牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3)將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面,讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液(MEM, 含 10%FCS,100IU/ml 青霉素,100ug/ml 鏈霉素,2~4 mmol/L L-谷氨酰胺)于組織上,37°C 培養 2 天。5) 用無菌鑷子小心去除組織塊。展開 ......閱讀全文
牛角質上皮細胞的分離和培養
1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3)將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面,讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液(MEM, 含 10%FCS,
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀角膜邊緣組織)。3)將上述組織置于干燥的聚賴氨酸包被的表面,讓其黏附全少 10 分鐘。4) 加入培養液(MEM, 含 10%
牛角質上皮細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗滌牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇簡單處理一下。2)用 3.5 mm 活組織鉆孔器切取眼小塊上皮組織連同其下的結締組織(最好選取枝狀
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗,然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮膚剝下,用一把鑷子夾住身體,另一把鑷子拉開皮膚。4) 將
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS:?NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4?60mg/L無水Na2PO4?47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3?350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟1. 將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗試劑HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L無水Na2PO4 47.86mg/L無水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L實驗材料妊娠期BALB/c小鼠實驗步驟將1~2天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠,流水徹底
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗,然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3)
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗概要本實驗是根據Hennings等(1980)的方法改進而來的。該方案也適用于原代大鼠角質細胞的分離。主要試劑HBSS: NaCl 8g/L KCl 400mg/L KH2PO4 60mg/L 無水Na2PO4 47.86mg/L 無水葡萄糖 1000mg/L NaHCO3 350mg/L實驗
小鼠角質細胞的分離和培養
實驗步驟 1) 將 1~2 天齡新生裸鼠窒息后,置于培養皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗凈裸鼠, 流水徹底沖洗,然后用 70% 乙醇洗兩次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 將小鼠從尾巴至鼻子的皮膚作一簡單切口,用大鼠牙齒鑷輕輕將整個身體的皮
胰腺上皮細胞分離及培養實驗
實驗方法原理從豚鼠胰腺組織分離細胞,用紗布或尼龍網過濾細胞懸液,將過濾的細胞懸液輕輕加于 BSA 液上面。通過 3 次連續離心和混懸細胞,使呈團狀的細胞分散。然后,將細胞接種于涂有膠原蛋白的培養器皿。試劑、試劑盒F12K 組織培養液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成,早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊,可用離心法收集上皮細胞(混雜有巨噬細胞),培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層,可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代,并形成克隆,在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素,氫化可的松,霍亂腸毒素,EGF可促進上皮細胞生長
牛ES細胞的分離培養相關介紹
Saito等在加有LIF的培養基中對牛ICM進行培養,分離得到牛ES細胞并進行傳代。Sims等使用與一般ES細胞分離完全不同的低密度培養法,使用BRL(buffaloratliver)條件培養基并添加亞硒酸鈉、胰島素、運鐵蛋白和50mL/L胎牛血清,培養6d~10d,得到15個ES細胞系,將其作
原代肺泡上皮細胞的體外分離培養
1、完全無血液殘留肺臟組織:2、消化肺組織:常用細胞消化酶:胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原酶。經支氣管將酶灌注到完整的肺中消化,或把肺組織剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3、分離純化細胞:原代肺泡上皮細胞的分離純化主要方法:(1)密度梯度離心法:密度梯度離心分離細胞的原理是不同細胞的沉降系數不同
血管內皮細胞的分離和培養_分離牛主動脈內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Bravery 等 [ 1995 ] 的方法改寫的。實驗材料HBSS PSGA新鮮豬主動脈膠原蛋白酶HFBS試劑、試劑盒PAEC生長培養液實驗步驟1. 將鋁箔鋪在軟木板上。2. 將主動脈(新鮮豬主動脈:如條件允許,需無菌取材。放入 HBSS/PSGA 中轉運)放于 70 %
方案23.7-胰腺上皮細胞分離及培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從豚鼠胰腺組織分離細胞,用紗布或尼龍網過濾細胞懸液,將過濾的細胞懸液輕輕加于 BSA 液上面。通過 3 次連續離心和混懸細胞,使呈團狀的細胞分散。然后,將細胞接種于涂有膠原蛋白的培養器皿。
視網膜色素上皮細胞的分離培養法相關介紹
上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視。但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵。體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜, 因此培
上皮細胞的培養
上皮細胞培養?1)表皮細胞培養?1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。?2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。?3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。?4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層
牛血清的分離技術
?? 血清分離,看你的要求,對于溶血程度,是否要求無菌等等,看你那的有要求什么的;用我的經歷舉例,我們的要求是盡可能無菌或減少污染,除了超凈工作臺之類的,我所通用的;??? 一、通過自然凝固的方法:??? 1、對于血液自然分離來說,選擇呈裝的材質hao是玻璃材質,它的分離效果要比塑料的材質好;???
