RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的原因主要有兩個方面，一方面， RNAi 可以說是基因功能檢驗的試金石，利用 RNAi 技術可以縮短人類對人類基因功能的了解和認識的時間，在不久的將來有望將人類大部分基因的功能和作用全部弄清楚；另一方面，科研人員有望利用這種技術獲得使致病基因失活的新型基因藥物，而基因藥物一直是生物技術界追捧的對象。 2002年，《自然》及《科學》兩本重量級學術期刊把 RNA干擾技術視為生命科學領域重大突破，認為足以比肩 20 世紀早期發現抗生素，開啟了基因治療的另一個方向。 2006年10月，2006年度諾貝爾醫學獎被授予美國斯坦福醫學院病......閱讀全文
RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的
RNAi的機理與應用（一）
關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。RNAi 受到追捧的原因主要有兩個方面，一方面， RNAi 可以說是基
RNAi的機理與應用（二）
首先，外源的或體內產生的長雙鏈 RNA(long double stranded RNA, dsRNA) 首先被 Dicer 酶降解為長 21 ～ 23bp （堿基對）長度的小分子雙鏈 RNA （稱為小干擾核酸， small interfering RNA, siRNA), 這是一個依賴 A
RNAi技術的應用
5 RNAi技術的應用5.1 功能基因組和遺傳學應用隨著各種模式生物和人類基因組測序的完成，基因功能的研究遠遠落后于大量序列所提供的信息，研究和發現基因功能成為越來越緊迫的任務。長期以來，破壞基因結構或抑制基因表達是研究基因功能的重要方法，如常用的基因敲除技術( gene knock out) 。基
RNAi技術的應用特點
由于使用RNAi技術可以特異性剔除或關閉特定基因的表達，（長度超過三十的dsRNA會引起干擾素毒性）所以該技術已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療領域。
RNAi作用機理及藥物研發進展（一）
RNAi歷史?RNAi現象早在1993年就有報道：將產生紫色素的基因轉入開紫花的矮牽牛中，希望得到紫色更深的花，可是事與愿違，非但沒有加深紫色，反而成了白色。當時認為這是矮牽牛本來有的紫色素基因和轉入的外來紫色素基因都失去了功能，稱這種現象是“共抑制”。1995年，康奈爾大學的Su Guo博士用
RNAi作用機理及藥物研發進展（二）
注：有些網站暫時打不開?事實上，很多制藥公司在RNAi上投入了大量的資源，以 siRNA 作為治療手段的前景誘人，siRNA 從發現到現在短短幾年的時間內，第一個 RNAi 藥物 Bevasiranib （ Acuity 公司）已經誕生 , 用于治療濕性老年性黃斑變性 (AMD) 。?據報道
RNAi的實驗原理與方法
近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（RNAi）。一、RNA
RNAi實驗原理與方法
實驗概要進行RNAi實驗實驗原理通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation ?and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small ?interfering RNAs, siRNAs
RNAi實驗原理與方法
RNAi實驗原理與方法近年來的研究表明，將與mRNA對應的正義RNA和反義RNA組成的雙鏈RNA(dsRNA)導入細胞，可以使mRNA發生特異性的降解，導致其相應的基因沉默。這種轉錄后基因沉默機制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被稱為RNA干擾（
RNAi實驗原理與方法（一）
通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱為Dic
RNAi實驗原理與方法（二）
3.用RNase III 消化長片斷雙鏈RNA制備siRNA其他制備siRNA的方法的缺陷是需要設計和檢驗多個siRNA序列以便找到一個有效的siRNA。而用這種方法——制備一份混合有各種siRNAs “混合雞尾酒” 就可以避免這個缺陷。選擇通常是200—1000堿基的靶mRNA模版，用體外轉錄
RNAi在細胞培養中的應用
The protocols listed here are for Drosophila cells in 6 well plates and our pre-aliquoted 384 well plates. RNAi experiments may be done in other size
Dharmacon文庫在RNAi文庫篩選的應用
