ES細胞分化培養實驗
實驗材料單一胚胎樣體儀器、耗材組織培養板巴斯德吸管玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:培養懸液中的單一胚胎樣體6 孔組織培養板帶棉塞巴斯德吸管明膠包被的玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基2. 準備明膠包被的玻璃蓋玻片3. 用無菌鑷子在 6 孔組織培養板的每孔中放一塊明膠包被的玻璃蓋玻片。4. 在生物安全柜中取下培養板的蓋,紫外線下照射 3~5 分鐘,殺死可能污染的細菌。5. 用帶棉塞巴斯德吸管把含有一個單一胚胎樣體的一小滴 ES 細胞懸液轉移到蓋玻片中心。6. 孵育 4~5 小時,使單一胚胎樣體附著于明膠表面。保持培養物濕潤。7. 吸附后,每孔中緩慢加入 2 ml 分化培養基(預熱至 37℃)。注意不要沖掉細胞。8. 培養基變黃后換液,至少每周一次,加 2 ml 分化培養基。9. 7 天內可觀察到心肌細胞的自動收縮。展開......閱讀全文
ES細胞分化培養實驗
實驗材料 未分化 ES 細胞試劑、試劑盒 PBS儀器、耗材 ES 分化培養基移液器實驗步驟 1. 準備下列試劑和材料:未分化 ES 細胞無 Ca2+ 和 Mg2+ PBSES 分化培養基8 道微量移液器無菌多道移液器容器2. 收獲未分化 ES 細胞。3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml
ES細胞分化培養實驗
懸滴培養 培養皿ES細胞集落 附著ES細胞分化培養 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 未分化 ES 細胞
ES細胞分化培養實驗
實驗材料單一胚胎樣體儀器、耗材組織培養板巴斯德吸管玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:培養懸液中的單一胚胎樣體6 孔組織培養板帶棉塞巴斯德吸管明膠包被的玻璃蓋玻片無菌鑷子ES 分化培養基2. 準備明膠包被的玻璃蓋玻片3. 用無菌鑷子在 6 孔組織培養板的每孔中放一塊明
ES細胞分化培養實驗——培養皿ES細胞集落
實驗材料ES 細胞單一胚胎樣體儀器、耗材細菌培養皿ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:懸滴培養的 ES 細胞單一胚胎樣體100 mm 細菌培養皿ES 分化培養基2. 在 100 mm 細菌培養皿中加 10 ml 預熱的分化培養基。3. 從溫箱中取出培養 2 天的懸滴培養物。小心翻轉培養
ES細胞分化培養實驗——懸滴培養
實驗材料未分化 ES 細胞試劑、試劑盒PBS儀器、耗材ES 分化培養基移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:未分化 ES 細胞無 Ca2+?和 Mg2+?PBSES 分化培養基8 道微量移液器無菌多道移液器容器2. 收獲未分化 ES 細胞。3. 在 100 mm 組織培養皿中加 10 ml PBS
將基因轉移至未分化ES細胞實驗——ES細胞電穿孔
實驗材料線性化轉移基因 DNA未分化 ES 細胞儀器、耗材電穿孔儀和電穿孔杯neoR-MEF 滋養板ES 生長培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:線性化轉移基因 DNA(1 mg/ml,溶于無菌 TE)未分化 ES 細胞Bio-Rad 電穿孔儀和電穿孔杯100 mm neoR-MEF 滋養板ES
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化試劑、試劑盒DMSOPBS胰酶溶液凍存液儀器、耗材平底 96 孔板移液器ES 生長培養基ES 分化培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:DMSO(組織培養級)平底 96 孔板多道移液器無菌多道移液器容器ES 生長培養基ES 分化培養基無 Ca2+?和 Mg2+?
