恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了傳統的核酸置換酶，使有些LAMP為基礎的恒溫擴增試劑盒可以在15分鐘內完成檢測。......閱讀全文
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中，分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言，由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性，往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難，單一的反應溫度會造成引物和模板，引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增，使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫
恒溫核酸擴增技術概述
恒溫核酸擴增技術是利用各種酶，引物，脫氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及緩沖液的混合物在同一溫度下溫浴一定時間，讓不同的酶與DNA進行反應，從而達到特定DNA片段的擴增。與傳統的PCR核酸擴增相比，恒溫核酸擴增不需要在不同溫度之間的轉換，只要保持酶反應的最佳溫度，37℃、42℃、56℃或6
恒溫核酸擴增技術的特異性
由于恒溫核酸擴增的整個反應是沒有溫度的變化，模板DNA雙鏈的打開，引物與互補片段的鏈接以及新片段的合成都是在同一溫度下進行的。這就造成某些情況下的反應體系里引物之間形成非特異性互補，擴增，最后造成假陽性的結果。與PCR相比，恒溫核酸擴增更易出現假陽性的結果。
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術，其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子，被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA，然后與引物2退火，通過反轉錄合成雙鏈DNA，在T7 RN
恒溫核酸擴增技術與傳統PCR對比
和傳統的PCR技術相比，恒溫核酸擴增不僅僅是縮短了核酸擴增的時間，更重要的是核酸擴增擺脫了對硬件的束縛。PCR技術原理是利用94℃高溫使DNA雙鏈解開，并在耐高溫的DNA聚合酶的作用下擴增DNA片段。PCR反應至少需要2個不同的溫度使DNA片段得到特異性的擴增。恒溫核酸擴增是利用各種酶與DNA之
恒溫核酸擴增技術對引物的高要求
自80年代PCR技術發明以來，PCR引物的設計已經相當成熟，市場上有很多關于PCR引物設計的軟件可供使用。所以設計一對好的PCR的引物并不困難。恒溫核酸擴增剛好相反。一對或者幾對好的引物對任何一種恒溫核酸擴增技術都是相當關鍵的，可是由于恒溫核酸擴增技術各不相同，引物設計方法很難相互借鑒。目前雖然
核酸等溫擴增技術及其應用
據微生物學家的估計，采用培養技術，僅有約1%的細菌可以培養。在過去的一個世紀里，以聚合酶鏈反應（PCR）為代表的基于核酸的檢測技術發展迅速，為其他病原體的精確檢測診斷提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis發明的PCR技術是20世紀80年代分子生物學領域的一項革命性突破。也許他本人當時也沒有想
EMA－常溫核酸擴增技術介紹
基于分子仿生學的原理，把生物體內(如大腸桿菌，酵母或人體等)多酶介導的核酸復制機理在體外再現，使痕量的核酸靶標在普通生物耐受的條件下(常溫下)進行快速的擴增，同時利用特異性熒光探針結合擴增產物，通過熒光檢測儀實時監測熒光信號，實現核酸靶標的快速擴增和檢測。?常溫核酸擴增技（簡稱EMA技術），是由點晶
核酸等溫擴增技術有什么
環介導等溫擴增技術（LAMP）。依賴于核酸序列的擴增技術（NASBA）。滾環擴增技術（RCA）。單引物等溫擴增技術（SPIA）。依賴于解旋酶的等溫擴增技術（HAD）。鏈接代擴增技術（SDA）。快速等溫檢測放大技術（RIDA）。切刻內切酶核酸恒溫擴增技術（NEMA）。核酸等溫擴增技術，無論是在實際操作
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
核酸序列擴增法的技術特點
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點，將結合位點序列與靶序列相連，然后產生靶分子的RNA拷貝，形成反轉錄和RN
依賴核酸序列的擴增技術相關
NASBA的簡要過程如下：1.RNA模板鏈進入反應混合物后，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶，合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H（一種核糖核酸內切酶，能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵，分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈，但不能消化單鏈或雙
核酸序列的擴增技術優勢
相對于免疫學方法或其他基因檢測法，NASBA在試驗的快速、敏感性、特異性方面有更多的優勢。 特異性強：NASBA是一種快速、等溫的RNA擴增技術，通過AMV逆轉錄酶和T7 RNA聚合酶進行的擴增反應，因為反應條件溫和以及比PCR短的反應時間，因此轉錄更加忠實于模板，錯配率很低，因而特異性更強。
