WB一抗用什么稀釋
建議起始濃度1:200開始（當然你也可以1:100，如果你的背景不高的話），倍比稀釋，不是再做1:100-1:1000稀釋，注意了。其實沒有必要分裝，一般都會添加保護劑的。如果你一定要分裝，建議原液分裝或是10稀釋后分裝。溶液的濃度取決于溶解在溶劑內的物質的多少。溶解度則是溶劑在特定溫度下，可以溶解最多多少物質。 有機溶劑主要用于干洗（例如四氯乙烯）。作涂料稀釋劑（例如甲苯、香蕉水、松香水、松節油），作洗甲水或去除膠水（例如丙酮，醋酸甲酯，醋酸乙酯），除銹（例如己烷），作洗潔精（檸檬精），用于香水（酒精）跟用于化學合成......閱讀全文
WB一抗用什么稀釋
建議起始濃度1:200開始（當然你也可以1:100，如果你的背景不高的話），倍比稀釋，不是再做1:100-1:1000稀釋，注意了。其實沒有必要分裝，一般都會添加保護劑的。如果你一定要分裝，建議原液分裝或是10稀釋后分裝。溶液的濃度取決于溶解在溶劑內的物質的多少。溶解度則是溶劑在特定溫度下，可以溶解
WB一抗用什么稀釋
建議起始濃度1:200開始（當然你也可以1:100，如果你的背景不高的話），倍比稀釋，不是再做1:100-1:1000稀釋，注意了。其實沒有必要分裝，一般都會添加保護劑的。如果你一定要分裝，建議原液分裝或是10稀釋后分裝。溶液的濃度取決于溶解在溶劑內的物質的多少。溶解度則是溶劑在特定溫度下，可以溶解
做wb時，一抗和二抗濃度是怎么確定的
一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結果），如果樣品與廠家的不是一種細胞，可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度；二抗的用量，和你所在實驗室常規的用量就可以，如果出現效果不理想的狀態
做wb時，一抗和二抗濃度是怎么確定的
一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結果），如果樣品與廠家的不是一種細胞，可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度；二抗的用量，和你所在實驗室常規的用量就可以，如果出現效果不理想的狀態
wb二抗怎么融化
wb 二抗融化，wb 抗體用5%的脫脂奶粉或者1%的BSA （千分之一的TBST的溶液 )配置，可以先讓抗體和奶粉或者BSA 蛋白非特異結合，這樣就不會與PVDF 膜上的蛋白結合了。
wb二抗室溫幾小時
二抗一般室溫就行,沒要求要37度,一個小時差不多就夠了。
wb二抗室溫幾小時
二抗一般室溫就行,沒要求要37度,一個小時差不多就夠了。蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或
做WB時羊抗鼠二抗的稀釋比例一般是多少
【1】抗體的說明上，都給出了一個范圍，可以以這個范圍為根據摸索。開始的時候可以把膜剪成幾小塊，每一塊用不同的一抗二抗濃度，這樣就可以比較快的摸出適宜的濃度。有些時候也有一定的經驗的：我用的是SANTA CRUZ的抗體，一抗建議的稀釋比是1：200－1000，我用的是1：400效果挺好的。周圍的人用的
做WB時羊抗鼠二抗的稀釋比例一般是多少
【1】抗體的說明上，都給出了一個范圍，可以以這個范圍為根據摸索。開始的時候可以把膜剪成幾小塊，每一塊用不同的一抗二抗濃度，這樣就可以比較快的摸出適宜的濃度。有些時候也有一定的經驗的：我用的是SANTA CRUZ的抗體，一抗建議的稀釋比是1：200－1000，我用的是1：400效果挺好的。周圍的人用的
WB檢測中二抗的選擇方法
WB檢測之二抗二抗選擇二抗是用一抗免疫動物制備的抗一抗的抗體，選擇范圍較窄，基本是商品化的，在不考慮二抗修飾類型的前提下，二抗的選擇需要遵循以下原則：二抗來源種屬、一抗來源種屬和抗原來源種屬互不相同。例如如果研究對象是人的蛋白X，選擇了鼠抗X一抗，則可選擇兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二抗。二抗選擇要考慮的問
WB檢測中二抗的選擇方法
WB檢測之二抗 二抗選擇 二抗是用一抗免疫動物制備的抗一抗的抗體，選擇范圍較窄，基本是商品化的，在不考慮二抗修飾類型的前提下，二抗的選擇需要遵循以下原則：二抗來源種屬、一抗來源種屬和抗原來源種屬互不相同。例如如果研究對象是人的蛋白X，選擇了鼠抗X一抗，則可選擇兔抗鼠二抗或者羊抗鼠二
WB中為什么封閉還有一抗孵育過夜時都要在四度冰箱
一抗在4度下最好放保存
一抗、二抗如何保存
工作液根據需要稀釋在5%奶粉里，再加入少量疊氮化鈉（大約0.01% w/v），4度保存。Alisa_lin(站內聯系TA)分裝，-20度保存。不要反復凍融，沒有用過粉末的二抗，按說明書唄石頭2011(站內聯系TA)液體的一抗沒加甘油的話盡量不要放在負二十，因為用的時候反復凍融不好。粉末狀的二抗負二十
WB前一定要做蛋白濃度測定嗎
一抗的用量和樣品中的目標分子含量相關，如果含量較高，就不需要用太多一抗，以免浪費和條帶太亮不易分析。推薦采用廠家的抗體濃度（義翹神州會提供抗體用量、天然細胞株檢測結果），如果樣品與廠家的不是一種細胞，可以嘗試上下摸索一兩個濃度梯度； 二抗的用量，和你所在實驗室常規的用量就可以，如果出現效果不理想的
wb電泳為什么不在一條線上
wb電泳不在一條線上的原因：1、樣本本身含有高鹽。2、積層膠長度不足，一般樣品1-2cm足矣。但是如果樣本含有高鹽可以考慮將積層膠加長到4cm左右。3、緩沖液需要更換。使用多次的Buffer緩沖能力會大打折扣，如果樣品珍貴難得推薦用新鮮配制電泳緩沖液，反之用3次就丟棄。4、上樣量有關。5、電壓不要太
