血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳(agarosegelelectrophoresis)(一)
【原理】瓊脂糖(agarose)是經過挑選,以質地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質,這種性質會給電泳及凝膠過濾以不良的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。血清中脂類物質與血清載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑(或油紅等)進行預染。再將預染過的血清......閱讀全文
血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)(一)
【原理】瓊脂糖(agarose)是經過挑選,以質地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質,這種性質會給電泳及凝膠過濾以不良的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列
血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)(二)
【操作】1、預染血清血清0.2ml中加蘇丹黑染色液0.2ml,混合置37℃水浴中染色30分鐘,離心(2000轉/分)約5分鐘。以除去懸浮于血清中染料沉渣。2、制備瓊脂糖凝膠板將已配制好的0.5%瓊脂糖凝膠于沸水浴中加熱融化,用吸管吸取凝膠溶液澆注在載玻片上,約3 ml。靜置半小時后凝固(天熱時需延長
瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)介紹
主要試劑:核酸電泳緩沖液有三種,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE與TPE緩沖容量高,DNA分離效果好,但TPE在DNA段回收時含磷酸鹽濃度高,容易使DNA沉淀.TAE緩沖容量低,但價格較便宜,因而推薦選用TBE.緩沖液中的EDTA可螯合二價陽離子
瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)檢測DNA
原理: 瓊脂糖是從海藻中提取出來的一種線狀高聚物,可作為電泳支持物,適用于分離大小范圍在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的遷移率與分子量的對數值成反比關系。觀察其遷移距離,與標準DNA片段進行對照,就可獲知該樣品分子量大小。在質粒抽提過程中,由于各種因素的影響,使質粒DNA呈現超螺旋的共
雙向瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)實驗
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術,并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題。【實驗原理】DNA 分子有線狀的,還有一些非線狀的,如復制叉和重組DNA 結構。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類:中性/中性
DNA瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)分析
一、原理瓊脂糖凝膠具有分子篩效應。在中性ppH值的電泳緩沖液體系中,DNA分子由于帶負電荷,所以在電場作用下由負極向正極泳動。由于DNA分子的大小和構型不同,在相同的時間內遷移至不同的位置。凝膠經溴化乙錠染色后,紫外檢測儀下觀察,即可看見DNA片段按大小不同呈條帶分布。由于在一定條件下,DNA的遷移
質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)
帶電荷的物質在電場中的趨向運動稱為電泳。電泳的種類多,應用非常廣泛,它已成為分子生物學技術中分離生物大分子的重要手段。瓊脂糖凝膠電泳由于其操作簡單、快速、靈敏等優點,已成為分離和鑒定核酸的常用方法。實驗目的:掌握瓊脂糖凝膠電泳的原理,學習瓊脂糖凝膠電泳的操作。實驗材料:質粒DNA、BAC、植物總DN
DNA片段的瓊脂糖凝膠電泳(agarose-gel-electrophoresis)
【原 理】瓊脂糖凝膠電泳是重組DNA研究中常用的技術,可用于分離,鑒定和純化DNA片段。不同大小、不同形狀和不同構象的DNA分子在相同的電泳條件下(如凝膠濃度、電流、電壓、緩沖液等),有不同的遷移率,所以可通過電泳使其分離。凝膠中的DNA可與熒光染料溴化乙錠(EB)結合,在紫外燈下可看到熒光條帶,籍
Agarose-Gel-Electrophoresis
實驗概要Separating nucleic acid fragments by agarose gel electrophoresis.實驗原理?Agarose ?gel electrophoresis remains the most widely used technique for ?sep
Agarose-gel-electrophoresis
General ProcedureCast a gelPlace it in gel box in running bufferLoad samplesRun the gelImage the gelCasting Gels0.7% agarose gel with 1kbp ladder in U
DNA凝膠電泳(DNA-agarose-gel-electrophoresis)
實驗原理瓊脂糖凝膠電泳是常用的用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物的方法,這種電泳方法以瓊脂凝膠作為支持物,利用DNA分子在泳動時的電荷效應和分子篩效應,達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電,在電場中向陽極移動。在一定的電場強度下,DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應,即分
Agarose-Gel-Electrophoresis-of-DNA
1) Dissolve 1 g of agarose in 100 ml of 1X TAE or TBE buffer (gives a 1% gel). See note for making LMP agarose gel.?2) Cast the gel with the comb in p
Alkaline-agarose-gel-electrophoresis
Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al., 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second st
High-Resolution-Agarose-Gel-Electrophoresis
實驗概要Agarose gel ?electrophoresis remains the most widely used technique for separating ?nucleic acid fragments due to its ease of use, non-toxicity, a
Denaturing-Agarose-Gel-Electrophoresis-of-RNA
The overall quality of an RNA preparation may be assessed by electrophoresis on a denaturing agarose gel; this will also give some information about R
QUALITATIVE-ANALYSIS-OF-DNA-FRAGMENTATION-BY-AGAROSE-GEL-ELECTROPHORESIS
1. IntroductionNuclear morphology changes characteristic of apoptosis appear within the cell together with a distinctive biochemical event: the endonu
RNA-analysis-on-nondenaturing-agarose-gel-electrophoresis
實驗概要RNA analysis on non-denaturing agarose gel electrophoresis實驗步驟1. The following gel electrophoresis conditions are recommended:- use 1X TAE buffer
RNA-analysis-on-nondenaturing-agarose-gel-electrophoresis
1. The following gel electrophoresis conditions are recommended:- use 1X TAE buffer instead of 1X TBE- use agarose gel in the concentration of 1.1%-1.
