如含胰島素抗原）與定時的同位素標記的胰島素（抗原）和定時的抗胰島素抗體混合，經一定作用時間后，分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原，測定這兩部分的放射活性，計算結合率。醫學/教育網搜集整理在反應系統中，待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰 性與胰島素抗體
放射免疫分析的常用方法
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種： (1)液相法： 將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合，經一定作用時間后，分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原，測定這兩部分的放射活性，計算結合率。在反應系統中，待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素
放射免疫分析常用方法
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種：(1)液相法：將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合，經一定作用時間后，分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原，測定這兩部分的放射活性，計算結合率。在反應系統中，待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭奪戰
抗體的標記方法
熒光色素標記抗體1．準備好凝膠濾柱以便完成結合反應后用于分離標記抗體和游離的熒光色素。分離球形蛋白使用排除極限為20 000～50 000的凝膠介質和細粒級凝膠（直徑約50μm）。所需凝膠濾柱的大小可根據偶聯反應的總體積×20來確定。依據廠家說明準備好濾柱，用20倍柱床體積的PBS灌注濾柱，直至緩沖
放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原（或未知樣品），每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體，在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離，測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。測定時，首先要制備出純的抗原和抗體。凡能刺
放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原（或未知樣品），每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體，在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離，測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。 測定時，首先要制備出純的抗原和抗體
ELISA方法的標記方法介紹
良好的酶結合物取決于兩個條件：即高效價的抗體和高活性的酶。抗體的活性和純度對制備標記抗體至關重要，因為特異性免疫反應隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標記過程中，抗體的活性有所降低，故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白，最好使用親和層析提純的抗體，可提高敏感性，而且可稀釋使用，減少非特異性
抗體標記方法
Biotinylation of Antibody?( Contributed by?Nanci Donacki)??Antibody labeling?(House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers.??Coupling
藻紅蛋白標記抗體的方法﹠PE標記蛋白A方法
藻紅蛋白標記抗體的方法﹠PE-標記蛋白A方法 ? 藻紅蛋白標記抗體的方法： 1. 巰基化藻紅蛋白（PE）的制備； （1） 將600μl濃度為15.5mg/ml的鹽酸巰醇亞胺加到1.2ml濃度為3.6mg/ml的PE中； （2） 將以上混合液和1.2ml pH6.
藻紅蛋白標記抗體的方法﹠PE標記蛋白A方法
藻紅蛋白標記抗體的方法：1.????? 巰基化藻紅蛋白（PE）的制備；（1）???????? 將600μl濃度為15.5mg/ml的鹽酸巰醇亞胺加到1.2ml濃度為3.6mg/ml的PE中；（2）???????? 將以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合，而后裝入透析袋置入50mmol/L p
放射免疫分析常用方法包括哪些？
放射免疫分析常用的有液相法和固相法兩種： (1)液相法：將待檢標本(例如含胰島素抗原)與定時的同位素標記的胰島素(抗原)和定時的抗胰島素抗體混合，經一定作用時間后，分離收集抗原抗體復合物及游離的抗原，測定這兩部分的放射活性，計算結合率。在反應系統中，待檢標本的胰島素抗原與同位素標記的胰島素競爭
親和標記的方法原理
