支原體的掃描電鏡檢測
1、原理利用電子顯微鏡的超級放大功能，可直接觀察培養細胞中支原體污染情況。2、操怍方法①細胞傳代至貼有蓋玻片的平皿中；②培養24h取出；③PSB洗滌；④2.5%戊二醛/ PSB固定15min，PSB洗滌；⑤1%鋨酸固定30min，PSB洗滌；⑥乙酸異戊酯脫水；⑦冰點干燥；⑧噴金；⑨掃描電鏡觀察，照相綜上所述，幾種不同的方法各有特點，其應用也各有側重。①支原體培養法是最為經濟和可靠的方法，但其實驗周期較長，所以常用于進行對懷疑細胞的最后甄別。②DNA染色法較為快捷，方法簡單，但其靈敏度有一定欠缺，易造成漏檢。③PCR檢測支原體的方法最為快速、靈敏，取樣量少，既可進行細胞檢測也可進行細胞上清的檢測，同時可以檢測8種支原體的污染，是目前常用的檢測手段。但其成本較高，條件要求嚴格，有時易出現假陽性。其彌補的方法是對懷疑的樣品經過3次PCR檢測，或用培養法檢測。④電鏡法非常直觀、準確，但對使用環境要求高，操作復雜，實驗周期較長，常作為樣品......閱讀全文
支原體的掃描電鏡檢測
1、原理利用電子顯微鏡的超級放大功能，可直接觀察培養細胞中支原體污染情況。2、操怍方法①細胞傳代至貼有蓋玻片的平皿中；②培養24h取出；③PSB洗滌；④2.5%戊二醛/ PSB固定15min，PSB洗滌；⑤1%鋨酸固定30min，PSB洗滌；⑥乙酸異戊酯脫水；⑦冰點干燥；⑧噴金；⑨掃描電鏡觀察，照相
支原體的檢測
實驗材料 細胞儀器、耗材 培養瓶載物片蓋片顯微鏡實驗步驟 1. ?標本制備用尖鑷子從培養瓶中直接取出預先置入的支持物（長形蓋片；24 小時前置入），令細胞面向上，置放在載物片上，再覆以24 mmX 36 mm的較大蓋片；如不用支持物培養法，也可取少許培養液滴在載物片上，再覆以蓋片法觀察亦可。2. ?
支原體的檢測實驗
相差顯微鏡檢測法 低漲處理地衣紅染色觀察法 熒光染色法 電鏡檢測法 培養檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液指示細胞試劑、試劑盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
支原體的檢測實驗_電鏡檢測法
實驗方法原理在用一般方法難以確定時，可做電鏡檢測。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?細胞培養 48～72 小時。2. ?接近匯合前，用0.05%～0.25%胰蛋白酶消化細胞5～10 分鐘。3. ?用吸管輕輕吹打，制備成細胞懸液。
支原體的檢測實驗_培養檢測法
實驗方法原理這是用支原體培養基方法進行檢測，培養法稍顯繁鎖，但比較精確。實驗材料肉湯血清試劑、試劑盒細胞懸液儀器、耗材培養基實驗步驟1. ?肉湯制備用支原體肉湯（Sigma 產）和北京生物制品所制兩種均可；用前加10%馬血清；2. ?培養每45 ml肉湯培養基加2.5×106?/ml細胞懸液5 ml
支原體污染及檢測
（1）支原體污染在細胞培養中最常見、不易被查覺，但支原體污染可顯著影響細胞功能干擾實驗結果。支原體是介于細菌和病毒之間的目前所知能獨立生活的最小微生物，它無細胞壁，形態呈高度多形性，最小直徑0.2um，可通過濾器。?目前通過對國內100余株/系細胞的檢測，形勢不容樂觀。污染率達30%?~?60%?。
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設
培養法檢測支原體
培養法最為可靠且成本低廉，但培養周期較長。常用于細胞以及I臨床治療細胞的支原體檢查。1、所需儀器設備及培養基（1）儀器設備：培養箱，顯微鏡。（2）培養基①支原體肉湯培養基。②精氨酸肉湯培養基。③支原體瓊脂培養基。2、檢查方法（1）樣品的貯存：樣品如在24h以內進行支原體檢測，則可貯存在2—8℃；如果
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀
PCR法檢測支原體
實驗方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴增延伸。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒dNTPTapDNA聚合酶瓊脂糖礦物油支原體檢測試劑盒儀器、耗材超凈工作臺PCR儀電泳儀凝膠成像分析系統臺式離心機旋渦混懸器實驗步驟1.