QUALITATIVE-ANALYSIS-OF-DNA-FRAGMENTATION-BY-AGAROSE-GEL-ELECTROPHORESIS2
3. Commentary????3.1. Background informationApoptosis is an innate mechanism of eukariotic cell suicide which plays a major role in many physiological
甲醛洋菜膠體電泳(formaldehydeagarose-gel-electrophoresis)
甲醛洋菜膠體電泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一種常用的RNA 變性劑。在進行甲醛洋菜膠體電泳分析時,必須先配制含有甲醛的洋菜膠體,RNA 也必須先以甲醛及formamide 進行變性處理,以確保其二度結構充分被打開。由于甲醛可能
DNA的凝膠電泳(gel-electrophoresis)
一、原理瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠是分離和純化DNA片段的標準方法。聚丙烯酰胺凝膠電泳適用于分離小分子的核酸;瓊脂糖凝膠孔徑較大,被應用于大分子核酸的分離和純化。在一定濃度的瓊脂糖凝膠介質中,DNA分子的電泳遷移率與其分子量的常用對數成反比。當用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶(EB)染色,在紫外光下至少可
凝膠電泳(gel-electrophoresis)操作注意事項
1.緩沖系統:在沒有離子存在時,電導率最小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強度的緩沖液中,電導很高并產熱,可能導致DNA變性,因此應注意緩沖液的使用是否正確。長時間高壓電泳時,常更新緩沖液或在兩槽間進行緩沖液的循環是可取的。2.瓊脂糖:不同廠家、不同批號的瓊脂糖,其雜質含量不同,影響DNA的遷移
凝膠電泳(gel-electrophoresis)常見問題分析
瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA時,跑出的帶后面出現拖尾現象,什么原因造成的?參考見解: DNA帶模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上樣量過多??減少凝膠中DNA上樣量。3、 所用電泳條件不合適??電泳時電壓不應超過20V/cm,溫度<30℃,巨大DNA鏈,溫度應<15℃,核查所用電泳緩
DNA酶切及凝膠電泳(gel-electrophoresis)
材料、設備及試劑 一、 材料 λDNA: 購買或自行提取純化; 重組T-vector質料或pUC19質粒; EcoRI酶及其酶切緩沖液: 購買成品; HindⅢ酶及其酶切緩沖液: 購買成品;瓊脂糖(Agarose): 進口或國產的電泳用瓊脂糖均可。 二、 設備 水平式電泳裝置,電泳儀,臺式高
凝膠電泳(gel-electrophoresis)的注意事項
影響電泳分離的主要因素:待分離生物大分子的性質:待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質都會對電泳有明顯影響。一般來說,子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形,則其電泳遷移速度越快。2. 緩沖液的性質:緩沖液的pH值會影響待分離生物大分子的解離程度,從而對其帶電性質產生影響,溶液pH值距離
RNA-gel-electrophoresis
實驗概要RNA gel electrophoresis主要試劑DEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide sol
Gel-Electrophoresis-of-DNA
What is Electrophoresis?Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we
RNA-gel-electrophoresis
MaterialsDEPC H2ODEPC 0.1% (v/v)q.s. de-ioinized H2O37oC x1 hr, or r.t. overnightAutoclave.(NaOAc, EDTA and ethidium bromide solutions should also be
Standard-neutral-agarose-electrophoresis
Standard neutral agarose electrophoresisStandard agarose gels can be prepared using either TBE or TAE running buffers.You will need:Either 10 x TBE or
ELECTROPHORESIS-OF-DNA-IN-AGAROSE-GELS
ELECTROPHORESIS OF DNA IN AGAROSE GELSA). AGAROSE CONCENTRATIONS:???????Use 0.8% agarose (w/v) for high molecular weight DNA fragments, and 1 - 1.2% f