細胞周期的四種檢測方法詳解(一)
細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。細胞周期是一個重要的檢測參數,研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發展及藥物研發有著重要的作用。例如,已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。細胞周期內有兩個階段最為重要:G1 到 S 和 G2 到 M;這兩個階段正處在復雜活躍的分子水平變化的時期,容易受環境條件的影響,如果能夠人為地進行調控,將對深入了解生物的生長發育和控制腫瘤生長等有重要意義。能夠方便有效地檢測細胞周期的變化,對于藥物研發和疾病研究等都具有重要的意義。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。那么,細胞周期的測定如何進行的呢?測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、流式細胞儀法、基于細胞成像的熒光檢測法等。一、同位素標記法測定細胞周期標記有絲分裂百分率法 (PLM) 是一種常用的測定......閱讀全文
細胞周期蛋白質的細胞周期
我們可以把細胞周期人為地劃分為幾個時期。開始人們按照細胞所處的形態學變化將細胞劃分為間期和分裂期兩相,霍華德學說劃分細胞周期各期則是以細胞核的遺傳物質DNA的復制和分裂作為主要標界——即按時間順序將細胞周期確定為四個期:DNA合成前期(G1期),DNA合成期(S期),DNA合成后期(G2期)和分裂期
細胞周期1
以有絲分裂方式增殖的細胞從一次分裂結束到下一次分裂結束所經歷的過程。這一過程周而復始。細胞周期是50年代細胞學上重大發現之一。在這之前認為有絲分裂期是細胞增殖周期中的主要階段,而把處于分裂間期的細胞視為細胞的靜止階段。1951 年霍華德等用32P-磷酸鹽標記了蠶豆根尖細胞,通過放射自顯影研究根尖
細胞周期2
G2 期 是DNA復制結束和開始有絲分裂之間的間隙,在這期間細胞合成某些蛋白質和RNA分子,為進入有絲分裂提供物質條件。 用放射標記的RNA前體和蛋白質前體示蹤,表明G2 期進行著強烈的RNA和蛋白質的合成。假如破壞這些合成過程,細胞就不能過渡到M期。G2 期合成的是染色體濃縮以及形成有絲
什么是細胞周期?細胞周期時間如何確定?
細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。過程間期間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 從有絲分裂到DNA復制前的一段時期,又稱合成前期,
哪些細胞周期蛋白可以用于細胞周期分析實驗?
以下是一些常用于細胞周期分析實驗的細胞周期蛋白:Cyclin D:在細胞周期的 G1 期發揮作用,其表達水平與 G1 期進程相關。Cyclin E:同樣在 G1 期起作用,促進細胞從 G1 期向 S 期過渡。Cyclin A:在 S 期和 G2 期表達,對 DNA 合成和細胞進入 M 期有重要作用。
什么是細胞周期?
細胞周期(英語:cell cycle),是指能持續分裂的真核細胞從一次有絲分裂結束后生長,再到下一次分裂結束的循環過程(準確來說只要有DNA復制,不管是不是有沒有有絲分裂它都有細胞周期。生殖細胞無細胞周期。)。細胞周期的長短反映了細胞所處狀態,這是一個細胞物質積累與細胞分裂的循環過程。癌變的細胞以及
什么是細胞周期?
細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。生命是從一代向下一代傳遞的連續過程,因此是一個不斷更新、不斷從頭開始的過程。細胞的生命開始于產生它的母細胞的分裂, 結束于它的子細胞的形成,或是細胞的自身死亡。通常將子細胞形成作為一次
細胞周期的測定
一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測
流式檢測細胞周期
線粒體膜電位(MMP):使用幾種染料中的其中一種就可以檢測到細胞在凋亡過程中MMP的降低,如雙氰基-雙己氧基羰基靛藍,它能夠隱藏在活細胞的線粒體內。當MMP體系崩潰時,細胞的熒光就會減少。磷脂酰絲氨酸(PS)在細胞表面的分布情況:PS一般分布在質膜的內側上。在細胞凋亡過程中,PS殘余物會曝露在細胞表
細胞周期測定實驗
細胞計數法 BrdU滲入法 流式細胞儀測定法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養細胞 生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的
細胞周期測定實驗
細胞計數法 BrdU滲入法 流式細胞儀測定法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養細胞 生長、分裂繁殖的能力,可用分裂指數來表示。它與生長曲線有一定的
細胞周期如何檢測
碘化丙啶(propidium iodide, PI)檢測凋亡細胞早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞凋亡和壞死的一個重要指標,凋亡細胞在進入最終溶解階段前,胞膜通透性無明顯改變,相對分子質量大的與DNA結合的熒光染料(如PI)不能時入凋亡細胞內,而相對分子質量小的熒光染料(如Hoechest 3
細胞周期如何檢測
碘化丙啶(propidium iodide, PI)檢測凋亡細胞早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞凋亡和壞死的一個重要指標,凋亡細胞在進入最終溶解階段前,胞膜通透性無明顯改變,相對分子質量大的與DNA結合的熒光染料(如PI)不能時入凋亡細胞內,而相對分子質量小的熒光染料(如Hoechest 3
細胞周期檢測方法
1. 細胞培養:取對數生長期的細胞,按1×106cells/ mL以1mL接種24孔板或2mL接種于6孔板內,進行所需的處理(比如加入藥物),特定時間后終止培養,進行下一步的實驗。2. 細胞固定: 800rpm離心5min,收集細胞沉淀,棄上清,用預冷PBS洗滌兩次,加入預冷75%乙醇,于4℃固定4
細胞周期的概念
細胞周期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期與分裂期兩個階段。生命是從一代向下一代傳遞的連續過程,因此是一個不斷更新、不斷從頭開始的過程。細胞的生命開始于產生它的母細胞的分裂, 結束于它的子細胞的形成,或是細胞的自身死亡。通常將子細胞形成作為一次
什么是細胞周期
細胞周期是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程,分為間期(包括 G1 期、S 期、G2 期)和分裂期(M 期)。G1 期為細胞生長和物質準備期;S 期主要進行 DNA 合成和染色體復制;G2 期為細胞分裂做進一步準備。M 期則是細胞分裂期,包括前期、中期、后期和末期,最終一個母細胞
植物細胞周期觀察
一、實驗目的1.學會植物細胞、組織的固定、離析和壓片方法,了解并初步掌握制作臨時玻片和永久玻片的方法。2.觀察有絲分裂過程中染色體的形態特征和動態變化過程,著重了解分裂期內中、后期染色體變化的特征。二、實驗原理植物根尖分生組織的細胞,依一定的程序有規律地進行著有絲分裂過程,植物種類不同,細胞周期所需
細胞周期的劃分
細胞周期的劃分:G1期→S期→G2期→M期,以及G0期。G1期:進行細胞生長,S 期:進行DNA復制,使DNA成為相同的兩份,G2期:制造蛋白質,準備細胞分裂的所需物質,M期:有絲分裂;為進行核裂(染色體分離)和質裂(細胞質分裂)的階段。當細胞處于G0期時 就會停止細胞一切的復制分裂過程總的看來,細
細胞周期分析實驗中如何選擇合適的細胞周期蛋白?
