WIKI資訊
1.等電聚焦后可用一根染色的細線（0.1mm）標出染料前沿的位置； 2.不同品牌的載體兩性電解質性質上有細微的差別，使用不同來源的載體兩性電解質凝膠時候蛋白質分離樣式略有差異，若要獲得最好的重復性一般不要更換載體兩性電解質的品牌； 3.通常，窄范圍的pH梯度可以提高分辨率，但是需要時間也比較常，pH梯度范圍為2是較好的選擇； 4.由于電源和凝膠冷卻系統的限制，最長的凝膠長度為8－10cm，實際上，分別電泳幾塊不同的pH梯度的凝膠比只電泳一塊較長凝膠效果更好； 5.當等電聚焦電泳時間很長時候（〉3000V·h），由于載體兩性電解質不穩定造成的陰極漂移將成為嚴重問題，陰極漂移會破壞pH梯度，尤其是 pH8以上的梯度，為了克服此問題，開發了一種較短時間（1600V·h）完成等電聚焦電泳的技術，即非平衡pH梯度電泳，這樣可以在高pH范圍內聚焦蛋白質，但該方法不能用來測定蛋白質等電點。 6.尿素可以促進蛋白質溶解，......閱讀全文
等電聚焦（Isoelectric focusing，簡稱 IEF）是六十年代中期出現的新技術。近年來等電聚焦技術有了新的進展，已迅速發展成為一門成熟的近代生化實驗技術。目前等電聚焦技術已可以分辨等電點（pI）只差 0.001pH 單位的生物分子。由于其分辨力高，重復性好，樣品容量大，操作簡便迅速，在
ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 實驗方法原理 雙向電泳（two-dime
等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點 實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒尿素去污劑儀器、耗材
實驗方法原理 實驗原理蛋白質分子是典型的兩性電解質分子。它在大于其等電點的 pH 環境中解離成帶負電荷的陰離子，向電場的正極泳動，在小于其等電點的 pH 環境中解離成帶正由荷的陽離子，向電場的負極泳動。這種泳動只有在等于其等電點的 pH 環境中，即蛋白質所帶的凈電荷為零時才能停止。如果在一個
蛋白等電聚焦凝膠電泳技術可應用于：(1)蛋白質的分離提純；（2）蛋白質組學研究。實驗方法原理等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，
實驗方法原理 等電聚焦凝膠電泳是依據蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離的技術，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續而穩定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪
8、載體兩性電解質pH值梯度不穩定的原因：陰極漂移是指在等電聚焦電泳中pH梯度的堿性端逐漸消失的過程。反之，如果其酸性端逐漸消失則稱為陽極漂移。為了闡明等電聚焦電泳中pH值梯度不穩定的機制，提出了各種假說：（1）載體兩性電解質向陰、陽極的等速電泳遷移。（2）在陰極因CO2的吸附而引起陰極液組分和濃度
毛細管等電聚焦電泳色譜儀（CIEF）是以載體兩性電解質為介質，根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件：載體兩性電解質是兩性分子，使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可作為載體，但兩性電解質不能用于等電聚焦。只有載體兩性電解質，即具有好的電導和緩沖
高效毛細管等電聚焦電泳色譜儀（CIEF）是以載體兩性電解質為介質，根據等電點差別分離生物大分子的高分辨率電泳技術。一、載體兩性電解質應具備的條件： 載體兩性電解質是兩性分子，使其在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性
實驗概要本實驗應用二維電泳(two-dimensional gel electrophoresis，2DE)技術對提取的2D大鼠視網膜組織蛋白進行分離，獲得了分辮率高和重復性好的2DE圖像，建立了2DE分離技術的平臺，為進一步研究莫定了基礎。實驗步驟1. 清洗器具用品：清洗所有的干膠條套件，包括膠條
蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦( Isoelect rofocusing, IEF) , 根據蛋白質的等電點不同進行分離; 第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE ) , 按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后, 可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。本實驗目的是
載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩定的、連續的、線性或非線性的pH梯度中進行分離。一、載體兩性電解質的概念：載體兩性電解質是兩性的，使它們在電泳柱中能達到一個平衡位置。載體兩性電解質可以作為載體。兩性電解質不能用于等電聚焦，只有載體兩性電解質，即
雙向電泳操作步驟 第一向凝膠 第二向凝膠 組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備 實驗方法原理
