等位基因特異性PCR的技術特點
等位基因特異性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物與模板之間的堿基錯配可以有效地抑制PCR反應，進而達到模板區分（等位基因區分）的目的。......閱讀全文
等位基因特異性PCR的技術特點
等位基因特異性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物與模板之間的堿基錯配可以有效地抑制PCR反應，進而達到模板區分（等位基因區分）的目的。
等位基因特異性PCR技術的原理
由于PCR過程中引物延伸是3'端開始的，所以3'末端的堿基對引物的延伸來說處于至關重要的位置。如果這個堿基與模板互補，則引物能從不間斷延伸，PCR可以正常進行，得到特定長度擴增帶。反之，則不能延伸。所以只要將與正常等位基因所不同的那個突變堿基安排在引物3'最末端，當用某一含突
等位基因特異性PCR技術的研究發展
ASPCR的發展，主要是圍繞提高3’末端堿基錯配分辨率來進行的。為了提高ASPCR對末端堿基錯配的分辨力，人們嘗試了許多方法。比如：改換另一條鏈進行分析以規避這些錯配延伸率高的堿基組合；把控制PCR反應的關鍵成分稀釋到接近極限的濃度；在檢測用引物的3'末端附近人為引入新的錯配；截短Taq D
等位基因特異性PCR的功能
等位基因特異性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物與模板之間的堿基錯配可以有效地抑制PCR反應，進而達到模板區分（等位基因區分）的目的。
等位基因特異性PCR的應用
由于PCR過程中引物延伸是3'端開始的，所以3'末端的堿基對引物的延伸來說處于至關重要的位置。如果這個堿基與模板互補，則引物能從不間斷延伸，PCR可以正常進行，得到特定長度擴增帶。反之，則不能延伸。所以只要將與正常等位基因所不同的那個突變堿基安排在引物3'最末端，當用某一含突
等位基因特異性PCR的原理
等位基因特異性PCR（ allele specific PCR，AS-PCR ），是指利用引物與模板之間的堿基錯配可以有效地抑制PCR反應，進而達到模板區分（等位基因區分）的目的。
等位基因特異性PCR的工作原理
由于PCR過程中引物延伸是3'端開始的，所以3'末端的堿基對引物的延伸來說處于至關重要的位置。如果這個堿基與模板互補，則引物能從不間斷延伸，PCR可以正常進行，得到特定長度擴增帶。反之，則不能延伸。所以只要將與正常等位基因所不同的那個突變堿基安排在引物3'最末端，當用某一含突
等位基因特異性PCR近期改進方法
1. 在3‘末端附近引入額外錯配2. 腺苷三磷酸雙磷酸酶介導的等位基因特異PCR法(apyrase-mediated allelespecific extension, AMASE)3. 焦磷酸解激活的聚合反應法(Pyrophosphorolysis-activated polymerization
等位基因特異性PCR早期的改進方法
Bottema 等（1993）提出兩個解決方案：一是設計引物時，如果引物3'末端可能與樣品模板形成延伸率高的堿基錯配，那么可以考慮以其互補鏈作為模板，從而避開這些高延伸率的錯配。二是把控制PCR反應的關鍵成分稀釋到接近極限的濃度。由于錯配延伸效率畢竟比正配延伸要差，在擴增資源極低的情況下，錯
多重等位基因特異性PCR芯片在聽力篩查中的應用
?????? 1. Abstract We demonstrate a new method, using a universal array approach termed multiplex allele-specific PCR-based universal array (ASPUA),
等位基因特異性寡核苷酸印跡的方法特點
中文名稱等位基因特異性寡核苷酸印跡英文名稱allele specific oligonucleotide blot定 義一種測定基因突變的方法。即應用等位基因特異性寡核苷酸(ASO)僅與完全互補的序列結合，故1個堿基錯配即足以阻止ASO探針與目的基因片段雜交；將ASO探針連接dT多聚尾巴，結合于固
等位基因特異性擴增法簡介
等位基因特異性擴增法（allele -specific amplificarion,ASA) 是基于PCR技術的一種單核苷酸突變檢測法，是分析已知堿基替代或微小片段缺失和插入型突變的常規技術。在PCR 的引物設計中，根據已知突變位點性質在引物3 ' 端或中間設計一錯配堿基，使之僅能與突變
PCR技術的特點介紹
1、有一定程度單核苷酸錯誤摻入? ? TaqDNA聚合酶缺少3’-5’核酸外切酶活性，因而不能糾正反應中發生的核苷酸錯誤摻人；與大腸桿菌聚合酶IKlenow片段相比較，用TaqDNA聚合酶的反應錯誤摻人相對多些。但在PCR擴增過程中，其錯配率一般只有約1／萬，足可以供特異性分析。2、操作簡便、快速?
