用蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA,如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時,應選用這一方法。從 5X107 培養的非整倍體細胞 ( 如 HeLa 細胞)中可獲得大約 200 μg,長度為 100~150 kb 的哺乳動物DNA。 實驗材料 蛋白酶 K 噬菌體 λ DNA 哺乳動物細胞、新鮮組織或者血樣 試劑、試劑盒 醋酸銨 ......閱讀全文
蛋白酶K的應用
蛋白酶K已廣泛應用在皮革、毛皮、絲綢、醫藥、食品、釀造等方面。皮革工業的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節省時間,又改善勞動衛生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用,如用胃蛋白酶治療消化不良,用酸性蛋白酶治療支氣管炎,用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科
蛋白酶K的妙用
蛋白酶 K,威力巨大的廣譜蛋白酶,95C 加熱10 分鐘,則完全失活。數年前首次使用它,是替代 DEPC 處理 RNA 抽提用的離心管和槍頭,效果不錯;后來又用于處理 RNase-Free的水,效果也是一級棒。從此就再也不用 DEPC 了。現在將它的細節公開,與大家分享。 配制 RNA 裂解試劑時,
蛋白酶k的作用
值得注意的是,蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.EDTA緩沖液可以替代蛋白
蛋白酶k有什么特性
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶有兩個Ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理并無直接關系。然而,如果從該酶中除去Ca2+,由于出現遠程的結構變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酶制品的蛋白質。所以,
蛋白酶k概念和作用
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中純化得到。該酶有兩個ca2+結合位點,它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機理并無直接關系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現遠程的結構變化,催化
蛋白酶K的生理作用
值得注意的是,蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,以增加探針與靶核酸結合的機會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從而影響雜交結果.EDTA緩沖液可以替代蛋白
蛋白酶K的保存方法
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復凍融,有效保證12月。孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時間為15分鐘至48小時;理想孵育時間為2小時。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase-K)配制方法
將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,輕輕搖動,直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
蛋白酶K生物試劑的妙用
蛋白酶K/Proteinase K???層析純,30u/mg?????100毫克蛋白酶 K,威力巨大的廣譜蛋白酶,95C 加熱10 分鐘,則完全失活。數年前首次使用它,是替代 DEPC 處理 RNA 抽提用的離心管和槍頭,效果不錯;后來又用于處理 RNase-Free的水,效果也是一級棒。從此就
蛋白酶K的主要功效
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一
蛋白酶K的特性和功能
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內及高溫 (50?70°C)均有活性,用于質粒或基因組 DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白,使 DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進行
蛋白酶K助力您的生化研究
什么是蛋白酶K?蛋白酶K(Proteinase K)是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,基因序列來源于白色念球菌白色念球菌(Tritirachium album limber),具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質的分離。?它有什么作用?蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前
賽百純帶你了解蛋白酶K
新冠核酸檢測試劑盒作為新型冠狀病毒檢測的“金標準”,蛋白酶K是核酸檢測試劑盒中用于檢測樣本前處理的重要組分,目前市場需求極大。 蛋白酶K(Proteinase K),來源于林伯氏白色念球菌(Tritirachium album Limber)的蛋白酶K基因,屬于絲氨酸蛋白酶類,具有極高的酶
介紹蛋白酶K的使用方法
蛋白酶K(ProteinaseK),來源于林伯氏白色念球菌(TritirachiumalbumLimber)的蛋白酶K基因,屬于絲氨酸蛋白酶類,具有極高的酶活性和廣泛的底物特異性。 蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于雜交前的樣品處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質的作用,能增加探針與靶核酸結合的機會
蛋白酶K的功能及使用方法
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的
蛋白酶K是DNA提取的關鍵試劑
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質的一般降解。從林伯氏白色念球菌(tritirachiumalbumlimber)中純化得到。蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿
蛋白酶K的功能及使用方法
蛋白酶K,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩定,還具有降解天然蛋白質的能力,因而它應用很廣泛,包括制備脈沖電泳的染色體 DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的
賽百純蛋白酶K溶液使用說明
蛋白酶K(Proteinase K),相對分子量約為29.3 kDa, 是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。可切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,應用廣泛,可用于制備脈沖電泳的染色體DNA,蛋白質印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶等實驗,蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg /ml
什么是蛋白酶K,有哪些作用和用途?
