Science揭示細胞凋亡期間,mtDNA逃離線粒體機制
在一項新的研究中,由澳大利亞莫納什大學生物醫學發現研究所的Benjamin Kile教授領導的一個國際研究團隊發現并拍攝了在細胞死亡期間線粒體DNA(mtDNA)逃離線粒體(細胞內產生能量的細胞器)的確切時刻。相關研究結果發表在2018年2月23日的Science期刊上,論文標題為“BAK/BAX macropores facilitate mitochondrial herniation and mtDNA efflux during apoptosis”。細胞凋亡期間,線粒體DNA(綠色)逃離線粒體(紅色)。圖片來自Kate McArthur博士、Lachlan Whitehead博士和美國珍妮莉婭研究學院高級成像中心。 線粒體具有雙重功能:它們是讓細胞保持存活所必不可少的,但是當遭受損傷時,它們能夠激活機體自身的免疫系統,從而產生潛在的破壞性后果。鑒于mtDNA與細菌DNA(它們具有共同的祖先)有很多相似之處,身體會......閱讀全文
細胞凋亡線粒體通路相關介紹
線粒體通路,即通過線粒體釋放凋亡酶激活因子激活 Caspase。線粒體是細胞生命活動控制中心,它不僅是細胞呼吸鏈和氧化磷酸化的中心,而且是細胞凋亡調控中心。此通路由含BH3 結構域的Bcl-2 家族成員(Bid、 Bad、 Bim、 Harikari 、Noxa等)與另外的結合在線粒體外膜面或存在于
細胞化學詞匯線粒體DNA
中文名稱:線粒體DNA外文名稱:Mitochondrial DNA,mtDNA定?????? 義:線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。?
細胞化學基礎線粒體DNA
線粒體DNA是線粒體中的遺傳物質,線粒體能為細胞產生能量(ATP),是在細胞線粒體內發現的脫氧核糖核酸特殊形態。線粒體是為細胞提供能量(ATP)的細胞器。一個線粒體中一般有多個DNA分子。它們攜帶著自己的DNA——mtDNA,而這些基因的突變能引起線粒體疾病。雖然疾病癥狀是多變的,但大腦、肌肉和心臟
細胞凋亡的檢測—早期(細胞線粒體膜蛋白法)
實驗步驟展開
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理?分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。在
細胞凋亡檢測操作流程三JC1檢測凋亡細胞線粒體膜電...
細胞凋亡檢測操作流程三--JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變凋亡檢測操作流程??三、JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變BD? MitoScreen (JC-1)線粒體膜電位檢測試劑盒(551302):組分描述JC-1(染料)4瓶,每瓶用于25個樣本。凍干粉,使用前稀釋至儲存液(Stock Sol
DNA-ladder法檢測細胞凋亡
發生細胞凋亡時,內源性核酸酶被激活,染色體DNA鏈在核小體之間被切割,形成180~200個堿基或其整數倍的DNA片段,將這些DNA片段抽提出來進行電泳,可得到DNA梯狀條帶(DNA ladder)。一、材料與試劑凋亡細胞;蛋白酶K(500μg/ml)8mol/L 醋酸鉀白細胞裂解液:pH8.0,10
DNA-ladder法檢測細胞凋亡
實驗概要發生細胞凋亡時,內源性核酸酶被激活,染色體DNA鏈在核小體之間被切割,形成180~200個堿基或其整數倍的DNA片段,將這些DNA片段抽提出來進行電泳,可得到DNA梯狀條帶(DNA ladder)。主要試劑蛋白酶K(500μg/ml)8mol/L?醋酸鉀白細胞裂解液:pH8.0,10mmol
DNA-ladder法檢測細胞凋亡