PCR反應技術的特點
1、特異性強決定 PCR 反應特異性的因素有:①引物與模板 DNA 特異分子的正確結合;②堿基配對原則;③ Taq DNA 聚合酶合成反應的忠實性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵,它取決于所設計引物的特異性及退火溫度。在引物確定的條件下,PCR 退火溫度越高,擴增的特異性越
特異性脫敏治療的技術特點
特異性脫敏治療是當前對哮喘等過敏性疾病采用的治療方法之一 ，它是在確定了使病人發生過敏反應的過敏原之后，將過敏原制成各種不同濃度的提取液，給病人反復注射或通過其他途徑與病人反復接觸，劑量由小到大，濃度由低到高，以提高病人對此類特異性過敏物質的耐受性，能起到一定的預防和治療作用。但它適用于外源性過敏，
豬等位基因特異性表達的時空特異性首獲系統研究
近日，我國學者首次系統研究了豬等位基因特異性表達（ASE）的時空特異性，揭示了在不同發育時期、不同組織中的親本決定型和等位基因型決定型兩種ASE類型。相關成果在線發表于《自然-通訊》雜志。現代養豬產業普遍采用專門化品系選育和配套系雜交，其目的是充分利用雜種優勢。基因表達調控是將基因型轉化為表型的關鍵
反向PCR（Inverse－PCR）技術的定義和特點
1.概述：反向PCR(reverse PCR)是用反向的互補引物來擴增兩引物以外的未知序列的片段，而常規PCR擴增的是已知序列的兩引物之間DNA片段.實驗時選擇已知序列內部沒有切點的限制性內切酶對該段DNA進行酶切，然后用連接酶使帶有粘性末端的靶序列環化連接，再用一對反向的引物進行PCR，其擴增產物
PCR技術的反應特點介紹
特異性強 PCR反應的特異性決定因素為： ①引物與模板DNA特異正確的結合； ②堿基配對原則； ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性； ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDN
增加PCR特異性
增加PCR特異性（一）引物設計細心地進行引物設計是PCR中最重要的一步。理想的引物對只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火。設計糟糕的引物可能會同擴增其他的非目的序列。下面的指導描述了一個可以增加特異性的引物所具有的令人滿意的特點：1.典型的引物18到24個核苷長。引物需要足夠長，保證序列獨特性
增加PCR特異性
引物設計 ?細心地進行引物設計是PCR中zui重要的一步。理想的引物對只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火。設計糟糕的引物可能會同擴增其他的非目的序列。下面的指導描述了一個可以增加特異性的引物所具有的令人滿意的特點：??1.典型的引物18到24個核苷長。引物需要足夠長，保證序列獨特性，并降低序
關于甲基化特異性PCR的技術原理介紹
甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR,MS-PCR)是一種特異位點甲基化檢測技術。 １、技術原理： 其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因組DNA，未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。因此從理論上講，用不同的引物做PCR，即可檢測出這種差異，從而確定基
巢氏PCR（Nested－PCR）技術的定義和特點
1.定義：也稱套式PCR是指利用兩套PCR引物（巢式引物）進行兩輪PCR擴增反應。在第一輪擴增中，外引物用以產生擴增產物，此產物在在內引物的存在下進行第二輪擴增。在這種技術中，首先用一對外引物進行第1輪PCR，然后再使用第1對引物擴增的DNA 序列內部的一對引物再次擴增。2.優點：由于巢式PCR反應
等位基因特異性寡核苷酸印跡的功能作用
一種測定基因突變的方法。即應用等位基因特異性寡核苷酸(ASO)僅與完全互補的序列結合，故1個堿基錯配即足以阻止ASO探針與目的基因片段雜交；將ASO探針連接dT多聚尾巴，結合于固相支持物上，受檢基因在雜交液中，生物素標記的DNA可結合辣根過氧化物酶，借助抗生物素系統使無色基質變成有色沉淀，從而進行測
等位基因特異性寡核苷酸印跡的方法介紹
中文名稱等位基因特異性寡核苷酸印跡英文名稱allele specific oligonucleotide blot定 義一種測定基因突變的方法。即應用等位基因特異性寡核苷酸(ASO)僅與完全互補的序列結合，故1個堿基錯配即足以阻止ASO探針與目的基因片段雜交；將ASO探針連接dT多聚尾巴，結合于固
序列特異性引物的定義和技術特點
序列特異性引物指一種測定基因突變的方法。即利用針對點突變的2個等位特異性寡核苷酸(ASO)引物(A、B標記其中之一)與另一共同引物（C）組成引物系統；在引物延伸時，A與B同時競爭靶序列上同一復性位點，擴增反應后，經凝膠電泳及放射自顯影，膠片上的顯帶是標記同位素的引物所擴增的產物。
PCR的特異性指什么
由于堿基互補配對原則導致的PCR在進行反應時所合成的DNA永遠是特異性的（和起始DNA相同）
提高PCR特異性的方法
?熱啟動PCR是除了好的引物設計之外，提高PCR特異性最重要的方法之一。盡管Taq DNA聚合酶的最佳延伸溫度在72℃，聚合酶在室溫仍然有活性。因此，在進行PCR反應配制過程中，以及在熱循環剛開始，保溫溫度低于退火溫度時會產生非特異性的產物。這些非特異性產物一旦形成，就會被有效擴增。在用于引物設計的
影響PCR特異性的因素
①退火步驟的嚴格性：提高退火溫度可以減少不匹配的雜交，從而提高特異性。 ②減短退火時間及延伸時間可以減少錯誤引發及錯誤延伸。 ③引物二聚體是最常見的副產品，降低引物及酶的濃度也可以減少錯誤引發，尤其是引物的二聚化。 ④改變MgCl2(有時KCl)濃度可以改進特異性，這可能是提高反應嚴格性或
標記PCR和彩色PCR技術的定義及特點介紹
標記PCR(Labelled Primers，LP-PCR) 是利同位素或熒光素對PCR引物的5‘端進行標記，用來檢測靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR，CCAPCR)，是LP-PCR的一種，它用不同顏色的熒光染料；標記引物的5'端，因
免疫PCR(immunoPCR)技術的定義及特點介紹
1.定義：免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗體反應的特異性和PCR擴增反應的極高靈敏性來檢測抗原，尤其適用于極微量抗原的檢測。是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統。主要步驟有三個:①抗原-抗體反應，②與嵌合連接分子結合，③PCR擴增嵌合連接分子中的DNA(一般為質粒DNA)。?