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實驗步驟基 本 方 案 1 通 過 道 威 克 斯（DOWEX) 離 子 交 換 層 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸材料備 選 方 案 通 過 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸附加材料[3 H ] InsP 樣 本（見基本方案，步 驟 6) 和標準品除 氣 的 H PLC 級水2mol/L 的甲酸銨，以磷酸調至 pH3.7基 本 方 案 2 通過薄層層析方法分析肌醇磷脂材 料1 % (m/V ) 草酸鉀/2m m ol/LED TA溶劑： 60 : 20 : 23 : 18 : 12 (V7 V /V7 V 7 V ) 氯仿/甲醇/丙酮/乙酸/水 ，或 45 :35 : 10 氯仿/甲醇/4mol/L NH4OH細 胞（如腫瘤細胞系、雜交瘤、克隆、凝集素刺激的細胞）無 磷 酸 鹽 的 培 養 基（如 GIBCO/BRL) 含 有 1 0 % (V /V ) 熱 滅 活 的 胎 牛 血 清(FCS) ， 用 ......閱讀全文
一、引言蛋 白 質 翻 譯 后 修 飾 (P T M ) 在 細 胞 生 物 調 節 中 發 揮 著 基 本 作 用 。 P T M 是 m R N A 翻譯 后 蛋 白 質 的 酶 促 共 價 化 學 修 飾 。蛋 白 質 化 學 修 飾 非 常 重 要 ，因 為 它 們 會 潛 在 地
一、膜的制備從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法，因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能高表達目的膜蛋白的組織或細胞系就很重要。最近，人們對于將細胞表面蛋白質作為鑒定不同
Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用實驗材料和方法 從1968年 zui早的商品化 流式細胞術(FC) 和熒光激活細胞分類術(FACS)誕生以來,
微生物檢測基礎知識及常見消毒滅菌方式匯總 一、微生物的概念與分類 在自然界里，有許多肉眼不能直接看見，必須借助于顯微鏡放大才能觀察到微小生物，這些微小生物總稱為微生物。 微生物的分類，目前公認的包括七大類。即病毒→立克次體→支原體→細菌→放線菌→螺旋體→真菌(酵母菌、霉菌)。
實驗步驟方 案 2. 11 通 過 焚 光 免 疫 細 胞 化 學 分 析 h E S 細 胞 的 特 性試劑與材料無菌或無菌制備□ 生 長 于 0.1 % 明膠包被的玻璃蓋玻片上的h E S 細胞非無菌□ 4 % 多聚甲醛□ P B S A□ T ris-緩 沖 鹽 溶 液（T B S 一）□含有
腰酸、背痛，臉色煞白，站都站不起來――21日下午，當27歲的程小姐從江蘇省人民醫院急診科轉入腎科病房的時候，腎科劉佳主任醫師還以為來了什么重病號。問清情況之后才知道，原來又是禍起龍蝦。“這已經是這兩天病房收治的第三個了。”劉佳主任醫師說。記者了解到，這一星期以來，省人民醫院收治的因食用
大 家 都 知 道 ，次氯酸鈉發生器 消 殺 zui 主 要 的 作 用 方 式 是 通 過 它 的
免疫學技術的迅速發展對精度的要求越來越高，一般的酶免檢測技術已逐漸無法適應這種形勢的需要。現今發展的主流已不再是用放射性同位素標記的測定方法(避免污染環境及對人體損害)，而是轉向于能在任何地方操作的快速均相和固相測定，最終趨向于能夠檢測到皮克或10負18摩爾級的、非同位素的、自動或半自動的實驗室測定
介紹了用表達抗原的 DNA 增強免疫應答的途徑。介紹了核酸免疫的兩種方法：①注射含有 DNA 表達載體的生理鹽水；② 用 基 因 槍 注 射 DNA。還包括了基因槍方法中使用的 DNA 包被金珠的制備和保存方法。實驗步驟基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 種DNA在免疫前應先閱讀動物處理（附 錄
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 種DNA在免疫前應先閱讀動物處理（附 錄 2C) 和 接 種 的（附 錄 2E) 指導說明。在正式實驗之前需先進行肌肉和皮下注射練習； D N A 的精準注射對于免疫成功起關鍵作用。可以 用 India ink (或相同的染料）來定位注射的部位是否正確。材料2
帶狀皰疹( herpes zoster) 是由潛伏的水痘-帶狀 皰疹病毒( varicella-zoster virus，VZV) 再激活和復制 所致的病毒性皮膚病，以單側分布帶狀排列的成簇 水皰伴神經痛為特征。帶狀皰疹有自限性，但嚴重 病例及其并發癥降低患者生活質量并加重患者家庭 及社會的經濟
蛛網膜下腔不僅在麻醉實踐中占有重要位置，而且在許多其他醫學領域蛛網膜下腔間隙也已成為醫學干預的重要解剖學結構。一般而言，意外/不慎的蛛網膜下腔注射比較罕見。文獻報道的意外蛛網膜下腔給藥途徑有較大的差異，因文獻來源大都是個案報告和小樣本病例系列報道。本文旨在總結分析意外蛛網膜下腔注射的潛在來源，及
二、細胞凋亡的細胞化學測定細胞凋亡的細胞化學測定包括細胞表面（細胞膜）的結構和通透性改變的測定和細胞核DNA改變的測定。根據應用的范圍，又可分為細胞群休和單個細胞測定兩種，以下僅介紹其中幾種較為常用的方法。碘化丙啶（propidium iodide,PI）檢測早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞
