上皮細胞的培養
上皮細胞培養 1）表皮細胞培養 1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。 2．EDTA處理：先置入0.02％EDTA中室溫置5分鐘。 3．冷消化：換入0.25％胰蛋白酶中，置4℃過夜。 4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。 5．溫消化：取出表皮單獨處理，用剪刀剪成更小的塊后，置入新的0.25％胰蛋白酶中，37℃再消化30～60分鐘。 6．用吸管輕輕反復吹打，使成細胞懸液。 7．培養液：通過80目不銹鋼紗網濾過后，低速離心，吸上清，直接加入Eagle液和20％小牛血清，制成細胞懸液，接種入碟皿中，CO溫箱培養。2 2） 乳腺組織培養 直接培養法：（適于培養含纖維少的軟組織） 1．在含有少量培養液或Hanks液的容器中，用鋒利刀片將組織反復切......閱讀全文
上皮細胞的培養
上皮細胞培養?1）表皮細胞培養?1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。?2．EDTA處理：先置入0.02％EDTA中室溫置5分鐘。?3．冷消化：換入0.25％胰蛋白酶中，置4℃過夜。?4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層
上皮細胞類培養實驗_胃上皮細胞培養實驗
實驗方法原理胃癌為我國高發癌癥之一，培養正常人胃上皮細胞對研究胃癌癌變機理有很大應用價值。近年來培養人的腎臟上皮、氣管上皮、前列腺上皮等都有報道，但培養人胃上皮細胞少見成功。近年我研究室通過培養90例正常胃上皮細胞初代培養獲得成功，并建成轉化細胞系（Ges-1）。培養人正常胃上皮細胞獲得成功主要在于
上皮細胞的培養方法
上皮細胞的培養方法上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的
上皮細胞的培養方法
上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜,因此培養在有
上皮細胞培養
1）表皮細胞培養 1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1平方厘米小塊。 2．EDTA處理：先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。 3．冷消化：換入0.25%胰蛋白酶中，置4℃過夜。 4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分
上皮細胞培養
1、取材：外科植皮或手術殘余皮膚小塊，早產流產兒皮膚更好，取角化層薄者，切成0.5－1平方厘米小塊。2、置0.02%EDTA中，室溫，5分鐘。3、換入0.25%胰蛋白酶中，4℃過夜。4、分離：取出皮塊，用血管鉗或鑷子將表皮與真皮層分開。5、取出表皮，剪成更小的塊后，置0.25%胰酶中，37℃，30—
純上皮細胞的培養方法
?? 因此培養在有膠原的底物上可能利于生長，另外人或小鼠表皮在以3T3細胞為飼養層（用射線照射后）時，細胞易生長并可發生一定程度的分化現象。降低PH、Ca2 含量和溫度，向培養基中加入表皮生長因子，均有利于表皮細胞生長。以表皮細胞為例，用皮膚表皮和分離培養法可獲得純上皮細胞，方法如下：1、 取材：外
動物胸腺上皮細胞的培養
正常動物胸腺上皮細胞的培養 實驗材料： 1. 胸腺上皮細胞來源；一般取材小鼠或手術切取的兒童之胸腺； 2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2； 3. 有血清培養液：可使用RPMI1640培養液，添加10%
動物胸腺上皮細胞的培養
實驗材料：1. 胸腺上皮細胞來源；一般取材小鼠或手術切取的兒童之胸腺；2. 不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.2；3. 有血清培養液：可使用RPMI1640培養液，添加10%胎牛血清、谷氨酰胺2mmol/L、丙酮酸鈉1mmol/L、非必
上皮細胞類培養實驗
表皮細胞培養實驗 乳腺組織培養實驗 胃上皮細胞培養實驗 肝細胞培養實驗 內皮細胞培養實驗 毛細血管內皮細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
乳腺上皮細胞培養
實驗方法原理 在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒 RPMI 1640胎牛血清人血清胰島素氫化可的松霍亂毒素胰蛋白酶液儀器、耗材 培養瓶 離心管實驗步驟 材料無菌1. 生長培養液：RPMI 16402
上皮細胞類培養實驗
實驗方法原理 利于皮膚表皮細胞培養成功的因素有，在有膠原的底物上易生長；另有人發現把人或小鼠表皮細胞培養在以3T3 細胞為飼養層（用射線照射后）上時，細胞易生長并可發生一定程度的分化現象。降低pH、Ca2+的含量和溫度等，均利于表皮細胞生長。向培養基中加氫化可的松（ 10 μg/ml ）
角膜上皮細胞培養
實驗方法原理 將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養皿擴增培養。試劑、試劑盒 D-PBSA無血清角質形成細胞培養液 胰蛋白酶 EDTA Biocoat6孔培養板實驗步驟 一、材料?滅菌無血清角質形成細胞培養液（keratinocyteserum-freemedium
乳腺上皮細胞培養實驗
實驗方法原理在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒RPMI 1640胎牛血清人血清胰島素氫化可的松霍亂毒素胰蛋白酶液儀器、耗材培養瓶離心管實驗步驟材料無菌1. 生長培養液：RPMI 16402. 胎牛血
各類上皮細胞培養1
上皮細胞培養?1）表皮細胞培養?1．取材：取外科植皮或手術殘余皮膚小塊，以角化層薄者為佳，早產流產兒皮膚更好，切成0.5～1?平方厘米小塊。?2．EDTA?處理：先置入0.02％EDTA?中室溫置5?分鐘。?3．冷消化：換入0.25％胰蛋白酶中，置4℃過夜。?4．分離：取出皮膚，用血管鉗或鑷子把表皮
各類上皮細胞培養2
