放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原(或未知樣品),每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體,在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離,測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。測定時,首先要制備出純的抗原和抗體。凡能刺激機體產生抗體,且與抗體發生特異性結合反應的物質通稱為抗原,例如蛋白質(細菌、病毒、異種血清等)。只有反應原性而無免疫原性的物質稱為不完全抗原或半抗原,如多糖、類脂和一些小分子物質。可用化學方法把一些半抗原與載體(蛋白質的大分子)結合而獲得免疫原性,這種結合為RIA 開辟了廣泛的應用范圍。常用的載體有γ球蛋白、纖維蛋白質、雞卵蛋白、血藍蛋白和各種甲狀腺球蛋白。半抗原結合載體是由半抗原的功能基團與載體功能基團所決定,一般連接后不應引起半抗原結構改變,也不使載體蛋白變性。常用結合載體的方法有混合酸堿法、水溶性的羰二亞胺法等。抗體是能與相應......閱讀全文
放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原(或未知樣品),每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體,在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離,測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。 測定時,首先要制備出純的抗原和抗體
放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原(或未知樣品),每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體,在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離,測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。測定時,首先要制備出純的抗原和抗體。凡能刺
概述放射免疫分析法的測定方法
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原(或未知樣品),每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體,在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離,測量放射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。 測定時,首先要制備出純的抗原和抗體
放射免疫分析法測定詳述
分別在一定數量的試管中加入不同濃度的標準抗原(或未知樣品),每管加入等量的放射性標記抗原和一定量的抗體,在4℃或37℃下保溫,待反應平衡后,選用適當的方法將B和F分離,測量放 射性強度,由放射性強度比B/T對Ag量制出標準曲線,即可從標準曲線上查出未知樣品量。 測定時,首先要制備出純的抗原和
放射免疫測定的方法介紹
放射免疫測定是利用放射性同位素的高度靈敏性、精確性與?抗原抗體反應的特異性相結合而創建的一種 在液相內微量物質的定量測定方法。
放射免疫分析法的展望
在本法的基礎上,近年來又發展了其他免疫分析法,用其他有特殊性質的物質代替放射性同位素來標記抗原,同樣利用標記與未標記抗原與抗體的競爭性結合,然后用適宜方法測定。其中研究較多的是熒光免疫分析,采用熒光化合物標記抗原,結合分離后通過熒光值的測定進行定量分析。
放射免疫分析法的展望
在本法的基礎上,近年來又發展了其他免疫分析法,用其他有特殊性質的物質代替放射性同位素來標記抗原,同樣利用標記與未標記抗原與抗體的競爭性結合,然后用適宜方法測定。其中研究較多的是熒光免疫分析,采用熒光化合物標記抗原,結合分離后通過熒光值的測定進行定量分析。
放射免疫分析法的原理
使放射性百標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成度*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態
放射免疫分析法的原理
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡
放射免疫分析法的原理
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為:*Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡。如果反
放射免疫分析法的原理
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡
放射免疫分析法的建立
一、放射免疫分析的基本試劑 (一)標準品 標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。 按實
放射免疫分析法的應用