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
一、原理等電點聚焦（IEF）是在電場中分離蛋白質技術的一個重要發展，等電聚焦是在穩定的pH梯度中按等電點的不同分離兩性大分子的平衡電泳方法。在電場中充有兩性載體和抗對流介質，當加上電場后，由于兩性載體移動的結果，在兩極間逐步建立穩定的pH梯度，當蛋白質分子或其他兩性分子存在于這樣的pH梯度中時，這種
等電聚焦法 實驗方法原理 蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦( Isoelect rofoc
實驗方法原理 蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦( Isoelect rofocusing ,IEF) , 根據蛋白質的等電點不同進行分離; 第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳( SDS-PAGE ) , 按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后, 可以得到蛋白質分子的等電點
固相pH梯度等電聚焦電泳色譜儀比載體兩性電解質pH梯度等電聚焦電泳色譜儀具有更高的分辨率，更大的上樣量，其分辨率可達0.001pH，是目前分辨率zui高的電泳儀之一。一、工作原理：蛋白質分子按照自己的pI位置在固相pH梯度中遷移，達到自己的等電點時停止遷移。二、固相pH梯度的介質：固相pH梯度（IP
近年來，等電聚焦技術有了新的發展，成為一門成熟的生化實驗技術。在糧食檢測中，科研人員常會利用等電聚焦電泳槽測定小麥種子純度，具有省時省工、準確性高等特點，是一種能夠替代傳統的田間種植鑒定純度的方法。我們知道，品種純度是農作物種子質量指標中的最關鍵的一項，是對種子質量進行分級的重要指標。它包括了品種真
用蛋白質組學方法對海洋環境中過氧 化物酶體增殖污染物進行風險評估實驗實驗步驟 一、材料1.動物一 年 中 的 問 一 時 間 在 不 同 米 樣 點 潮 落 時 采 集 貽 貝 Lmk，35?45 mm 長）或者是貝殼長度為 5 cm 的 紫 貽 貝 edwfe)。其中一個采樣點是有記錄的清潔區域，
實驗步驟一、材料1.動物一 年 中 的 問 一 時 間 在 不 同 米 樣 點 潮 落 時 采 集 貽 貝 Lmk，35?45 mm 長）或者是貝殼長度為 5 cm 的 紫 貽 貝 edwfe)。其中一個采樣點是有記錄的清潔區域，在這里采集到的動物作為對照。2. 富含過氧化物酶體組分的分離在分離過程
用蛋白質組學方法對海洋環境中過氧 化物酶體增殖污染物進行風險評估實驗 實驗步驟
等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩定、連續和線性的pH梯度中進行分離。等電聚焦是在電泳介質中放入載體兩性電解質，當通以直流電時，載體兩性電解質形成一個由陽極到陰極逐步增加的pH梯度，不同的蛋白質移動到其相當的等電點位置上，聚焦于一個狹窄區帶中的過程。一、影響等電
實驗概要蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心. 雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1000個E.coli蛋白，并表明蛋白質譜不是穩定的，而是隨環境而變化. 雙向電泳原理簡明，第一向進行等電聚焦，蛋白質沿pH梯度分離，至各自的等電點；隨后，再
蛋白質組實驗流程雙向電泳的樣品的制備樣品制備原則樣品制備是雙向電泳中最關鍵的一步，將直接影響2-DE結果好壞。目前并沒有一個通用的樣品制備方法，盡管處理方法多種多樣，但都遵循幾個基本的原則：1）盡可能的提高樣品蛋白的溶解度，抽提最大量的總蛋白，減少蛋白質的損失；2）減少對蛋白質的人為修飾
蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦（Isoelectrofocusing, IEF）,根據蛋白質的等電點不同進行分離；第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后，可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。 注意事項： 1
蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦（Isoelectrofocusing, IEF）,根據蛋白質的等電點不同進行分離；第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后，可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。 注意事項： 1
蛋白質的雙向電泳的第一向為等電聚焦（Isoelectrofocusing, IEF）,根據蛋白質的等電點不同進行分離；第二向為SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），按亞基分子量大小進行分離。經過電荷和分子量兩次分離后，可以得到蛋白質分子的等電點和分子量信息。注意事項：1. 一向聚焦與二
雙向電泳IEF （sigma）IEF（not IPG）/SDS-PAGE最簡單的裝備推薦如下,適合于沒多少money做IPG又想做“熱”的所謂蛋白質組的. IEF用Biorad的圓盤電泳槽（不行用國產的吧,不推薦）,SDS-PAGE用六