1.什么是文庫？――大幅提高研究效率的利器以往的實驗室研究中，無論是尋找新基因的功能、探索已知基因致病的機制、解析復雜信號通路網絡、探索疾病發生發展的機制，藥物敏感性測試或者是尋找藥物開發的新靶點，科研工作者們往往是圍繞著潛在的單個目標基因進行改造，包括針對該基因的過表達、沉默、敲除、激活、修飾、突
RNAi在植物學中的應用
Napoli等將1個查爾酮合成酶基因（chs）置于1個強啟動子后導人矮牽牛（Petunia hybrida），試圖加深花朵的紫顏色。結果部分花的顏色并非期待中的深紫色，而是形成了花斑狀甚至白色，而且這種性狀可以遺傳。因為導入的基因和其同源的內源基因同時都被抑制，他們將這種現象命名為共抑制（co-su
《Nature》子刊：RNAi療法新應用
這項研究由麻省大學醫學院Anastasia Khvorova和Melissa Moore博士以及貝斯以色列女執事醫學中心和哈佛醫學院的Ananath Karumanchi醫學博士領導，提示RNA干擾療法可能是治療先兆子癇的一種潛在策略。Ananath KarumanchiMelissa Moor
RNAi實驗原理與制備方法（二）
3.用RNase III 消化長片斷雙鏈RNA制備siRNA其他制備siRNA的方法的缺陷是需要設計和檢驗多個siRNA序列以便找到一個有效的siRNA。而用這種方法——制備一份混合有各種siRNAs “混合雞尾酒” 就可以避免這個缺陷。選擇通常是200—1000堿基的靶mRNA模版，用體外轉錄
RNAi實驗原理與方法選擇（二）
盡管有些公司推出了shRNA和siRNA試劑盒，但這些試劑盒大都突出操作簡單，畢竟涉及RNA操作，用戶自己難免會產生很多預料不到的困難，晶賽公司可以完全為您解決后顧之憂，您可以直接拿到有效的siRNA或shRNA序列。?3． Dicer酶法生產siRNA優點：可以跳過篩選與檢測有效siRNA序列的步
RNAi實驗原理與制備方法（一）
實驗原理通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證據表明；一個稱
RNAi實驗原理與方法選擇（一）
一、RNAi的分子機制通過生化和遺傳學研究表明，RNA干擾包括起始階段和效應階段(inititation and effector steps)。在起始階段，加入的小分子RNA被切割為21-23核苷酸長的小分子干擾RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。證
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在整形外科領域的應用前景
已證實N-Ras或BRAF的激活型突變是引發黑素瘤的主要病因，其中66%的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80%的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變為腺嘌呤造成第599位的纈氨酸突變為谷氨酸所致。使用RNAi技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在整形外科領域的應用前景
已證實N-Ras或BRAF的激活型突變是引發黑素瘤的主要病因，其中66%的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80%的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變為腺嘌呤造成第599位的纈氨酸突變為谷氨酸所致。使用RNAi技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，
RNAi在整形外科領域的應用前景
已證實N-Ras或BRAF的激活型突變是引發黑素瘤的主要病因，其中66%的病例為BRAF激酶作用域突變。而約80%的BRAF突變病例是因胸腺嘧啶突變為腺嘌呤造成第599位的纈氨酸突變為谷氨酸所致。使用RNAi技術剔除黑素瘤細胞的BRAF表達，不僅抑制了腫瘤細胞生長，而且減弱了其侵襲能力，為黑素瘤基因
RNAi在探索基因功能中的應用
人類基因組計劃的完成標志著后基因組時代的來臨。闡明人類基因組中功能基因表達產物的生物學作用對醫學發展有著深遠意義。在RNAi技術出現以前，基因敲除（gene knockout）是主要的反向遺傳學（reverse genetics）研究手段，但其技術難度較高、操作復雜、周期長。由于RNAi技術可以利用
RNAi在基因治療領域中的應用
RNAi作為一種高效的序列特異性基因剔除技術在傳染性疾病和惡性腫瘤基因治療領域發展極為迅速。在利用RNAi技術對HⅣ-1、乙型肝炎、丙型肝炎等進行基因治療研究中發現，選擇病毒基因組中與人類基因組無同源性的序列作為抑制序列可在抑制病毒復制的同時避免對正常組織的毒副作用。同時將抑制序列選擇在特定的位點，