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  • 發布時間:2019-09-14 06:30 原文鏈接: 蘋果酸脫氫酶測定實驗

    • 基本方案

               

    實驗方法原理

    L-蘋果酸:NAD 氧化還原酶,MDH。


    L-蘋果酸 + NAD+? 草酰乙酸 + NADH + H+


    實驗首選逆反應。

    實驗材料

    MDH 稀釋溶液

    試劑、試劑盒

    磷酸鉀 NADH 草酰乙酸

    儀器、耗材

    分光光度計

    實驗步驟

    實驗所需「試劑」具體見「其他」


    0.98 ml 實驗混合物


    0.02 ml MDH 稀釋溶液


    25℃ 時,于 340 nm 處吸收值降低。NADPH 的吸收系數 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。

                展開           
    注意事項
    其他

    試劑


    0.1 mol/l 磷酸鉀,pH 7.5


    0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于 10 ml H2O)


    0.1 mol/l 草酰乙酸(Mr=132.1,132 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/l 磷酸鉀,pH 7.5 中)


    MDH 原料溶液(例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸鉀 pH7.5 稀釋至 1 IU/ml)

    展開


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