蛋白質質譜鑒定技術概述及常見問題
蛋白質（Protein）是生物體中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物細胞，作為生命的物質基礎之一，蛋白質在催化生命體內各種反應進行、調節代謝、抵御外來物質入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關重要的作用，因此蛋白質也是生命科學中極為重要的研究對象。現代研究結果發現越來越多的多肽同蛋白質一樣具有生物功能，建立具有特殊、高效的生物功能肽的肽庫是現在的研究熱點之一。因此需要高效率、高靈敏度的肽和蛋白質序列測定方法支持這些研究的進行。現有的肽和蛋白質測序方法包括N末端序列測定的化學方法Edman法、C末端酶解方法、C末端化學降解法等，這些方法都存在一些缺陷。例如作為肽和蛋白質序列測定標準方法的N末端氨基酸苯異硫氰酸酯 PITC分析法，測序速度較慢，通量低；樣品用量較大，對樣品純度要求很高；對于修飾氨基酸殘基往往會錯誤識別等。C末端化學降解測序法則由于無法找 到PITC這樣理想的化學探針，其發展仍面臨著很大的困難。在這種......閱讀全文
蛋白質質譜鑒定技術概述及常見問題
蛋白質（Protein）是生物體中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物細胞，作為生命的物質基礎之一，蛋白質在催化生命體內各種反應進行、調節代謝、抵御外來物質入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關重要的作用，因此蛋白質也是生命科學中極為重要的研究對象。現代研究結果發現越來越多的多肽同蛋白質一樣
蛋白質質譜鑒定技術概述及常見問題解決方法
蛋白質（Protein）是生物體中含量最高，功能最重要的生物大分子，存在于所有生物細胞，作為生命的物質基礎之一，蛋白質在催化生命體內各種反應進行、調節代謝、抵御外來物質入侵及控制遺傳信息等方面都起著至關重要的作用，因此蛋白質也是生命科學中極為重要的研究對象。 現代研究結果發現越來越多的多肽
質譜鑒定常見問題解答
1. 一級質譜和二級質譜有什么區別？什么時候做一級，什么時候做二級？ 答：一級質譜鑒定的方式主要指胎指紋圖譜（PMF），即利用質譜儀精確測量酶解片段的分子量并搜庫比較實現蛋白質的鑒定，二級質譜是在一級質譜的基礎上再選擇部分肽段做進一步的破碎并對碎片進行深入分析和比較，鑒定出該肽段的序列并結合
質譜鑒定常見問題解答
1. 一級質譜和二級質譜有什么區別？什么時候做一級，什么時候做二級？ 答：一級質譜鑒定的方式主要指胎指紋圖譜（PMF），即利用質譜儀精確測量酶解片段的分子量并搜庫比較實現蛋白質的鑒定，二級質譜是在一級質譜的基礎上再選擇部分肽段做進一步的破碎并對碎片進行深入分析和比較，鑒定出該肽段的序列并結合PMF
蛋白鑒定方法之質譜相關技術
質譜已成為連接蛋白質與基因的重要技術，開啟了大規模自動化的蛋白質鑒定之門。 用來分析蛋白質或多肽的質譜有兩個主要的部分，1）樣品入機的離子源，2）測量被介入離子的分子量的裝置。 首先是基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜（MALDI-TOF）為一脈沖式的離子化技術。 它從固相標本中產生離子，并在飛
蛋白質化學交聯結合質譜鑒定技術取得新進展
3月8日，國際著名期刊《eLife》在線發表了北京協和醫學院、北京生命科學研究所（NIBS）、北京大學和清華大學等處的一項最新成果，題為 “Trifunctional cross-linker for mapping protein-protein interaction networks an
蛋白質凝膠電泳后或者質譜后怎么鑒定
看你的目的.如果你只是檢測目標蛋白大小的話,加上蛋白質marker,考染觀察條帶大小即可.你要是想知道蛋白質的氨基酸序列的話就去打質譜.話說蛋白質的質譜就是序列分析.
