分光光度法的原理

　　當一束強度為0的單色光垂直照射某物質的溶液后,由于一部分光被體系吸收,因此透射光的強度降至,則溶液的透光率為:

　　根據朗伯(Lambert)-比爾(Beer)定律:

　　A=abc

　　式中為吸光度，為溶液層厚度（cm），為溶液的濃度（g/dm^3)， a為吸光系數。其中吸光系數 與溶液的本性、溫度以及波長等因素有關。溶液中其他組分（如溶劑等）對光的吸收可用空白液扣除。

　　由上式可知，當固定溶液層厚度l和吸光系數a時，吸光度A與溶液的濃度成線性關系。在定量分析時，首先需要測定溶液對不同波長光的吸收情況（吸收光譜），從中確定最大吸收波長 ，然后以此波長 的光為光源，測定一系列已知濃度c溶液的吸光度A，作出A~c工作曲線。在分析未知溶液時，根據測量的吸光度A，查工作曲線即可確定出相應的濃度。這便是分光光度法測量濃度的基本原理。