一、目的和要求要求學會植物病原真菌、細菌、病毒和線蟲的分離、培養和接種的一般方法，并掌握其基本原理；學習植物傳染性病害研究中常用的接種方法，比較不同接種方法對病害發生發展過程與外界環境的差異。二、材料和用具新鮮的真菌和細菌病害材料（辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病葉片、水稻白葉枯病葉、煙草花葉病和番茄根結
一、 目的和要求 要求學會植物病原真菌、細菌、病毒和線蟲的分離、培養和接種的一般方法，并掌握其基本原理；學習植物傳染性病害研究中常用的接種方法，比較不同接種方法對病害發生發展過程與外界環境的差異。二、材料和用具 新鮮的真菌和細菌病害材料（辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病葉片、水稻白葉枯病葉、煙草花葉病和番
一、 目的和要求要求學會植物病原真菌、細菌、病毒和線蟲的分離、培養和接種的一般方法，并掌握其基本原理；學習植物傳染性病害研究中常用的接種方法，比較不同接種方法對病害發生發展過程與外界環境的差異。二、材料和用具新鮮的真菌和細菌病害材料（辣椒炭疽病果、水稻稻瘟病病葉片、水稻白葉枯病葉、煙草花葉病和番茄根
免疫治療已成為癌癥精準醫療中的一大熱點，并已逐步發展成為繼手術、化療和放療后的第四種腫瘤治療模式。2019年，腫瘤免疫治療有突破有進展。值此新年之際，轉化醫學網整理了今年熱門的免疫治療研究文章，共有12篇。 01 Treg細胞重編程改善免疫治療 Mauro Di Pilato,et al.
原核表達系統是常被用來研究基因功能的成熟系統，由于原核表達系統具有包涵體蛋白不易純化、蛋白修飾不完整等缺陷，人們也開始利用真核細胞表達系統來研究基因。自上世紀70年代基因工程 技術誕生以來，基因表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。并隨著人類基因組計劃實施的進行，在技術方法上得到了很大發展，時至今
北京協和醫院病理科教授，博士生導師，中國工程院院士。1929年11月13日出生于江蘇無錫。1953年畢業于上海圣約翰大學醫學院。擅長淋巴結病理、消化道疾病病理、內分泌病理等的診斷，對胰腺腫瘤特別是胰腺癌的實驗性基因治療方式進行了深入系統的研究，開展了內分泌腫瘤的分子生物學和分子遺傳學研究。“胰頭癌
毛細管電泳（capillary electrophoresis，CE）又稱高效毛細管電泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一類以毛細管為分離通道、以高壓直流電場為驅動力的新型液相分離技術。毛細管電泳實際上包含電泳、色譜及其交叉內
實驗步驟基本方案 過 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 備 腹 腔 巨 噬 細 胞材 料單核細胞增多性利斯特氏菌無 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠（見 表 A .2A .1)，包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培養基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V
選擇材料及預處理 以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到
用流式細胞儀檢測細胞因子的分泌和分離 分泌細胞因子的細胞基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如，培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原， 1?10
實驗步驟基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如，培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原， 1?10ug/m l 肽 或 1?100ug/m l 蛋
可通過將活化的T 細胞和腫瘤細胞融合獲得T 細胞雜交瘤。異質性的雜交瘤可以通過有限稀釋法克隆獲得表達特異性T 細 胞 受 體 （T C R ) 的雜交瘤。雜交瘤可以在缺乏生長因子的條件下大量的擴增。研究證明，雜交瘤對研究T C R 特異性識別抗原以及C D 3-T C R 復合物的生物化學和分子生物
實驗步驟基本方案細胞因子分泌實驗材 料冰冷的或 37°C 預溫的培養液。例如，培養人細胞用含 1 0 % 人 A B 血漿或自身血清的 1640 完全培養液。培養小鼠細胞用含 1 0 % 小鼠血清的 R P M 1-1640 完全培養基抗原， 1?10ug/m l 肽 或 1?100ug/m l 蛋
（一）紅細胞 正常人尿中排出紅細胞甚少，24小時尿中排出紅細胞數多不超過100萬，紅細胞為尿沉渣成分中最重要者，成人每4-7個高倍視野可偶見一個紅細胞，如每個視野見到1-2個紅細胞時應考慮為異常，若每個高倍視野均可見到3個以上紅細胞，則或診斷為鏡下血尿。 新鮮尿中紅細胞形態對鑒別腎小球源性和非腎
實驗步驟基本方案 一 種 抗 原 加 工 處 理 和 呈 遞 的 檢 測 體 系材 料具有增殖能力的（如轉化的 B 細胞）或非增殖的且與 T 雜交瘤細胞 M H C 匹配的抗原呈遞細胞（單 元 7.1)D M E M -1 0 完全培養基， 37°C對數生長期的 T 雜交瘤細胞抗原：溶解于水的蛋白質
基本方案 一 種 抗 原 加 工 處 理 和 呈 遞 的 檢 測 體 系材 料具有增殖能力的（如轉化的 B 細胞）或非增殖的且與 T 雜交瘤細胞 M H C 匹配的抗原呈遞細胞（單 元 7.1)D M E M -1 0 完全培養基， 37°C對數生長期的 T 雜交瘤細胞抗原：溶解于水的蛋白質或多肽（
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核