1. 準備下列試劑和材料:
培養懸液中的單一胚胎樣體
6 孔組織培養板
帶棉塞巴斯德吸管
明膠包被的玻璃蓋玻片
無菌鑷子
ES 分化培養基
2. 準備明膠包被的玻璃蓋玻片
3. 用無菌鑷子在 6 孔組織培養板的每孔中放一塊明膠包被的玻璃蓋玻片。
4. 在生物安全柜中取下培養板的蓋,紫外線下照射 3~5 分鐘,殺死可能污染的細菌。
5. 用帶棉塞巴斯德吸管把含有一個單一胚胎樣體的一小滴 ES 細胞懸液轉移到蓋玻片中心。
6. 孵育 4~5 小時,使單一胚胎樣體附著于明膠表面。保持培養物濕潤。
7. 吸附后,每孔中緩慢加入 2 ml 分化培養基(預熱至 37℃)。注意不要沖掉細胞。
8. 培養基變黃后換液,至少每周一次,加 2 ml 分化培養基。
9. 7 天內可觀察到心肌細胞的自動收縮。
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