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
將基因轉移至未分化ES細胞實驗
ES細胞電穿孔 將ES克隆挑取到96孔板 分配96孔板上細胞用于凍存和體外分化 融化96孔板上的細胞 ? ? ? ? ? ? 實驗材料
將基因轉移至未分化ES細胞實驗—將ES克隆挑取到96孔板
儀器、耗材ES 生長培養基neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板無菌吸頭微量移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:ES 生長培養基,含 300 μg/ml G418 和青霉素/鏈霉素96 孔平底 neoR-MEF 滋養板96 孔 U-底板細而圓的無菌吸頭微量移液器(10~100 μl)8 道移
將基因轉移至未分化ES細胞實驗—融化96孔板上的細胞
儀器、耗材ES 細胞凍存板MEF 滋養板塑料盒ES 生長培養基微量移液器實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:96 孔 ES 細胞凍存板24 孔 MEF 滋養板塑料盒ES 生長培養基微量移液器2. 在塑料盒內裝入無菌水,置溫箱中預熱。3. 從 -80℃ 冰箱中取出 96 孔 ES 細胞板。4. 欲融化的
植物細胞的脫分化和分化培養
一、實驗原理 分化了的植物根、莖、葉細胞往往具有全能性,在一定條件下進行離體培養,給于一定的營養與激素,可以脫分化為愈傷組織,由愈傷組織制備成細胞懸浮液,在一定的條件下經振蕩培養,逐漸形成具有兩極性的胚狀體,經過進一步的分化培養,給于不同的營養和激素成分,又可以生出完整的
牛ES細胞的分離培養相關介紹
Saito等在加有LIF的培養基中對牛ICM進行培養,分離得到牛ES細胞并進行傳代。Sims等使用與一般ES細胞分離完全不同的低密度培養法,使用BRL(buffaloratliver)條件培養基并添加亞硒酸鈉、胰島素、運鐵蛋白和50mL/L胎牛血清,培養6d~10d,得到15個ES細胞系,將其作
大鼠ES細胞的實驗相關介紹
IannacconePM等從大鼠PVG近交系分離克隆大鼠ES細胞系-RESC-01,該細胞系對SSEA-1和AKP呈陽性,在大鼠胎兒成纖維細胞飼養層上能很好的增殖,在體內環境能分化形成多種細胞類型。RESC-01細胞系在體外懸浮培養時形成的胚體出現有節律的收縮運動,將其注入囊胚并移植假孕母鼠能生
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
試劑、試劑盒PBS胰酶溶液儀器、耗材MEF 滋養板巴斯德吸管ES 生長培養基實驗步驟1. 準備下列試劑和材料:60 mm MEF 滋養板(接種不能超過 7 天)帶棉塞無菌巴斯德吸管無 Ca2+?和 Mg2+?PBSES 生長培養基胰酶溶液2. PBS 沖洗 ES 細胞,巴斯德吸管加胰酶溶液覆蓋培養皿
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 胰酶溶液 儀器、耗材 MEF 滋養板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠多能ES細胞的增殖實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 PBS 胰酶溶液 儀器、耗材 MEF 滋養板 巴斯德吸管 ES 生
小鼠胚胎干細胞培養實驗——體外分化法
小鼠胚胎干細胞培養可以:(1)細胞保種;(2)用于干細胞研究;(3)用于細胞生理學、形態學等研究;(4)動物克隆。實驗方法原理胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇(第3步),在有bFGF存在的情況下擴增(第4步)并最終分化在第5步
THP1細胞的培養及分化
我是生物領域的,就生物實驗外包而言,對于實驗外包公司,他們能夠充分利用手中的技術及市場信息資源,利用較小的成本,完成不同單位的課題項目,避免了不同單位采購不常用設備的花費,和試劑耗材的浪費。因此對于一些研究條件比較差的實驗室來說,選擇單位以外提供的實驗外包服務是一個相當不錯的選擇。其次要看下你選擇單
ES細胞定向培養發育成卵的方法介紹
ES細胞具有全能性。在體外轉染適當的基因后,培養液中加入適當的誘導分化因子,可使ES細胞定向分化為卵母細胞。現如今用于體外成熟方面的卵母細胞來自三類卵泡:微小的相對休止的原始卵泡;中等大小的生長中卵泡;大的趨向成熟排卵的卵泡。針對這三類卵泡,體外成熟培養條件雖不一樣,但要解決的核心問題均為核與胞質的