厭氧菌的分離和培養
1 目的1.1 了解厭氧微生物的生長特性1.2 觀察厭氧微生物(雙歧桿菌)的形態特征1.3 掌握厭氧微生物的滾管分離、培養與計數技術?2 原理目前培養厭氧微生物的簡便而又有效的技術包括有:厭氧箱培養技術;厭氧罐培養技術;厭氧袋培養技術;亨蓋特厭氧滾管技術.這里介紹的是亨蓋特厭氧滾管技術.亨蓋特厭氧滾
上皮細胞類培養實驗_胃上皮細胞培養實驗
實驗方法原理胃癌為我國高發癌癥之一,培養正常人胃上皮細胞對研究胃癌癌變機理有很大應用價值。近年來培養人的腎臟上皮、氣管上皮、前列腺上皮等都有報道,但培養人胃上皮細胞少見成功。近年我研究室通過培養90例正常胃上皮細胞初代培養獲得成功,并建成轉化細胞系(Ges-1)。培養人正常胃上皮細胞獲得成功主要在于
上皮細胞的培養方法
上皮細胞的培養方法上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的
上皮細胞的培養方法
上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別受到重視.但上皮細胞培養中常混雜有成纖維細胞,培養時生長速度往往超過上皮細胞,并難以純化,同時上皮細胞難以在體外長期生存,因此純化和延長生存時間是培養關鍵.體內上皮細胞生長在膠原構成的基膜,因此培養在有
上皮細胞培養
1、取材:外科植皮或手術殘余皮膚小塊,早產流產兒皮膚更好,取角化層薄者,切成0.5-1平方厘米小塊。2、置0.02%EDTA中,室溫,5分鐘。3、換入0.25%胰蛋白酶中,4℃過夜。4、分離:取出皮塊,用血管鉗或鑷子將表皮與真皮層分開。5、取出表皮,剪成更小的塊后,置0.25%胰酶中,37℃,30—
上皮細胞培養
1)表皮細胞培養 1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。 2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。 3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。 4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分
正常人角膜上皮細胞和干細胞的分離
實驗材料: 1.完整的人角膜; 2.GMF-Saline G; 3.中性蛋白酶Ⅱ,1.2U/ml(用DMEM/F12/GA稀釋2.4U中性蛋白酶Ⅱ); 4.胰蛋白酶/EDTA; 5.DMEM/F12/GA; 6.DEME/F12/2FB/GA:DMEM/F12/GA含2%F;
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化
PriCells-原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞,纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等。混雜的細胞會直接影響實驗結果。在體外培養原代細胞時,為了保證實驗結果的可靠性、一致性、穩定性、和可重復性,要求采用
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化 PriCells-原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化 原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞,纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等。混雜的細胞會直接影響實驗結果。 在體外培養原代細胞時,為了保
人PBMC分離和培養
1、將靜脈血20ml用ACD抗凝劑以容積比血:抗凝劑=9:1抗凝處理2、按血:分離液=1:2注入國產淋巴細胞分離液上層,400g 20℃離心30分鐘3、交接層重浮于4倍體積的RPMI1640并通過離心法200g,10min洗三次4、獲得細胞可做分選或其他實驗。體會:1、實驗中我用過肝素方法抗凝,但效
肺泡上皮細胞的分離步驟
一、取得完全無血液殘留的肺臟:實驗前j將大鼠全身血液放凈,取得完全無血液殘留的肺臟二、消化肺組織:常用于細胞消化的酶有胰蛋白酶、彈性蛋白酶、膠原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分離上皮細胞的酶,現在一般用損傷性小的彈性蛋白酶來替代胰蛋白酶。但這種酶卻有活性不穩定,有效作用時間短暫,容易自我降解等問題。D