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    細胞周期如何檢測

    碘化丙啶(propidium iodide, PI)檢測凋亡細胞早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞凋亡和壞死的一個重要指標,凋亡細胞在進入最終溶解階段前,胞膜通透性無明顯改變,相對分子質量大的與DNA結合的熒光染料(如PI)不能時入凋亡細胞內,而相對分子質量小的熒光染料(如Hoechest 3342或33258等)仍能被細胞攝取。應用流式細胞儀或熒光顯微鏡可區分和壞死細胞,細胞內DNA出現Hoechest 3342標記而不出現PI標記的為凋亡細胞。主要操作步驟如下:①組織塊用0.25%胰酶消化30min~1h。②200~400目篩網過濾細胞,獲得單細胞懸液。③75%乙醇(-20℃預冷)固定細胞1h。④加入PI(終濃度50g/mL)和無DNA酶污染的RNA酶(終濃度50g/mL)1mL染色30min~1h。⑤流式細胞儀檢測細胞周期和凋亡細胞凋亡情況觀察及凋亡率檢測培養48h后細胞分為兩部分,一部分行碘化丙啶( pI )染色,......閱讀全文

    細胞周期的四種檢測方法詳解(一)

    細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數,研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。細胞周期內有兩個階段最為重要:G1 到

    細胞周期的四種檢測方法

    細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數,研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。細胞周期內有兩個階段最為重要:G1 到

    活細胞評價細胞周期抑制劑——ImageXpress? Micro

    前言監測對細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。活細胞高內涵的篩選已被驗證可以區分細胞的每個周期。此技術結合BacMam轉染系統,可使細胞表達兩種細胞周期相關熒光融合蛋白。延時監測實驗持續2-3天,細胞置于ImageXpr

    細胞同步化實驗操作步驟

    在腫瘤細胞培養過程中,細胞多處于不同的細胞周期時相中。不同時相的細胞對藥物干預存在不同的反應,會影響實驗的重復性,因此需要制備細胞周期一致的細胞。細胞同步化是解決該問題的好辦法。細胞同步化是利用藥物或其他方法使細胞停止在細胞周期的某個時相的技術,其基本原則是使細胞停留在細胞周期的特定時相上;停滯過程

    什么是細胞周期?細胞周期時間如何確定?

    細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。過程間期間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 從有絲分裂到DNA復制前的一段時期,又稱合成前期,

    周斌組合作發現心肌細胞的增殖活性具有區域性特點

      10月1日, 國際學術期刊 Nature Communications 在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)周斌組與上海交通大學胸科醫院何奔組合作的研究成果“Cell proliferation fate mapping reveals regional c

    Biosensis細胞周期調節劑研究相關抗體的比較與選型

         在具有核(真核生物)的細胞(即動物,植物,真菌和原生質細胞)中,細胞周期分為兩個主要階段:間期和有絲分裂(M)階段。在間期,細胞生長積累有絲分裂所需的營養,并復制其DNA和一些細胞器。在有絲分裂階段,復制的染色體,細胞器和細胞質分成兩個新的子細胞。為了確保細胞

    嘉和生物1類新藥CDK4/6抑制劑臨床申請獲CDE受理

      12月28日,嘉和生物1類新藥lerociclib片臨床試驗申請獲CDE受理。擬開發用于治療HR+/HER2 -轉移性乳腺癌。  Lerociclib是G1 Therapeutics開發的一款潛在“best-in-class”的口服CDK 4/6(細胞周期蛋白依賴性激酶 4/6)抑制劑。今年6月

    細胞周期-1

    以有絲分裂方式增殖的細胞從一次分裂結束到下一次分裂結束所經歷的過程。這一過程周而復始。細胞周期是50年代細胞學上重大發現之一。在這之前認為有絲分裂期是細胞增殖周期中的主要階段,而把處于分裂間期的細胞視為細胞的靜止階段。1951 年霍華德等用32P-磷酸鹽標記了蠶豆根尖細胞,通過放射自顯影研究根尖

    實驗技巧:流式細胞儀細胞周期結果分析

    張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同分

    實驗技巧:流式細胞儀細胞周期結果分析

    *張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。*張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比*張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同

    流式細胞儀細胞周期結果判斷QA

    請幫忙分析一下第一張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。能說明轉染后的細胞增值能力強了嗎,怎么看出來的。據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比第一張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期是基于細胞處于不同分裂時期具有不同的DNA含量而分析細胞處于不同的時期的方法。確切的說結果

    細胞培養的基本方法(二)

    第四節 細胞計數及活力測定一、原理 培養的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要進行細胞計數。計數結果以每毫升細胞數表示。細胞計數的原理和方法與血細胞計數相同。在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,由組織中分離細胞一般也要檢查活力,以了解分

    細胞實驗技術及細胞培養基本知識-1

    細胞培養技術細胞周期的測定一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。  單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。  測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法

    中國科研團隊找到細胞增殖“剎車司機”