ES細胞打靶技術介紹
你聽說過喀邁拉獸(chimera)嗎?沒錯,就是古希臘神話故事中一只會噴火的怪獸,這種怪獸擁有獅頭、羊身、蛇尾,像是由幾種動物拼成的。或許你知道喀邁拉獸,但你是否知道在生物遺傳學中也有一種名為喀邁拉的動物嗎?那這神奇的怪獸與我們生物領域中的ES細胞基因打靶到底有什么關系呢?本期話題,咱們就一起來聊聊
脂肪來源干細胞ASCs特征及分化實驗—脂肪干細胞神經分化
在培養過程中,ASCs 可在很長時間內保持未分化狀態。ASCs 具有成纖維細胞樣形態,胞內缺乏脂肪細胞中所見的脂滴。體外擴增后,ASCs 的表型會發生改變,主要體現在細胞表面蛋白和細胞因子表達的變化。ASCs 的表型與骨髓和骨骼肌來源的干細胞相似。免疫組化染色發現,誘導的 ASCs 可以表達神經細胞
脂肪來源干細胞ASCs特征及分化實驗—脂肪干細胞脂肪分化
實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒脂肪誘導培養基脂肪細胞生長培養基PBSA儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a)吸去培養基。(b)加人PBSA潤洗細胞。(c)加入脂肪誘導培養基,將培養瓶放回溫箱。(d)三天后,將誘導培養基更換成脂肪細胞生長培養。注意事項其他培養基配方:成脂誘導培養基:DMEM/F12 1×、胎
脂肪來源干細胞ASCs特征及分化實驗——脂肪干細胞軟骨分化
實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒成軟骨誘導培養基PBSA儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a) 吸去培養基(b) 加人PBSA潤洗細胞。(c) 加人成軟骨誘導培養基,將培養瓶放回溫箱注意事項其他培養基配方:成軟骨誘導培養基:DMEM(低糖)1×、丙酮酸鈉110 mg/L、ITS+ 1%、抗壞血酸-2-磷酸鹽0
細胞培養的分化發育與細胞毒試驗
高等動物真核細胞分化的研究是比較困難的,現在利用體外培養對分化進行研究,則比如說對已經知道的外界因素進行刺激后。 有些細胞群體可發生改變,這些改變可以被認為進行監測,并進行研究細胞分化以及發育過程中相互作用以及細胞內控制的機制。 在細胞培養技術應用中,廣泛進行多種物質的毒性試驗,雖然體外細胞培養的結
干細胞分化類型或可受培養凝膠影響
干細胞的命運可受到它們過去所在環境的強度的影響,這是《自然—材料學》上一項研究的結論。 先前研究認為干細胞當前所處環境的機械性影響——比如培養用凝膠的硬度——能夠引導其分化的方向。Kristi Anseth等人發現人體間質干細胞的培養過程,特別是采用不同硬度凝膠培養干細胞所用的時間,也
脂肪來源干細胞ASCs的特征及分化實驗—脂肪干細胞骨分化
實驗材料脂肪干細胞試劑、試劑盒成骨誘導培養基PBSA儀器、耗材培養瓶實驗步驟(a)吸去培養基。(b)加人PBSA潤洗細胞。(c)加人成骨誘導培養基,將培養瓶放回溫箱。注意事項其他培養基配方:成骨誘導培養基:DMEM(高糖)1×、胎牛血清10%、β-甘油磷酸10 mmol/L、抗壞血酸-2-磷酸鹽0.
關于細胞培養的體內、外細胞的差異和分化
1、差異:細胞離體后,失去了神經體液的調節和細胞間的相互影響,生活在缺乏動態平衡相對穩定環境中,日久天長,易發生如下變化:分化現象減弱;形態功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡;或發生轉化獲得不死性,變成可無限生長的連續細胞系或惡性細胞系。因此,培養中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體,
胚胎干細胞培養標準操作規程(SOP)
一、細胞多能性胚胎干細胞產生于小鼠胚泡1.表達綠色熒光蛋白(EGFP)的B5-ES細胞。由Dr. Nagy的實驗室制備。 2.D3-ATCC; CRL-1934. 我們得到時大約傳了17代。 3.J1-由Dr. Jaenish的實驗室友情提供。我們得到時大約傳了7-9代。 4.J1rtTA-r
有關胚胎干細胞的分化的相關內容
ES細胞的全能性指ES細胞在解除分化抑制的條件下能參與包括生殖腺在內的各種組織的發育潛力,即ES細胞具有發育成完整動物體的能力,可以為細胞的遺傳操作和細胞分化研究提供豐富的試驗材料。ES細胞發育全能性的標志是ES細胞表面表達時相專一性胚胎抗原(Stagespecificembryonicant,