親和標記指用對具有特異的親和性物質中導入化學反應基團的試劑，有選擇地修飾存在于活體高分子的對應結合部位的官能基。因根據親和標記的目的而設計的試劑，對相應的活體高分子具特異的親和性，故形成試劑與活體高分子的特異的復合體，結果在結合部位試劑之濃度特別高，因而結合部位的官能基得到良好的修飾。例如，對以芳香
親和標記的方法介紹
親和標記(affinity labeling)：指對酶的活性部位、受體的結合位點進行特異標記的方法。試劑A-X的A基團和X基團可分別與不同的位點進行結合，從而將兩種物質交聯在一起。
選擇合適的標記方法
地高辛（DIG）產品選擇指南——選擇合適的標記方法標記DNA探針如果您有足夠量的高純度模板，建議您采用隨機引物標記方法的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I?和II。這兩個試劑盒包含了標記、封閉、雜交和檢測所需要的所有試劑，是
HRP標記抗體的方法
?? 酶與抗體交聯的方法有許多種,根據酶的結構不同可采用不同的方法。對于制備HRP結合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。 戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。 2. 標記
基因探針的標記方法
為了確定探針是否與相應的基因組DNA雜交，有必要對探針加以標記，以便在結合部位獲得可識別的信號,通常采用放射性同位素32P標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素、地高辛配體等作為標記物的方法。但都不及同位素敏感。非同位素標記的優點是保存時間較長,而且避免了同位素的污染。
親和標記的方法介紹
對酶的活性部位、受體的結合位點進行特異標記的方法。試劑A-X的A基團和X基團可分別與不同的位點進行結合,從而將兩種物質交聯在一起。如用親和標記法分離細胞表面受體時, 先將細胞與超量標記的激素(配體)混合,以飽和所有特異受體的激素結合位點；洗去多余的激素,然后加入能夠與受體和配體結合的共價交聯劑將激素
動物的標記方法匯總
動物實驗之前常常需要作適當的分組,簡單的方法就是將其標記使各組加以區別, 良好的標記方法應滿足標號清晰、耐久、簡便、適用的要求。清晰持久編號不會使動物之間產生混淆,使動物實驗能順利開展。文末附采購鏈接。實驗中常用的動物編號方法有以下幾種：（一）染色法染色法是用化學藥品在實驗動物身體明顯的部位，如被毛
末端標記法介紹DNA探針的標記方法
末端標記法不是將DNA進行全長標記，只在其5'端或3’端導入標記物進行部分標記。該標記方法可得到全長DNA探針，因為攜帶的標記分子較少，所以標記比活性不高。
放射免疫分析的實驗方法及測定
（一）抗原抗體反應 將未標記抗原（標準品和待測樣品）、標記抗原和特異性抗體加入反應試管中，在一定條件（溫度、時間及介質pH）下進行競爭抑制反應。 先加待測樣品（或標準品）和抗血清，使非標記抗原與抗體達到結合平衡，然后再加入標記抗原競爭與抗體結合。 （二）分離結合與游離標記物 RIA反應平
放射免疫分析的實驗方法及測定
（一）抗原抗體反應將未標記抗原（標準品和待測樣品）、標記抗原和特異性抗體加入反應試管中，在一定條件（溫度、時間及介質pH）下進行競爭抑制反應。先加待測樣品（或標準品）和抗血清，使非標記抗原與抗體達到結合平衡，然后再加入標記抗原競爭與抗體結合。（二）分離結合與游離標記物RIA反應平衡后，標記抗原與試劑
概述放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原（或未知樣品），每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體，在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離，測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。 測定時，首先要制備出純的抗原和抗體
簡述探針標記方法
①缺口平移標記法。利用的是DNA聚合酶I能修復DNA鏈的功能。該法先由DNaseI在DNA雙鏈上隨機切出切口，然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´；端核苷酸，同時在3´；端修復加入被標記核苷酸，切口平行推移。缺口平移法快速、簡便、成本相對較低、比活性相對較高、標記均勻，多用于大分
臨床化學檢查方法介紹放射免疫分析
放射免疫分析介紹： 放射免疫技術為一種將放射性同位素測量的高度靈敏性、精確性和抗原抗體反應的特異性相結合的體外測定超微量(10-9-10-15g)物質的新技術。廣義來說，凡是應用放射性同位素標記的抗原或抗體，通過免疫反應測定的技術，都可稱為放射免疫技術，經典的放射免疫技術是標記抗原與未標抗原競爭有
放射性標記化合物的標記方法
放射性標記化合物的常用標記方法有化學合成法、同位素交換法和 生物化學法。通常是根據所需標記化合物的組成、結構及應用要求來選擇合適的放射性核素，然后再根據可提供的含有所需放射性核素的原料，結合應用要求來設計其標記路線。原料的物理化學性質不同，所采用的標記路線也不同（見放射性標記方法）。常用于標記的放射
自旋標記法的方法介紹
自旋標記 （spin label）， 很多物質的分子不表現電子自旋共振（ESR），但對這些分子，人工地使之與自由基（free radical）結合從而得以用ESR法來研究，獲得獨特的ESR信息，這就是自旋標記法。