發生細胞凋亡時,內源性核酸酶被激活,染色體DNA鏈在核小體之間被切割,形成180~200個堿基或其整數倍的DNA片段,將這些DNA片段抽提出來進行電泳,可得到DNA梯狀條帶(DNA ladder)。一、材料與試劑凋亡細胞;蛋白酶K(500μg/ml)8mol/L 醋酸鉀白細胞裂解液:pH8.0,10
DNA片斷化檢測細胞凋亡
細胞凋亡時主要的生化特征是其染色質發生濃縮, 染色質DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長的DNA大片段, 或180~200bp整數倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。細胞經處理后,采用常規方法分離提純DNA,進行瓊脂糖凝膠和溴
如何證明線粒體與凋亡細胞息息相關
線粒體在細胞凋亡過程中最重要的一點在于它可釋放能夠激活Caspases的蛋白。在無細胞的體系中,自發的、可以由Bcl-2抑制的染色質聚集和DNA片段化依賴于線粒體的存在,進而發現實際上是依賴于Cyto-c從線粒體中的釋放。從線粒體釋放的Cyto-c與Apaf-1、Procaspase 9結合在一起形
細胞凋亡檢測實驗——線粒體膜勢能的檢測
實驗方法原理線粒體在細胞凋亡的過程中起著樞紐作用,多種細胞凋亡刺激因子均可誘導不同的細胞發生凋亡,而線粒體跨膜電位的下降,被認為是細胞凋亡級聯反應過程中最早發生的事件,它發生在細胞核凋亡特征(染色質濃縮、DNA 斷裂)出現之前,一旦線粒體DYmt 崩潰,則細胞凋亡不可逆轉。?線粒體跨膜電位的存在,使
線粒體在細胞凋亡中有哪些關鍵作用
線粒體屬于內源性caspase-induced凋亡途徑中的中心細胞器。其中第一個線粒體源的凋亡促進因子cytc的釋放將會在細胞質中招募apaf1和caspase9,形成凋亡復合體,凋亡復合體中caspase9相互活化,最終活化多種效應caspase(3等)。第二個發現的線粒體凋亡因子smac,在凋亡
關于細胞凋亡細胞DNA-含量的測定
細胞凋亡時,核酸內切酶激活,導致DNA 斷裂,這是凋亡的特征性表現,也為FCM 鑒別凋亡細胞奠定了基礎。而檢測細胞凋亡DNA 斷裂的方法中,最常用、最簡便的就是細胞DNA 含量分析。當細胞用乙醇、TrtionX—100 處理后細胞膜上出現漏洞,小片段DNA 從細胞內釋放出來,使其DNA 含量低于
細胞化學基礎線粒體DNA組成結構
研究人員發明了轉換卵細胞基因材料的方法,用擁有健康線粒體的卵細胞取代攜帶錯誤線粒體DNA的卵細胞。結果是,胚胎會攜帶來自母親和父親的核DNA,以及卵細胞捐獻者的線粒體DNA。mtDNA雖能合成蛋白質,但其種類十分有限。迄今已知,mtDNA編碼的RNA和多肽有:線粒體核糖體中2種rRNA(12S及16
Gasdermin蛋白增強線粒體凋亡信號,抑制癌細胞生長
半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)可以剪切Gasdermin E (GSDME/DFNA5)釋放出GSDME-N結構域,從而通過在細胞膜上形成孔洞介導細胞焦亡。圖片來源:《Nature Communications》 近日來自托馬斯杰斐遜大學(Thomas Jefferson Un
Science揭示細胞凋亡期間,mtDNA逃離線粒體機制
在一項新的研究中,由澳大利亞莫納什大學生物醫學發現研究所的Benjamin Kile教授領導的一個國際研究團隊發現并拍攝了在細胞死亡期間線粒體DNA(mtDNA)逃離線粒體(細胞內產生能量的細胞器)的確切時刻。相關研究結果發表在2018年2月23日的Science期刊上,論文標題為“BAK/BA
細胞凋亡檢測實驗——DNA-ladder法
實驗方法原理發生細胞凋亡時,內源性核酸酶被激活,染色體DNA鏈在核小體之間被切割,形成180~200個堿基或其整數倍的DNA片段,將這些DNA片段抽提出來進行電泳,可得到DNA梯狀條帶(DNA ladder)。?實驗材料凋亡細胞試劑、試劑盒蛋白酶K醋酸鉀白細胞裂解液Tris-HClNaClEDTAS