催乳素、黃體化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鑒別、診斷、研究激素的生理和藥理作用,目前較多用于研究激素與受體結合的機理。在傳染病學方面廣泛用于乙型肝炎抗原的亞型分類測定。在臨床免疫學上測定免疫球蛋白G、免疫球蛋白E及抗脫氧核糖核酸抗體;進一步的應用包括甲狀腺球蛋白抗體、類風濕因子、補體及抗
放射免疫分析法的應用
此法用于在內分泌學中測定胰島素、生長激素、甲狀旁腺激素、血管緊張素、催乳素、黃體化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鑒別、診斷、研究激素的生理和藥理作用,目前較多用于研究激素與受體結合的機理。在傳染病學方面廣泛用于乙型肝炎抗原的亞型分類測定。在臨床免疫學上測定免疫球蛋白G、免疫球蛋白E及抗脫氧
放射免疫分析法的簡介
Radioimmunoassay RIA 利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。1960年美國化學家R.S.耶洛和S.A.貝爾森提出此法,耶洛因此于1977年獲得諾貝爾生理學或醫學獎。 她從小酷愛自然科學。在大學里,她熱衷
放射免疫分析法簡介
利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。 Radioimmunoassay RIA 利用同位素標記的與未標記的抗原同抗體發生競爭性抑制反應的放射性同位素體外微量分析方法。又稱競爭性飽和分析法。1960年美國化學家R.S.耶洛
放射免疫分析法原理
使放射性標記抗原和未標記抗原(待測物)與不足量的特異性抗體競爭性地結合,反應后分離并測量放射性而求得未標記抗原的量。用反應式表示為: *Ag為同位素標記的抗原,與未標記的抗原Ag有相同的免疫活性,兩者以競爭性的方式與抗體Ab結合,形成*Ag-Ab或Ag-Ab復合物,在一定反應時間后達到動態平衡
放射免疫測定方法的基本介紹
放射免疫測定是利用放射性同位素的高度靈敏性、精確性與 抗原抗體反應的特異性相結合而創建的一種 在液相內微量物質的定量測定方法。 放射免疫測定(radioimmunoassay,RIA)是利用放射性核素的測量方法與免疫反應的基本原理相結合的一種放射性核素體外檢測法。該法有靈敏度高、特異性強、精確
關于放射免疫分析法的展望
在本法的基礎上,近年來又發展了其他免疫分析法,用其他有特殊性質的物質代替放射性同位素來標記抗原,同樣利用標記與未標記抗原與抗體的競爭性結合,然后用適宜方法測定。其中研究較多的是熒光免疫分析,采用熒光化合物標記抗原,結合分離后通過熒光值的測定進行定量分析。
放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結
放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結果等
放射免疫分析法的建立-2
(3)分離B與F:每管加入2%加膜活性炭溶液300μl,搖勻,立即離心,去上清,測沉淀(F)的CPM數。 (二)順序飽和加樣程序 1、基本原理 先將標準物或血樣品與抗血清混勻,免疫反應6~24h,使抗原與抗體充分結合,甚至達到平衡,然后再加入標記抗原,與抗體反應12~24h,最后分離B
放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結
放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結果等
放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結果等
放射免疫分析法的建立-1
一、放射免疫分析的基本試劑(一)標準品標準品是放射免疫分析法定量的依據,由于以標準品的量用來表示被涮物質的量,故標準品與被測物質應當化學結構一致并具有相同免疫活性。標準品作為定量的基準。應要求高度純化。標準品除含量應具有準確性外,還應具備穩定性,即在合理的貯存條件下保持原來的特性。按實驗要求,將標準
放射免疫分析法未來展望
在本法的基礎上,近年來又發展了其他免疫分析法,用其他有特殊性質的物質代替放射性同位素來標記抗原,同樣利用標記與未標記抗原與抗體的競爭性結合,然后用適宜方法測定。其中研究較多的是熒光免疫分析,采用熒光化合物標記抗原,結合分離后通過熒光值的測定進行定量分析。
關于放射免疫分析法的應用介紹
此法用于在內分泌學中測定胰島素、生長激素、甲狀旁腺激素、血管緊張素、催乳素、黃體化激素、促卵泡成熟激素、前列腺素等,以鑒別、診斷、研究激素的生理和藥理作用,目前較多用于研究激素與受體結合的機理。在傳染病學方面廣泛用于乙型肝炎抗原的亞型分類測定。在臨床免疫學上測定免疫球蛋白 G、免疫球蛋白E及抗脫
簡述放射免疫分析法的優缺點
RIA法的優點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等,常可測至皮摩爾。本法雖然也用放射性物質,但一般都是在測試樣品時再加入標記的同位素示蹤物,此示蹤物的放射性強度極低,一般不會對實驗者引起輻射損傷。本法的缺點是有時會出現交叉反應、假陽性反應,組織樣品處理不夠迅速,不能滅活降解酶和鹽及pH有時會影響結
放射免疫分析法測定重組人白細胞介素-2
白細胞介素-2(interleukin rhlL-2,IL-2)主要由活化的T淋巴細胞分泌的一種糖蛋白,是調節機體免疫功能最主要的淋巴因子之一。天然IL-2含有糖基,基因重組IL-2不含糖基,由133個氨基酸組成,相對分子質量為15KD。IL-2在機體應答,免疫調節和抗腫瘤免疫中具有十分重要的作