如何判定蛋白質的質譜鑒定結果的差異
1 單個蛋白鑒定1. 用于鑒定純化的單個蛋白的溶液或粉末，或經過SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）的單個條帶或二維電泳的單個點。2. 蛋白酶解成多肽。3. 液相分離多肽，離子化的多肽進入質譜，母離子檢
如何判定蛋白質的質譜鑒定結果的差異
1 單個蛋白鑒定1. 用于鑒定純化的單個蛋白的溶液或粉末，或經過SDS-PAGE（Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis）的單個條帶或二維電泳的單個點。2. 蛋白酶解成多肽。3. 液相分離多肽，離子化的多肽進入質譜，母離子檢
質譜鑒定，常見疑問解答
問題1、一級質譜和二級質譜有什么區別？什么時候做一級，什么時候做二級?答：一級質譜鑒定的方式主要為胎指紋圖譜(PMF)，即利用質譜儀精確測量酶解片段的分子量并搜庫比較實現蛋白質的鑒定；二級質譜是在一級質譜的基礎上再選擇部分肽段做進一步的破碎并對碎片進行深入分析和比較，鑒定出該肽段的序列并結合PMF的
暨大研發另類質譜鑒定算法，大幅提高蛋白質組鑒定能力
暨南大學的研究人員利用翻譯組測序(RNC-seq)數據作為穩態細胞內蛋白質的“標準答案”，并另辟蹊徑，提出了蛋白水平上的一種簡單有效的多算法結果整合策略，不用做額外的實驗，零成本輕松提高蛋白質組鑒定數量，同時有效降低假陽性率。 鳥槍法質譜(shotgun mass spectrometry)是
蛋白質質譜測序
蛋白質譜一般來講是用來對某個蛋白質進行鑒定的方法而蛋白質測序實際上就是檢測蛋白質的多肽鏈數目，不一定要用到質譜技術簡單說，蛋白質測序的方法有很多，一般是在構建完成后，通過測序來對比之前的預測的序列是否正確。而質譜檢測一般是用在蛋白質表達純化完成后，用來鑒定是否是最初設計的那個蛋白。
暨大另類質譜鑒定算法策略大幅提高蛋白質組鑒定能力
鳥槍法質譜(shotgun mass spectrometry)是蛋白質組研究的標準研究方法。從質譜譜圖中鑒定蛋白質需要依賴搜庫算法,現有許多算法被開發出來，常見的如Andromeda(Maxquant), Mascot, COMPASS, X!Tandem, pFind, InsPecT, P
華盈視角：蛋白質組學——質譜技術
蛋白質作為功能的直接執行者，在生物醫學領域中有著重要意義，檢測蛋白質表達、修飾、互作等有助于我們理解生命機體的各類機制和活動規律，為疾病的治療、診斷，藥物的開發、優化等提供有力的支持。質譜技術作為檢測蛋白質組學的主流技術，有必要了解其核心原理，才能更好的服務于科學問題的解決。1.質譜的原理： 質譜是
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍 G-250
利用納升級液相色譜－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料:修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒:消化緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? 萃取液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
利用納升級液相色譜－－串聯質譜進行蛋白質鑒定實驗
實驗材料 修飾胰蛋白酶試劑、試劑盒 消化緩沖液萃取液清洗液脫色液儀器、耗材 多通道移液槍Eppendorf Repeater 分液器Combitips 分液管實驗步驟 3.1 膠內蛋白的水解和多肽的提取（一天的實驗方案)對于從 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 電泳（經考馬斯亮藍
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時
蛋白質組鑒定技術
?如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗力，不
蛋白質組鑒定技術
