內切酶的熱失活參數
熱失活是終止酶切反應的一種簡便易行的方法。大多數最適反應溫度是37℃的酶在65℃下溫育20分鐘即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如將溫度升高至80℃，溫育20分鐘也可失活。下表注明了每種酶的失活條件。在50μl的反應體系中，37℃條件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作為底物，加入5-10μl內切酶及相應緩沖液，反應60分鐘，然后升溫至65℃或80℃溫育20分鐘進行熱失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常為λDNA），調節溫度至最適反應溫度，溫育60分鐘。若瓊脂糖電泳顯示底物部分或完全被消化，則表明該酶沒有完全被熱失活。EnzymeHeat Inactivation (temperature)Aat IIYes (65°C)Acc IYes (80°C)Acc65 IYes (65°C)Aci IYes (65°C)Acl INoAcu IYes (65°C)Afe IYes (65°C)Afl IIYes......閱讀全文
內切酶的熱失活參數
?熱失活是終止酶切反應的一種簡便易行的方法。大多數最適反應溫度是37℃的酶在65℃下溫育20分鐘即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如將溫度升高至80℃，溫育20分鐘也可失活。下表注明了每種酶的失活條件。在50μl的反應體系中，37℃條件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作為底物，加入5-10μl內切酶
內切酶列表：
Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N =
什么是內切酶？
內切酶incisionenzyme是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶，只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用，把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來，若再連在別的細胞的遺傳基因上，便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用，使基因工程成為可能。一種限制酶只能識別一
內切酶星號活性
在非理想的條件下，內切酶切割與識別位點相似但不完全相同的序列，這一現象稱星號活性。有人提出，這種"星號"活性可能是內切酶的一種普遍特性（1），如果提供給相應反應條件，所有內切酶都會出現非特異性切割。NEB已證實下列酶存在星號活性：Apo I（2）、Ase I（2）、BamH I（3）、BssH II
核酸內切酶的簡介
30多年前，當人們在對噬菌體（細菌病毒）的宿主特異性的限制-修飾現象進行研究時，首次發現了限制性內切酶。細菌可以抵御新病毒的入侵，而這種"限制"病毒生存的辦法則可歸功于細胞內部可摧毀外源DNA的限制性內切酶。首批被發現的限制性內切酶包括來源于大腸桿菌的EcoR I和EcoR II，以及來源于He
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增是目前相關研究最少的一種恒溫核酸擴增技術。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人員開發并申請ZL的（Brain等2009）。除了鏈置換酶（Bst）外，NEAR反應中還需添加一個切刻內切酶。NEAR反應的引物設計需要將所使用的切刻內切酶的DNA作為序列加在引物
DNA的限制性內切酶酶切反應
[實驗目的] 通過本實驗學習DNA的限制性內切酶酶切反應的基本原理與實驗技術。 [實驗原理] 1.限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作
關于內切酶的相關介紹
內切酶，即限制性核酸內切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶，只對脫氧核糖核酸內一定堿基序列中某一定位置發生作用，把這位置的鏈切開。通過內切酶可以把某一個遺傳基因切下來，若再連在別的細胞的遺傳基因上，便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和采用，使基因工程成為可能。
關于內切酶的分類介紹
第一類內切酶能識別專一的核苷酸順序，并在識別點附近的一些核苷酸上切割DNA分子中的雙鏈，但是切割的核苷酸順序沒有專一性，是隨機的。這類限制性內切酶在DNA重組技術或基因工程中沒有多大用處，無法用于分析DNA結構或克隆基因。這類酶如EcoB、EcoK等。第二類內切酶能識別專一的核苷酸順序，并在該順
DNA的限制性內切酶酶切反應技術
限制性核酸內切酶(restriction endonuclease)是指識別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內切核酸酶。本實驗是掌握DNA的限制性內切酶的酶切技術。DNA的限制性內切酶酶切反應技術[實驗原理]1. 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位
DNA的限制性內切酶酶切反應實驗
[實驗目的]通過本實驗學習DNA的限制性內切酶酶切反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]1.限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP 的
限制性內切酶酶切反應實驗原理
限制性內切酶已有百余種，每種酶有其特定的核苷酸序列識別特異性，酶的活性需Mg2+來激活。不同的酶也有許多差別：有些酶除需Mg2+外，還需ATP等其他輔助因子的激活；切割位點和識別序列間的距離不同；某些內切酶同時具有甲基化作用。根據這些差別，可將限制性內切酶分為Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。Ⅱ型限制性內切酶只需要