在細胞周期分析實驗中選擇合適的細胞周期蛋白,需要考慮以下幾個因素:研究目的:明確您想要探究的細胞周期特定階段或細胞周期調控的具體方面。例如,如果關注 G1 期到 S 期的轉換,Cyclin D 和 Cyclin E 可能更合適;若重點是 G2 期到 M 期的進展,Cyclin B 則是較好的選擇。細
brdu細胞周期實驗步驟
1、細胞生長至指數期時,向培養液中加入BrdU,使最終濃度為10μg/ml。 2、44小時加秋水仙素,使每ml中含0.1μg。 3、48小時后常規消化細胞至離心管中,注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。 4、常規染色體制片(見第三部分:染色體技術)。 5、染色體玻片置56℃水浴鍋蓋
人體細胞周期詳解
人體有46條染色體,具體分析如下,減數分裂前期Ⅰ持續時間長,結構變化復雜,通常又可分為細線期、偶線期、粗線期、雙線期和終變期。細線期:第一次分裂開始時,染色體濃縮為細長的細線,但相互間往往難以區分,雖然染色體已在減數分裂前的間期時復制,每一染色體應該已有兩個染色單體,但在細線期的染色體上還看不到雙重
細胞周期的過程分析
間期 間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。 1.G1期(first gap) 從有絲分裂到DNA復制前的一段時期,又稱合成前期,此期主要合成RNA和核糖體。該期特點是物質代謝活躍,迅速合成RNA和蛋白質,細胞體積顯著增大。這一期的主要
細胞周期蛋白的概念
中文名稱細胞周期蛋白英文名稱cyclin定 義一類與細胞周期功能狀態密切相關的蛋白質家族,其表達水平隨著細胞周期發生漲落,可通過與特定蛋白激酶結合并激活其活性,從而在細胞周期的不同階段發揮調控作用。應用學科遺傳學(一級學科),細胞遺傳學(二級學科)
細胞周期測定實驗(一)
標簽: 細胞周期 體外培養 周期測定細胞周期測定可以:(1)作為生物相容性評價指標;(2)用于研究細胞凋亡;(3)作為選擇細胞的依據。實驗方法細胞計數法BrdU滲入法流式細胞儀測定法實驗方法原理流式細胞儀的工作原理是將待測細胞放入樣品管中,在氣體的壓力下進入充滿鞘液的流動室。在鞘液的約束下細胞排成單
細胞周期的DNA檢測
Ⅰ、樣品準備 準備以下一種或幾種樣品A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)B、組織培養細胞C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞Ⅱ、反應體系-DNA低滲緩沖液檸檬酸三鈉 0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核
檢測DNA分析細胞周期
Ⅰ、樣品準備 準備以下一種或幾種樣品A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)B、組織培養細胞C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞Ⅱ、反應體系-DNA低滲緩沖液檸檬酸三鈉?? ???? 0.25gTriton-X 100??????????0.75mlPropidium iod
細胞周期該如何測定?
一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測
細胞周期的影響因素
細胞周期內有兩個階段最為重要:G1到S和G2到M;這兩個階段正處在復雜活躍的分子水平變化的時期,容易受環境條件的影響,如果能夠人為的進行調控,將對深入了解生物的生長發育和控制腫瘤生長等有重要意義。已發現很多體內因素可以激發或抑制細胞的增殖,例如多種激素、血清因子、多胺、蛋白水解酶、神經氨酶、cAMP
細胞周期的間期定義
間期是細胞循環中細胞生長和工作的時段,一個細胞在細胞循環90%左右的時間是在間期中。間期應注意與前期、中期、后期、末期相區分,后四者屬分裂期。
細胞周期測定實驗(二)
一、常見問題1. ?Q:要做胃粘膜組織的DNA含量及倍體檢查,但取材后要等幾個星期才會做流式細胞術檢查,請問:胃組織要怎樣保存好呢?用低溫保存,還是用乙醇固定?或者固定后再低溫下保存??A:我做過乳腺細胞的DNA含量測定,取得組織以后,先處理成單細胞懸液,然后再加70%冰乙醇固定,要保證冰乙醇的最終