如果目前分離蛋白質組的最好技術是2-DE，那么隨之而來的挑戰是數百數千個蛋白如何被鑒定. 在這里，我們不考慮傳統的蛋白鑒定方法，如免疫印跡法、內肽的化學測序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一個有機體中有意義的基因的過表達. 并不是因為這些方法無效，而是因為它們通常耗時、耗
無菌均質器概述及技術參數
無菌均質器，又稱拍打式勻漿機，廣泛用于動物組織，生物樣品等均值等處理，在食品、藥品、化妝品、臨床、分子學、毒素及細菌檢測等領域均可應用，特別適合于微生物檢測樣本的制備。該裝置采用不銹鋼系統，可有效的分離護體樣品表面和被包含在內的微生物均一樣品，樣品裝在一次性無菌均質袋中，不與儀器接觸，具有均質柔
質譜鑒定微生物的原理
在應用MALDI-TOF MS時，通常將微生物樣本與一種飽和的低分子量無機化合物溶液（稱為基質）進行混合加在靶板上，待干后樣本與基質共結晶后形成了以基質包裹構架的樣本固體沉淀。樣本基質結晶體經激光輻射，基質從激光中吸收能量使樣品吸附，基質與樣品之間發生電荷轉移使得樣品分子電離，離子在加速電場下獲
促進質譜新技術，傳承質譜文化
——第六屆中國儀器儀表學會分析儀器分會質譜專業委員會誕生2022年8月26日，由中國儀器儀表學會分析儀器分會質譜儀器專家組和分析測試百科網主辦的《第五屆質譜儀器研發論壇》在北京市懷柔區舉辦。本次大會旨在進一步加強我國質譜新技術研發、應用、產業化及投資等方面的交流、促進我國質譜行業健康快速發展。質譜研
蛋白質質譜測序技術和儀器國產化
2015年10月17日，第二屆全國質譜分析學術報告會在浙江大學紫荊港校區體育館盛大開幕，在5位院士的精彩報告后，多位學者做了高水平的大會報告。 復旦大學楊芃原教授：蛋白質質譜測序技術和儀器國產化 復旦大學教授楊芃原教授做題為《蛋白質質譜測序技術和儀器國產化》的報告。蛋白質質譜測
定量蛋白質組學質譜采集技術進展（四）
無論是相對定量還是絕對定量方法,DIA很好地克服了DDA鳥槍法和SRM目標監測的種種不足, 在定量蛋白質組學中具有良好的應用前景。然而,目前DIA 方法的循環時間仍然較長,只能與納流液相聯用,并使用較長的梯度以獲得足夠的色譜峰寬,限制了DIA 的應用范圍。這也是DIA 技術下一步需要解決
定量蛋白質組學質譜采集技術進展（三）
然而PRM 的分析通量不如SRM。PRM 能同時監測最多10 ~15 個母離子,而SRM 能同時監測上百個離子對,因為高分辨質譜的有效掃描速度通常只有10 ~15 Hz,遠慢于SRM 的有效掃描速度。但是這一問題正逐步得到解決,多重累積(Multiplexing, MSX)技術的發展和使用有
定量蛋白質組學質譜采集技術進展（一）
摘要 質譜是定量蛋白組學的主要工具。近年來隨著定量蛋白質組學研究的深入,傳統質譜定量技術面臨著復雜基質干擾、分析通量限制等諸多問題。而最近一系列質譜新技術的發展,包括同步母離子選擇(SPS)、質量虧損標記、平行反應監測(PRM)、多重累積(MSX)和多種全新數據非依賴性采集(DIA)等,為解決目前蛋
定量蛋白質組學質譜采集技術進展（二）
同步母離子選擇(Synchronous precursor selection, SPS)技術的出現徹底解決了MS3 響應弱的問題。SPS 技術利用多頻切跡的選擇波形電壓(MultiNotch) [27] ,在線性離子阱中實現一次選擇同時獲得多個離子,最多可同時選擇15 個(圖2A)。利用這一原理,
飛行質譜技術
工作原理早期的飛行質譜為基質輔助激光解吸離子飛行質譜（maldi-tofms），基質使被分析蛋白質離子化，再由質譜測定。seldi把基質改為以色譜原理設計的蛋白芯片，增強了分離能力。芯片技術最初應用于DNA分析，稱基因芯片。由于芯片整合了多種高技術：高度集成、超微化、計算機化、自動化，具有多樣、快速
飛行質譜技術
飛行質譜的全稱是表面增強激光解吸電離飛行時間質譜技術(SELDI-TOF或SELDI)。質譜技術-飛行質譜是由2002年諾貝爾化學獎得主田中(Tanaka)發明，賽弗吉(Ciphergen)系統生物公司制造的特殊芯片，誕生伊始便引起學術界的重視，成為最引人注目的亮點。 工作原理 早期的飛行質譜為基