基因失活的應用
如果用于癌癥治療,就可以針對癌基因設計反義RNA導入到細胞中,從而抑制癌基因的表達,即基因失活,來達到治療癌癥的目的。在其他疾病的治療中也是如此。
X失活的定義
中文名稱X失活英文名稱X inactivation定 義雌性成體細胞中兩條X染色體中的一條在遺傳性狀的表達上喪失功能的現象。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞分化與發育（二級學科）
插入失活的定義
若把外源DNA片段插入到載體的選擇標記基因中而使此基因失活，喪失其原有的表性特征，此方法叫插入失活。標記基因多為抗生素抗性基因。
基因失活的定義
基因失活是指利用反義技術,使非正常基因或有害基因不表達或降低表達活性,以達到治療某些特定疾病的目的。
物質失活的定義
失活是指某些具有生物學活性的物質（如蛋白質、氨基酸、基因等）受物理或化學的因素的影響，導致其生物活性喪失的現象，也指工業上使用的催化劑失去催化作用。
基因失活的概念
基因失活是指利用反義技術，使非正常基因或有害基因不表達或降低表達活性，以達到治療某些特定疾病的目的。
cell：早期端粒酶失活將加速衰老
近日,來自美國的華裔科學家在著名國際期刊cell發表了他們的最新研究成果。他們通過實驗發現，酵母端粒酶早期失活會導致細胞出現短暫的DNA損傷應答，這一過程會加速酵母母細胞衰老，并且ETI導致的加速衰老過程發生在端粒縮短誘導的細胞衰老之前。 研究人員指出，端粒酶對于長期維持和保護端粒具有重要作用
內切酶的稀釋兼容性
稀釋限制性內切酶時，建議使用稀釋緩沖液（A，B，C）。建議臨用前稀釋且稀釋終濃度不要小于1,000 units/ml。目錄及說明書中標注了每一種內切酶相應的稀釋兼容性。注：以下稀釋液不適用于耐熱DNA聚合酶。欲了解稀釋耐熱DNA聚合酶的相關情況，請參見相應章節。稀釋緩沖液成份：稀釋液A： 50 mM
關于核酸內切酶的基本介紹
核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在3′位置上，稱為5′-內切酶；而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在5′位置上，稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求，例如胰臟核糖核酸酶（RNaseA）即是一種高度專
核酸內切酶的影響及因素
限制性酶切反應速度與底物的性質有很大的關系，底物的單雙鏈結構、分子的構型、DNA鏈中酶識別位點的數目以及位點附近的序列等都影響著酶的催化反應。共價閉合環(超螺旋構型)DNA比其相應的線性分子的酶解作用要慢，要使超螺旋構型DNA徹底降解，需要的酶量就大。對于DNA-RNA雜合雙鏈的酶切作用，Mol
內切酶PCR反應中的活性
酶切反應條件如下：在20 μl PCR產物混合體系中加入5U的內切酶，按相應的反應溫度溫育1小時。通常20 μl PCR產物體系中含有1 μg底物DNA，1單位的Vent DNA聚合酶，1× ThermoPol Buffer [10 mM KCl， 20 mM Tris-HCl （PH 8.8@25
關于核酸內切酶的相關介紹
核酸內切酶催化水解多核苷酸內部的磷酸二酯鍵。有些核酸內切酶僅水解5′磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在3′位置上，稱為5′-內切酶；而有些僅水解3′-磷酸二酯鍵，把磷酸基團留在5′位置上，稱為3′-內切酶。還有一些核酸內切酶對磷酸酯鍵一側的堿基有專一要求，例如胰臟核糖核酸酶（RNaseA）即是一種高度專
DNA的限制性內切酶酶切(restriction－endonuclease，RE)分析
【原理】限制性內切酶(restrictionendonuclease，RE)是由細菌自己產生的能識別雙鏈DNA分子中的特定堿基順序，并以內切方式水解核酸中的磷酸二酯鍵的核酸水解酶。它可分為三種類型：Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型，Ⅱ型酶就是通常所指的RE，能識別雙鏈DNA的特異順序，并在這個順序內進行切割。它是基因工
失活類型和原因
失活的類型和原因很復雜，大致可分為三類：(1)結構變化 催化劑的物理結構在反應過程中發生變化，如晶型改變、細分散晶粒長大，顆粒燒結和載體粉化等，從而失去活性。這種失活是不可逆轉的。發生這種情況的主要原因是溫度過高，也可能是氣體帶進雜質組分造成的。如二氧化硅為載體的釩催化劑在HF作用下，會造成催化劑粉
處理物質失活的方法
催化劑失活對工業生產過程有重大影響，雖然已進行了大量的研究工作，但仍不充分。工業上現采用下列措施來防止和彌補催化劑失活，保證過程的正常運轉，提高過程的經濟效益。（1）改進催化劑為減少催化劑失活的可能性和延長更換催化劑的周期，國內外都在不斷改進催化劑配方和工藝，提供低溫活性高、機械強度高、耐高溫和抗毒
質粒DNA的限制性內切酶（restriction－endonuclease,－RE）酶切及..
實驗原理： 限制性內切酶（restriction endonuclease, RE）能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附近的特異位點上，并切割雙鏈DNA。限制性內切酶可分為三類：I、Ⅱ和III類。I類和III類酶在同一蛋白質分子中兼有修飾（甲基
內切酶列表：Enzymes－Generating－Blunt－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,
內切酶列表：Enzymes－Generating－Blunt－Ends
Asymmetric sequences are indicated by *.Single letter code:R = G or A;?Y = C or T;?W = A or T;?M = A or C;?K = G or T;?S = C or G;H = A, C or T;V = A,