一、什么是蛋白酶K?蛋白酶K(Proteinase K)是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,基因序列來源于白色念球菌白色念球菌(Tritirachium album limber),具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質的分離。二、它有什么作用?蛋白酶K在原位雜交技術中通常用于
蛋白酶K的使用方法、作用及配制
蛋白酶K是一種從白色念 珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高 的比活性,是DNA提取的關鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內及高溫 (50?70°C)均有活性,用于質粒或基因組 DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白,使 DNA游離在溶液中,隨后用不同方法
人組織蛋白酶K(cathK)酶聯免疫分析試劑盒使用說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:?????????????????????96T3pg/ml-150pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、齦溝液及相關液體樣本中組織蛋白酶K(cath-K)含量。實驗原理本 試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人織蛋白酶K(cath-K)水平。用純化的人組織蛋白
什么是蛋白酶k-?應用在哪里并如何保存?
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內及高溫 (50?70°C)均有活性,用于質粒或基因組DNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結合的組蛋白,使 DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進行
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過一種有效的蛋白酶(如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚:氯仿抽提,就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量(50~100 ml ) 制備物。
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
實驗方法原理 通過一種有效的蛋白酶(如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚:氯仿抽提,就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量(50~100 ml ) 制備物。實驗材料 蛋白酶 K限制性內切核酸酶λ 噬菌體顆粒試劑、試劑盒 氯仿透析緩沖液EDTA乙醇酚酚:氯仿SDS乙
用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA實驗
通過一種有效的蛋白酶(如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚:氯仿抽提,就能從大規模制備的 λ 噬菌體中很好地分離到 DNA。該方法也適用于小量(50~100 ml ) 制備物。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理通過一種有效的蛋白酶(如蛋白酶 K ) 的消化作用及隨后的酚:
抗原修復的幾種方法(檸檬酸鈉法、蛋白酶K法和尿素法-)
一、檸檬酸鈉法1. 把玻片放在玻璃固定架上,再將架子放在盛有600ml的10mM檸檬酸鈉(pH6.0)的容器中。2. 微波中高火6-8min。3. 室溫冷卻。4. 用PBS洗滌3次,每次5min。二、蛋白酶K法1. 配制新鮮溶液:25μl 20mg/ml蛋白酶K;2.5ml 1MTris-HCl(p
關于尿鉀(K+,K)的簡介
尿鉀指測定24h尿液中鉀的濃度。鉀是細胞內主要的陽離子之一。尿鉀的排泄與飲食、機體含鉀的水平密切相關。尿鉀測定可反映腎臟病變情況。鉀是細胞內主要的陽離子之一。人體通過飲食攝入鉀、腎臟根據集體的需要進行平衡調節,如具有保鉀、排鉀的功能,維持水、電解質和酸堿平衡。尿鉀在晚間比白天濃度高,因此需收集2
X射線衍射中,Kα,Kβ具體意義
X射線管發生出來的不是純凈的單色光,包含多種波長的射線,最主要的是K系射線。K系射線是指陰極電子碰撞陽極,使陽極電子產生K?激發,擊走K?層電子后,L層或M?層電子填充K?層電子而產生的X?射線。K?系射線又可以細分為?Kα(L?層電子填充)和?Kβ(M?層電子填充)兩種波長略有差異的兩種射線。而?
用蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA,如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時,應選用這一方法。從 5X107?培養的非整倍體細胞 ( 如 HeLa 細胞)中可獲
用蛋白酶K和苯酚從哺乳動物細胞中分離高分子質量DNA
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 當需要大量哺乳動物 DNA,如用于 Somhern 雜交或者用噬菌體 λ 載體構建基因組文庫時,應選用這一