    USP11通過p21調控細胞周期模式圖。 湖南大學生物學院供圖  湖南大學17日對外透露,該校分子科學與生物醫學實驗室(MBL)葉茂教授研究團隊在國際上首次發現了細胞周期蛋白激酶抑制子p21的去泛素化酶USP11,證實了USP11通過去泛素化并穩定p21能夠抑制細胞增殖。  細胞增殖是細胞生命活動的

    細胞周期測定實驗——BrdU滲入法

    實驗方法原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。 單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。 BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基后,可做為細胞

    流式細胞儀細胞周期結果分析

    第一張是未轉染的第12代,第二章是轉染后的第22代。第一張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期 ):21.7%第二張圖:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%據此分析兩者的增值沒有明顯的差別。雖然第二張圖比第一張圖的S期有所增高,但G2期下降了。細胞周期

    新研究推翻了1974年以來使用的細胞周期“快照”模型

      細胞要作出一個較大的決定:它們應當進行復制還是處于靜止狀態?健康細胞能夠以其中的任一種方式前進。癌細胞的復制開關停留在“開啟”位置。如今,在一項新的研究中,來自美國科羅拉多大學博爾德分校的研究人員推翻了關于復制開關如何發揮作用的傳統觀點,即一種自1974年以來就被接受且被納入到當前的教科書中的模

    流式檢測細胞周期

    線粒體膜電位(MMP):使用幾種染料中的其中一種就可以檢測到細胞在凋亡過程中MMP的降低,如雙氰基-雙己氧基羰基靛藍,它能夠隱藏在活細胞的線粒體內。當MMP體系崩潰時,細胞的熒光就會減少。磷脂酰絲氨酸(PS)在細胞表面的分布情況:PS一般分布在質膜的內側上。在細胞凋亡過程中,PS殘余物會曝露在細胞表

    上海科大:細胞周期蛋白在多細胞生物中的更多潛在功能

      上海科技大學生命科學與技術學院助理教授Yuu Kimata發表題為 “APC/C Ubiquitin Ligase: Coupling Cellular Differentiation to G1/G0 Phase in Multicellular Systems”的評論文章,介紹了近期發表的有

    細胞周期的間期與分裂期階段介紹

    細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。(一) 間期間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。1. G1期(first gap) 從有絲分裂到DNA復制前的一段時期,又稱

    臨檢基礎:抑癌基因及其與細胞周期關系

    抑癌基因(tumor suppressor gene)指正常細胞內存在的,能抑制細胞轉化和腫瘤發生的一類基因群,當它們受到各種因子的作用失活后,細胞的生長分化失控,增加了細胞惡性轉化的可能性。目前已分離克隆的抑癌基因有Rb、p53、p16、p33ING1、nm23、TIMP、KAI1、APH、MC

    流式細胞儀在生物學中的應用

    流式細胞儀在生物學中的應用 耿慧霞 ,王 來 ,王 強 (河南大學生命科學學院 ,河南開封 475001) 摘 要 :簡要論述了流式細胞儀(flow cytometry ,FCM) 的工作原理 ,并對其在生物學基礎科學研究中的應用進行闡述 ,包括 對細胞凋亡、細胞周期、免疫細胞、細胞受體的研

    p53基因的臨床應用(二)

    簡介    P53蛋白主要分布于細胞核漿,能與DNA特異結合,其活性受磷酸化、乙酰化、甲級化、泛素化等翻譯后修飾調控。正常P53的生物功能好似“基因組衛士(guardian of the genome)”,在G1期檢查DNA損傷點,監視基因組的完整性。如有損傷,

    原代細胞周期測定的原理和BrdU方法

    原理: 細胞周期:細胞一世代所經歷的時間從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計法等。BrdU(5溴脫氧尿嘧啶核苷)加入培養基

    西南大學最新文章:細胞周期必需因子

      來自西南大學家蠶基因組生物學國家重點實驗室的研究人員利用家蠶EST數據, 成功克隆了家蠶Cyclin B3基因(EU074796),并通過家蠶卵巢細胞系BmN-SWU1的BmCyclin B和BmCyclin B3基因RNA干涉研究,發現BmCyclin B和 BmCyclin B3 是

    細胞周期該如何測定?

    一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測

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    真菌/酵母樣品細胞細胞周期碘化丙啶紅色熒光流式細胞分析試劑盒使用說明真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑盒產品說明書(中文版)主要用途YIJI真菌/酵母細胞樣品細胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)紅色熒光流式細胞分析試劑是

    細胞周期測定的方法步驟

    一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測

    細胞周期和細胞增殖:概述

    為了幫助研究人員更好地了解基本的細胞參與免疫,炎癥,造血,瘤,和其他生物反應的機制,BD Biosciences公司提供了一系列工具,包括測量增殖反應的抗體,試劑盒和系統。利用流式細胞儀,免疫熒光或免疫組化,研究人員可以迅速準確地確定人口增殖的細胞周期狀態的單個細胞內或組織定位。這些工具包括:  B

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