依賴核酸序列的擴增技術檢測
1 核酸提取 NASBA 方法的核酸提取可按照常規的RNA提取方法進行，根據實際需要可以采取不同的方法。 2 核酸擴增 將純化的RNA 加到標準的NASBA 反應體系中后，先在65 ℃條件下作用5 min 去除RNA 的二級結構，然后在恒溫的42 ℃條件下開始擴增反應。 3 產物的檢測
依賴核酸序列的擴增技術敘述
國內外的研究結果均表明，草莓組織中富含多糖等物質，分離優質核酸較困難，核酸巾的雜質影響taq DNA聚合酶的活性，從而影響PCR技術在草莓病毒檢測中的應用。為了提高利用PCR技術草莓病毒檢測的穩定性，國內外的學者在草莓核酸提取方法做了較多的研究，利用OIAGEN公司生產的植物RNA提取試劑盒(P
依賴核酸序列的擴增技術解析
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-basedamplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self-sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NA
依賴核酸序列的擴增技術簡述
該技術的檢測反應有賴于AMV逆轉錄酶、噬菌體T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、兩種特別設計的特異性寡核苷酸引物和分子信標探針共同協作而完成。 NASBA全稱是nucleic acid sequence-based amplification，即依賴核酸序列的擴增技術。 依賴核酸序列的擴增技術，是
恒溫擴增技術與PCR－區別
如果是恒溫的話怎么來完成變性、退火以及延伸過程呢下面是摘錄的:操作技術和普通PCR沒區別，反應溫度上不要高溫低溫中文三步，只要60度就可以。原理，在常規PCR基礎上增加了3對引物（普通1對）使得引物幾乎涵蓋了目的基因序列的三分之一以上。如果定量加熒光探針，定性就不必了。
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術，是在同一PCR體系中加入多對特異性引物，一次擴增多個DNA片斷，實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本，減少了工作量，提高了檢測效率，并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯，檢出率低等問題。淋病患者往往
美開發出一種核酸快速擴增技術－大大加快PCR速度
據物理學家組織網8月29日（北京時間）報道，美國能源部勞倫斯·利弗莫爾國家實驗室（LLNL）研究人員最近開發出一種核酸（DNA和RNA）快速擴增技術，使聚合酶鏈式反應（PCR）的速度大大加快，可在3分鐘內將基因組片段擴增10億倍，迅速識別出病原菌。疾病快速診斷有望很快成為現實。相關論文發表在最近出版
多酶恒溫核酸快速擴增技術MIRPA的引物與探針設計指導
近期,頂級學術期刊連發兩篇頂級論文，上半年引爆生物圈的華人科學家張鋒教授團隊又有新動作!這次,他在一月內,分別在《Nature》、《Science》連發兩篇論文!他將CRISPR-Cas13a改造成了靈敏度達到了阿摩爾級(aM,10的負18次方摩爾每升),可以檢測單分子的SHERLOCK技術。而
多酶恒溫核酸快速擴增技術MIRPA的引物與探針設計指導
近期,頂級學術期刊連發兩篇頂級論文，上半年引爆生物圈的華人科學家張鋒教授團隊又有新動作!這次,他在一月內,分別在《Nature》、《Science》連發兩篇論文!他將CRISPR-Cas13a改造成了靈敏度達到了阿摩爾級(aM,10的負18次方摩爾每升),可以檢測單分子的SHERLOCK技術。而這其
恒溫核酸擴增反應引物探針設計問題合集
重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術（由英國公司開發）。以此為基礎的核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全
核酸擴增熒光定量檢測
如果懷疑有乙肝的情況，那么需要到醫院進行專業的檢查，比如做核酸擴增熒光定量檢測之類的，當然核酸擴增熒光定量檢測還可以測量其他方面的情況，比如測解脲脲原體，接下來我們來了解一下核酸擴增熒光定量檢測的相關情況吧。核酸擴增熒光定量檢測檢查什么核酸方面的檢查有核酸擴增熒光定量檢測檢查，那么核酸擴增熒光定量檢
核酸擴增—實時熒光PCR
實時熒光PCR，即在常規PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時，探針結合在DNA任意一條單鏈上；PCR擴增時，Taq酶的5'-3'端外切
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點，將結合位點序列與靶序列相連，然后產生靶分子的RNA拷貝，形成反轉錄和RN
依賴核酸序列的擴增技術的定義和原理
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.
核酸擴增引物設計的要求
1、避免重復堿基，尤其是G。 2、引物退火溫度Tm控制在58～60℃。 3、G+C為30%～80%。 4、3'端最后5個堿基內不能有多于2個的G或C。 5、正向引物與探針離得越近越好，但不能重疊。 6、擴增產物長度不能太大，一般在80～250 bp，80～150bp最為合適。