支原體常用檢測方法
支原體這種微小的微生物(直徑0.2-0.8 μm)，是細胞培養中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者，會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺，因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。 污染實驗室培養細胞的支原體
細胞支原體污染的PCR檢測
支原體菌株來源：???????M.Arginini?ATCC23838?精氨酸支原體???????M.FermentaneATCC19989發酵支原體???????M.SalivariumATCC23064唾液支原體???????M.HominisATCC23114人型支原體???????M.Ora
細胞支原體污染的PCR檢測
支原體菌株來源：M.Arginini ATCC23838 精氨酸支原體M.FermentaneATCC19989 發酵支原體M.SalivariumATCC23064唾液支原體M.HominisATCC23114人型支原體M.OraleATCC23714口腔支原體M.HyorhinisATCC290
肺炎支原體lgM檢測
實驗方法原理肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體。患者的血清樣品分別加入兩個測試孔內，當樣品沿膜擴散時，分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物，5分鐘后觀察結果。質控孔為質量控制，固定有人lgM，測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結果為藍色，陰性結果為無色。實
肺炎支原體lgM檢測
【原理】?肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體。患者的血清樣品分別加入兩個測試孔內，當樣品沿膜擴散時，分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復合物、3滴洗液和2滴底物，5分鐘后觀察結果。質控孔為質量控制，固定有人lgM，測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應結果為藍色，陰性結果為無色。【材
支原體檢測的臨床意義
檢查人體否受到支原體的感染是為臨床診斷與治療支原體感染患者提供依據的一種檢查方法。診斷支原體感染必需經過實驗室檢查，不能僅僅根據癥狀就作出診斷。 陽性，見于支原體感染。肺炎支原體是呼吸道感染、肺炎的主要原因。解脲支原體、人型支原體則引起泌尿生殖道感染。
細胞支原體污染的熒光檢測方法
DNA熒光染色法：1.原理：利用熒光染劑（bisbenzimide, Hoechst 33258）偵測支原體污染。此染劑會結合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich區域，因為支原體之DNA中A-T含量占多數（55～80%），所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經染
應對破壞細胞的支原體~qPCR支原體檢測試劑來幫你
織細胞培養工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環境污染；嚴格實驗操作；細胞培養基和器材要保證無菌；在細胞培養基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。德國MB公司qPCR支原體檢測試，該
細胞如何檢測是否支原體污染？
我的細胞，居然背著我養“小三”！那“小三”，名叫??支?·?原?·?體?!!!因為這“小三”，我的細胞表現都變了！瞞我這么久，原來這些日子都是假的！就讓BI帶您來了解這位不速之客吧！全球實驗室狀況支原體流行中▲?全球平均有約15~35%細胞實驗室發生支原體污染（65~80%嚴重污染），超過一半實驗室
ELISA法檢測肺炎支原體
ELISA法檢測肺炎支原體 肺炎支原體可引起支原體肺炎，曾被稱為“非典型肺炎”。支原體肺炎通常起病緩慢，病情嚴重，體征輕微，肺炎常為間質性。此外，肺炎支原體與人腦組織有共同抗原，故亦可引起中樞神經系統癥狀。臨床上一般通過檢查肺炎支原體抗體IgG、IgM診斷支原體肺炎。 (一)肺炎支原體抗體I
細胞培養中支原體污染的檢測
細胞培養中最令人頭疼的問題之一是微生物的污染，而支原體的污染更給人一種看不見摸不著的感覺。長期以來，這個問題一直令細胞培養工作者困惑。在人們日常生活的工作環境中，支原體可以說無處不在，它可以通過人的毛發、口腔、穿著的衣服、動物的皮毛以及日常的細胞培養的操作環境造成對細胞污染。國內外研究表明造成細胞培
支原體的檢測實驗_熒光染色法
實驗方法原理熒光顯微鏡檢查法，熒光染料用 Hoechst 33258，它是一種能與DNA 特異結合的熒光染料。支原體內含有DNA，能著色，是現有檢測法中最方便和最有效的一種。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks醋酸甲醇蒸餾水儀器、耗材蓋片顯微鏡實驗步驟1. ?標本蓋片培養細胞匯合前從瓶中取出（如細胞已
支原體污染細胞培養的檢測方法
由于支原體種類不同，應采取不同的方法進行檢測，常用的方法有如下幾種。1、觀察細胞的形態和生長特征支原體污染比較嚴重時可出現生長減慢，有的培養基pH明顯變酸，并出現細胞病變，其病變特征與病毒感染相似，因此不能準確診斷。2、分離培養法大多數支原體可出現特有的典型菌落。該方法準確、可靠，但時間長，敏感性不
美國藥典中的支原體檢測
支原體是一類沒有細胞壁，能夠自我復制的，可以通過過濾器并能夠通過人工培養增殖的原核微生物，其不能進行革蘭氏染色，但染色時會留下菌落的印記。支原體是寄生蟲和共生體，有些可能對多種動植物宿主致病。在人類中，支原體通常是表面寄生蟲定植于呼吸道和泌尿道的上皮內壁，感染可能會持續很長時間，而不會引起明顯的細胞
支原體的檢測實驗_相差顯微鏡檢測法
實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶載物片蓋片顯微鏡實驗步驟1. ?標本制備用尖鑷子從培養瓶中直接取出預先置入的支持物（長形蓋片；24 小時前置入），令細胞面向上，置放在載物片上，再覆以24 mmX 36 mm的較大蓋片；如不用支持物培養法，也可取少許培養液滴在載物片上，再覆以蓋片法觀察亦可。2. ?觀察相
熒光顯微鏡檢測支原體
實驗方法原理 檢測支原體有兩種不同的策略：第一種方法將在下述方案中述及，利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍（在細胞表面或胞質中）的特殊物質進行染色，可顯示支原體污染；第二種方法是利用 DNA 探針識別細胞提取物中的 DNA 支原體特異序列，進行支
熒光顯微鏡檢測支原體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 檢測支原體有兩種不同的策略：第一種方法將在下述方案中述及，利用對 DNA 染色的熒光染料 Hoechst 33258, 它對細胞核周圍（在細胞表面或胞質中）的特殊物質進行染色，可顯示支原體污染；第二種方法是利用 DNA 探針
肺炎支原體各種檢測方法PK
肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）是一類無細胞壁，存在DNA和RNA，是引起人類呼吸道感染的一種主要病原體,主要通過飛沫傳播。肺炎支原體易感染兒童和青少年，5~15歲發病率最高。3歲以下兒童以上呼吸道感染多見，成人以肺炎表現為主。發病初期有咽痛、頭痛、發熱、