細胞凋亡檢測操作流程2——BrdU檢測凋亡細胞DNA斷裂片段
凋亡檢測操作流程二、?BrdU檢測凋亡細胞DNA斷裂片段相關試劑及組分:一步法: APO-DIRECT試劑盒(貨號:556381): PartA(4°C保存)PartB(-20°C保存)PI/RNase A SolutionFITC-dUTPReaction BufferTdT EnzymeRins
凋亡中線粒體功能評價實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 CMXRos 儲存液PBS實驗步驟 1. 使用前用 DMSO 配置 1 mmol/L 的 CMXRos 儲存液,建議活細胞使用濃度 25~40 mol/L,后續將固定的細胞使用濃度為 50~200 mmol/L。為減少假象,熒光染料濃度應盡可能低。2. 如是貼壁細胞,將細
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
凋亡中線粒體功能評價實驗
△ψm的顯微分析 △ψm的流式細胞計量術分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
線粒體介導的凋亡過程介紹
當線粒體的膜電位下降,線粒體膜通透性增加,線粒體內促凋亡因子(例如:當線粒體的膜電位下降,線粒體膜通透性增加,線粒體內促凋亡因子(例如:Cyt C、AIF、SMAC/DIABLO、HTRA2/OMI、ENDOG)釋放到胞質中。Cyt? C釋放到胞內以后,與Apaf-1相互作用,在ATP和dATP的協
細胞化學基礎線粒體DNA基本性質
與核基因組相比,線粒體基因組有如下性質:所有的基因都位于一個單一的環狀DNA分子上。遺傳物質不為核膜所包被。DNA不為蛋白質所壓縮。基因組沒有包含那么多非編碼區域(調控區域或“內含子”)。一些密碼子與通用密碼子不同。相反,與一些紫色非硫細菌相似。一些堿基為兩個不同基因的一部分(重疊基因):某堿基作為
癌細胞線粒體DNA漂移的分子機理
通過對57例結腸癌患者的基因組進行基因分析,研究人員發現患者體細胞核內的平均線粒體DNA數量比健康人高4.42倍。“這表明,遷移到核基因組中的線粒體DNA可能對癌癥的發展起重要作用,”本文的共同作者,來自UAB公共衛生學院的生物統計學教授Hemant K. Tiwari博士和UAB醫學院遺傳學教
簡述細胞凋亡與線粒體的結構與功能的關系
如果線粒體有大量PT孔道形成,細胞ATP濃度很快下降,則在致凋亡的蛋白酶被活化前細胞就壞死了。而如果PT孔道的誘導生成是一種比較緩和與持續的狀態,在細胞ATP濃度下降前專一的蛋白酶被激活;而另一方面ΔΨm的耗散產生的超氧陰離子則導致細胞死亡。細胞凋亡是一把雙刃劍。一方面是機體發育的正常過程,另一
細胞凋亡過程中線粒體的通透性轉變
在細胞凋亡過程中線粒體跨膜電位的耗散主要是由于線粒體內膜的通透性轉變,這是由于生成了動態的由多個蛋白質組成的位于線粒體內膜與外膜接觸位點的通透性轉變孔道(PT孔道)。PT孔道由線粒體各部分的蛋白質與細胞質中蛋白質聯合構成。這包括細胞液蛋白:己糖激酶,線粒體外膜蛋白:外周苯并二嗪(benzodia
DNA降解斷裂法檢測腫瘤細胞凋亡
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凋亡的DNA降解選擇性發生在核小體間DNA,提取細胞總DNA或者選擇性提取小分子量DNA后電泳可檢查獨特的核小體間片段DNA。 實驗材料 腫
DNA降解斷裂法檢測腫瘤細胞凋亡
細胞DNA提取 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凋亡的DNA降解選擇性發生在核小體間DNA,提取細胞總DNA或者選擇性提取小分子量DNA后電泳可檢查獨特的核小體間片段DNA。