基本方案
實驗方法原理 |
L-蘋果酸:NAD 氧化還原酶,MDH。 L-蘋果酸 + NAD+? 草酰乙酸 + NADH + H+ 實驗首選逆反應。 |
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實驗材料 | MDH 稀釋溶液 |
試劑、試劑盒 | 磷酸鉀 NADH 草酰乙酸 |
儀器、耗材 | 分光光度計 |
實驗步驟 |
實驗所需「試劑」具體見「其他」 0.98 ml 實驗混合物 0.02 ml MDH 稀釋溶液 25℃ 時,于 340 nm 處吸收值降低。NADPH 的吸收系數 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。
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注意事項 | |
其他 |
試劑 0.1 mol/l 磷酸鉀,pH 7.5 0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于 10 ml H2O) 0.1 mol/l 草酰乙酸(Mr=132.1,132 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/l 磷酸鉀,pH 7.5 中) MDH 原料溶液(例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸鉀 pH7.5 稀釋至 1 IU/ml)
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