一抗/二抗該選誰？
?? 我們在生活中經常會面臨做選擇這樣的一個難題，其實做選擇本身并不是多么困難的事情，關鍵在于您是否了解自己內心真正需要的是什么。就好比我們的實驗者在選擇產品的品牌、質量、規格等，根據這些信息再去做相關的判斷。比如zui簡單的一個例子，不少的伙伴都對一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱，那如何選擇呢，技術教
怎樣稀釋一抗和二抗
一抗的確比二抗貴，我們實驗室1：500~1：1000稀釋一抗體都可以，雜交袋盡量小，一抗稀釋液其實只要能覆蓋完整個條帶的用量就可以
一抗二抗的制備方法
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。 5%脫脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
一抗二抗的制備方法
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法： 包被：用0.05M PH9.6 碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。 5%脫脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或
一抗的選擇
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，為縮小抗體的選擇范圍選中合適的抗體，需要考慮如下幾種因素：?分析試驗應用的類型l?樣本蛋白的結構性質l?樣本的種屬l?抗體宿主的種類l?抗體的標記和檢測l1.分析試驗應用的類型???一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型，如：可以應用于W
一抗和二抗用什么稀釋
一抗的確比二抗貴，我們實驗室1：500~1：1000稀釋一抗體都可以，雜交袋盡量小，一抗稀釋液其實只要能覆蓋完整個條帶的用量就可以
ELISA如何選一抗與二抗
二抗廣義上是指專門和一抗進行特異性反應和結合的抗體，在免疫學反應中，經常需要針對試驗選擇不同的二抗，艾美捷能為您的科研工作提供最適合和最全面的二抗產品。檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，同時在后繼試驗中也會有不同的檢測方案，因此在選擇二抗的時候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求，一般
WB操作規程
一、設備和試劑1．設備① 電泳電源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 電泳儀及附件Mini-PRO
WB實驗小問答
? WB又稱免疫印記法.是將生物大分子物質通過不同途徑轉移到固相載體的過程。其靈敏，可達ng級，用Ecl顯色法理論上可達pg 級。方便，特異性高。今天給大家分析的是western blot實驗中那些常見的問題，這份干貨內容，請收好啦！? ? western blot 常見問題有那些？? ? 1.為什
WB顯影要多久
每個顯影試劑盒都不一樣，建議看說明書。實際情況視熒光強度而定，你看顯出一點兒樣子了，就趕緊撈出來，不然片子就太黑了。在加熒光劑后，反應大概一到四分鐘。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移動膜，否則熒光會消失。膜上覆蓋一張保鮮膜，小心，鋪展。將準備好的膠片放在膜上，放上去后也不要再移動了。然后壓片。可
WB顯影要多久
每個顯影試劑盒都不一樣，建議看說明書。實際情況視熒光強度而定，你看顯出一點兒樣子了，就趕緊撈出來，不然片子就太黑了。在加熒光劑后，反應大概一到四分鐘。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移動膜，否則熒光會消失。膜上覆蓋一張保鮮膜，小心，鋪展。將準備好的膠片放在膜上，放上去后也不要再移動了。然后壓片。可
WB實驗問題總結
答：原因有很多：a) 你的細胞中不表達這種蛋白質，換一種細胞；b) 你的細胞中的蛋白質被降解掉了，你必需加入PMSF，抑制蛋白酶活性；c) 你的抗體不能識別目標蛋白，多看看說明，看是否有問題。答：a) 有沉淀可能因為你的蛋白沒有變性完全，可以適當提高SDS 濃度，同時將樣品煮沸時間延長；b) 也不排
WB電泳濃縮膠沒壓成一條線
第一、樣本本身含有高鹽。第二、積層膠長度不足，一般樣品1-2cm足矣。但是如果樣本含有高鹽可以考慮將積層膠加長到4cm左右。第三、緩沖液需要更換。使用多次的Buffer緩沖能力會大打折扣，如果樣品珍貴難得推薦用新鮮配制電泳緩沖液，反之用3次就丟棄吧！第四、上樣量有關。dxylark已經敘述。第五、電
為什么一抗可以回收二抗不能
因為一抗我們是用BSA加疊氮鈉稀釋的，要回收，一般只要不長細菌就一直用，但是中間要補一些抗體，不然太稀了曝不出來，二抗是用脫脂奶粉稀釋的，不回收。
western如何孵一抗
將抗體稀釋到推薦濃度，這要是看你放膜的容器大小，如果容器剛好和膜差不多，只要配少量的一抗溶液就可以完全覆蓋膜，但是如果容器較大，就需要事先看多少ml的溶液才能夠用。抗體溶液倒到膜上后，將容器放到一個水平搖床，或者是染色搖床上，緩慢的搖動。可以在4C過夜孵育，也可以在室溫孵育1h即可。