6）毛細血管內皮細胞培養?腫瘤條件培養基制備：?1．取C3H?小鼠的S-180?實體肉瘤組織。?2．胰蛋白酶消化，Dulbecco?改良Eagle?氏培養液15ml（含10％小牛血清），接種到T-75?Falcon?產培養瓶中培養。?3．在細胞生長接近完全匯合時，收集培養液制成條件培養基；再用含10
乳腺上皮細胞培養實驗
實驗方法原理在內源性巨噬細胞存在的條件下，將經離心得到的哺乳早期的乳汁上皮細胞放入營養豐富的培養液中培養，并可用混合性蛋白酶螯合液傳代。試劑、試劑盒RPMI 1640 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?胎
角膜上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將角膜組織置于膠原蛋白上，使其附著。然后，在涂有纖連蛋白和膠原蛋白的培養皿擴增培養。試劑、試劑盒D-PBSA無血清角質形成細胞培養液胰蛋白酶EDTABiocoat6孔培養板實驗步驟一、材料?滅菌無血清角質形成細胞培養液（keratinocyteserum-freemedium，KGM;C
牛角質上皮細胞的分離和培養
1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇簡單處理一下。2）用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織（最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3）將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面，讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液（MEM, 含 10%FCS，
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇簡單處理一下。2）用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織（最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3）將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面，讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液（MEM, 含 10%
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 用 1％ 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼，水漂洗，再用 70% 乙醇簡單處理一下。2）用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織（最好選取枝狀
上皮細胞類培養實驗_乳腺組織培養實驗
實驗方法原理乳腺主要由腺上皮組成，培養成功時可獲純上皮細胞培養物。乳腺材料易于獲得，既可培養正常乳腺，也可利用乳腺癌組織。乳腺組織不難培養，是很好的培養和研究對象。實驗材料乳腺試劑、試劑盒Hanks培養液儀器、耗材吸管紗布實驗步驟一、取材培養正常乳腺可從乳腺切除組織或乳腺成形術組織取材。預先把無菌容
上皮細胞類培養實驗_肝細胞培養實驗
實驗方法原理肝實質由大量肝細胞和少量間質組成，人胎兒、成人和動物的肝臟皆可用于培養；肝臟具有取材方便和易于生長的優點，能獲得典型上皮細胞培養。肝細胞形態規整，有多種功能并具有代謝活化致癌物的能力，適用做多種研究；我國已建有多個人肝癌細胞系。實驗材料肝臟試劑、試劑盒BSS消化液胰蛋白酶膠原酶儀器、耗材
原代腎上皮細胞培養實驗
實驗方法原理將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，將細胞接種于塑料培養器皿。實驗材料腎組織片試劑、試劑盒DME
原代腎上皮細胞培養實驗
原代腎上皮細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。
胰腺上皮細胞分離及培養實驗
實驗方法原理從豚鼠胰腺組織分離細胞，用紗布或尼龍網過濾細胞懸液，將過濾的細胞懸液輕輕加于 BSA 液上面。通過 3 次連續離心和混懸細胞，使呈團狀的細胞分散。然后，將細胞接種于涂有膠原蛋白的培養器皿。試劑、試劑盒F12K 組織培養液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白
原代腎上皮細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將自皮質切除的組織快切成碎塊，沖洗后放入膠原蛋白酶和胰蛋白酶混合液，搖晃消化。定時用吸管研磨組織塊，然后收集分離的細胞。用一定孔徑大小的濾網過濾細胞懸液，除去未消化的組織塊。然后，洗細胞，清除消化酶。用添加血清的培養液混懸細胞，
原代肺泡上皮細胞的體外分離培養
1、完全無血液殘留肺臟組織：2、消化肺組織：常用細胞消化酶：胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原酶。經支氣管將酶灌注到完整的肺中消化，或把肺組織剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分離純化細胞：原代肺泡上皮細胞的分離純化主要方法：（1）密度梯度離心法：密度梯度離心分離細胞的原理是不同細胞的沉降系數不同
上皮細胞類培養實驗_內皮細胞培養實驗
實驗方法原理內皮細胞易于從血管分離進行培養成單層細胞，對研究內皮細胞再生生、腫瘤促血管生長因子（TAF）等有很大應用價值。人內皮細胞培養可應用人臍帶臍靜脈、動物大動脈等，用灌流消化法獲取細胞最為簡便。實驗材料臍帶試劑、試劑盒膠原酶消化液PBS儀器、耗材注射器離心管培養基實驗步驟1. ?取產后的新鮮臍
人腎小管上皮細胞－4100培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mL人腎小管上皮細胞 4100。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 250px 皿