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主要試劑：核酸電泳緩沖液有三種，即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE與TPE緩沖容量高，DNA分離效果好，但TPE在DNA段回收時含磷酸鹽濃度高，容易使DNA沉淀.TAE緩沖容量低，但價格較便宜，因而推薦選用TBE.緩沖液中的EDTA可螯合二價陽離子，從而抑制DNA酶的活性，防止PCR擴增產物降解。核酸分離一般用連續緩沖體系，常用的有：1) TBE：0.08mol/l Tris·HCl，pH8.5，0.08mol/L硼酸，0.0024mol/l EDTA2) THE：0.04mol/l Tris·HCl。pH7.8，0.2mol/L醋酸鈉，0.0018mol/l EDTA主要實驗步驟：1、 用蒸餾水將電泳槽和梳子沖洗干凈.放在水平桌面上，并架好梳子。2、 取5×TBE緩沖液20ml加水至200ml,配制成0.5×TBE稀釋緩沖液,待用。3、 膠液的制備：稱取0.4g瓊脂糖,置于2......閱讀全文
瓊脂糖凝膠電泳色譜儀是以瓊脂糖凝膠作為載體的電泳技術，廣泛用于核酸研究，為DNA分子及其片段的分子量測定和DNA分子構象分析提供了重要手段。一、工作原理：瓊脂糖凝膠電泳中，DNA分子的遷移率與其分子量的常用對數成反比。DNA分子構象對遷移率也有影響，遷移率為共價閉環DNA＞直線DNA＞開環雙鏈DNA
分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術 分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
一、瓊脂糖凝膠的瓊脂糖凝膠的制備特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較
分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術分子生物學試驗方法探討二－瓊脂糖凝膠電泳技術、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧
瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的，是由D-半乳糖和3、6-脫水-L-半乳糖結合的鏈狀多糖，含硫酸根比瓊脂少，因而分離效果明顯提高。瓊脂糖電泳具有以下優點：①瓊脂糖含液體量大，可達98％～99％，近似自由電泳，但樣品的擴散度比自由電泳小，對蛋白質的吸附極微；⑦瓊脂糖作為支持體有分辨率高、重復性好等優點；③電
聚丙烯酰胺凝膠電泳，普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大適用于分離同工酶及其亞型，大分子核酸等應用較廣。瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA度大小范圍較廣，不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和
瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種以瓊脂糖凝膠為支持物的凝膠電泳，其分析原理與其它支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，直接參與帶電顆粒的分離過程，在電泳中，物質分子通過空隙時會受到阻力，大分子物質在泳動時受到的阻力比小分子大，因此在凝膠電泳中，帶電
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫
一、瓊脂糖凝膠的特點天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，在電場作用下能產生較強的電滲現象，加之硫酸根可與
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。 電泳技術的
【概述】帶電顆粒在電場作用下，向著與其電性相反的電極移動，稱為電泳(electrophoresis, EP)。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。 1807年，由俄國莫斯科大學的斐迪南·弗雷德里克·羅伊斯（Ferdinand Frederic Reuss）最早發現。
一、瓊脂糖凝膠的特點 天然瓊脂（agar）是一種多聚糖，主要由瓊脂糖（agarose，約占80％）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質，不帶電荷，而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖，由于這些基團帶有電荷，
（一）醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小，幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象，又因為膜的親水性比較小，它所容納的緩沖液也少，電泳時電流的大部分由樣 品傳導，所以分離速度快，電泳時間短，樣品
酶切基礎知識DNA酶切一般分為質粒直接酶切和PCR產物酶切第一節 DNA酶切及凝膠電泳 一.DNA的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術，并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題。【實驗原理】DNA 分子有線狀的，還有一些非線狀的，如復制叉和重組DNA 結構。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的。雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/中性
提 要: 目的 建立一種快速鑒定RNA 完整性的方法。方法 在常規瓊脂糖凝膠電泳的基礎上,結合甲醛變性瓊脂糖凝膠電泳加以改進而成。結果 提取的總RNA 用此方法電泳后可得到28S、18S、5. 8S(5S) 三條清晰的rRNA 條帶。結論 此方法可以達到對RNA 完整性進行快速鑒定的目的。
【實驗目的】了解和掌握雙向電泳技術,并學習用它來研究與DNA 復制相關的問題.【實驗原理】DNA 分子有線狀的,還有一些非線狀的,如復制叉和重組DNA 結構.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術就是被人們開發用以研究一些非線狀DNA 分子的.雙向瓊脂糖凝膠電泳技術(2-D gel)實際上可分為兩類：中性/
本實驗采取堿裂解法的方法來提取質粒 ，之后經瓊脂糖凝膠電泳來檢測DNA。質粒DNA 的提取與鑒定(一)堿裂解法提取質粒[實驗原理]堿裂解法提取質粒是根據共價閉合環狀質粒DNA與線性染色體DNA在拓撲學上的差異來分離它們。在pH值介于12.0~12.5這個狹窄的范圍內,線性的DNA雙螺旋結構解開而被變
電泳技術原理（以瓊脂糖凝膠電泳為例） 1、首先介紹使用的載體--瓊脂糖。 瓊脂糖是線性的多聚物，基本結構是1,3連結的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳（electrophoresis）。蛋白質為兩性電解質，在不同pH溶液中帶不同的電荷，從而在直流電場中能夠泳動，這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術，并成功地將血清
分散介質中的帶電粒子在直流電場的作用下，向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳（electrophoresis）。蛋白質為兩性電解質，在不同pH溶液中帶不同的電荷，從而在直流電場中能夠泳動，這就是蛋白質的電泳現象。1937年瑞典化學家Tiselius首先建立了蛋白質的界面電泳技術，并成功地將血清蛋
一. DNA的限制性內切酶酶切分析限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP的存在。Ⅰ類酶結合于識別位點并隨機的切割識別位點不遠處的DNA,而Ⅲ類酶
實驗目的學習水平式瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的純度、構型、含量和分子量大小。實驗原理閉合環狀質粒、線性質粒和開環質粒DNA由于構形不同，在加溴化乙錠的瓊脂糖凝膠電泳上呈現不同的遷移率，因而在紫外燈下觀察，能區別閉合環狀質粒 DNA（cccDNA）、線性質粒DNA（L-DNA）和開環質粒DNA（ocDN
實驗概要本實驗介紹了血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳的原理及操作步驟等。實驗原理瓊脂糖（agarose）是經過挑選，以質地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖，它具有離子交換性質，這種性質會給電泳及凝膠過濾以不良的影響。瓊脂糖是直
學習水平式瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的純度、構型、含量和分子量大小。實驗原理：閉合環狀質粒、線性質粒和開環質粒DNA由于構形不同，在加溴化乙錠的瓊脂糖凝膠電泳上呈現不同的遷移率，因而在紫外燈下觀察，能區別閉合環狀質粒DNA（cccDNA）、線性質粒DNA（L-DNA）和開環質粒DNA（ocDNA）。實
瓊脂糖（agarose）是經過挑選，以質地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖，它具有離子交換性質，這種性質會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖，它由D－半乳糖和3,6－脫水－L－半乳糖的殘基交替排列組成。
【原理】瓊脂糖（agarose）是經過挑選，以質地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖，它具有離子交換性質，這種性質會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖，它由D－半乳糖和3,6－脫水－L－半乳糖的殘基交替排列組成