綠色熒光蛋白的基本結構
野生型綠色熒光蛋白，最開始是 238 個氨基酸的肽鏈，約 25KDa。然后按一定規則，11 條β-折疊在外周圍成圓柱狀的柵欄；圓柱中，α-螺旋把發色團固定在幾乎正中心處。發色圖被圍在中心，能避免偶極化的水分子、順磁化的氧分子或者順反異構作用與發色團，致使熒光猝滅。熒光是熒光蛋白最特別的特點，而其中的發色團起著主要的作用。在 α-螺旋上的 65、66、67位氨基酸——絲氨酸、酪氨酸、甘氨酸經過環化、脫氫等作用后形成發色團。有意思的是，發色團形成過程是由外周柵欄上的殘基催化，底物只需要氧氣。這暗示綠色熒光蛋白被廣泛用于不同物種的潛力：在不同物種中能獨立表達成有功能的蛋白，而不需要額外的因子。不過，現在依然在討論準確的過程。發色團上的共軛 π鍵能吸收激發光能量，在很短的時間后，以波長更長的發射光釋放能量，形成熒光。......閱讀全文
綠色熒光蛋白的基本結構
野生型綠色熒光蛋白，最開始是 238 個氨基酸的肽鏈，約 25KDa。然后按一定規則，11 條β-折疊在外周圍成圓柱狀的柵欄；圓柱中，α-螺旋把發色團固定在幾乎正中心處。發色圖被圍在中心，能避免偶極化的水分子、順磁化的氧分子或者順反異構作用與發色團，致使熒光猝滅。熒光是熒光蛋白最特別的特點，而其中的
綠色熒光蛋白的結構特點
野生型綠色熒光蛋白，最開始是 238 個氨基酸的肽鏈，約 25KDa。然后按一定規則，11 條β-折疊在外周圍成圓柱狀的柵欄；圓柱中，α-螺旋把發色團固定在幾乎正中心處。發色圖被圍在中心，能避免偶極化的水分子、順磁化的氧分子或者順反異構作用與發色團，致使熒光猝滅。熒光是熒光蛋白最特別的特點，而其中的
綠色熒光蛋白的結構介紹
野生型綠色熒光蛋白，最開始是 238 個氨基酸的肽鏈，約 25KDa。然后按一定規則，11 條β-折疊在外周圍成圓柱狀的柵欄；圓柱中，α-螺旋把發色團固定在幾乎正中心處。發色圖被圍在中心，能避免偶極化的水分子、順磁化的氧分子或者順反異構作用與發色團，致使熒光猝滅。熒光是熒光蛋白最特別的特點，而其中的
綠色熒光蛋白簡介
綠色螢光蛋白（Green fluorescent protein；簡稱GFP），由下村脩等人于1962年在維多利亞多管發光水母中發現，其基因所產生的蛋白質，在藍色波長范圍的光線激發下，會發出綠色螢光，整個發光的過程中還需要冷光蛋白質水母素的幫助，冷光蛋白質與鈣離子（Ca2+）可產生交互作用。2008
綠色熒光蛋白的應用
由于熒光蛋白能穩定在后代遺傳，并且能根據啟動子特異性地表達，在需要定量或其他實驗中慢慢取代了傳統的化學染料。更多地，熒光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解決問題的新思路，也可能帶來更多有價值的新問題。
綠色熒光蛋白的應用特點
由于熒光蛋白能穩定在后代遺傳，并且能根據啟動子特異性地表達，在需要定量或其他實驗中慢慢取代了傳統的化學染料。更多地，熒光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解決問題的新思路，也可能帶來更多有價值的新問題。GFP和它的衍生物的可用性已經徹底重新定義熒光顯微鏡，以及它被用來在細胞生物學和其他生物學科的方
綠色熒光蛋白的發現過程
1994年，華裔美國科學家錢永健（Roger Yonchien Tsien）開始改造GFP，有多項發現。世界上用的大多數是錢永健實驗室改造后的變種，有的熒光更強，有的黃色、藍色，有的可激活、可變色。到一些不常用做研究模式的生物體內找有顏色的蛋白成為一些人的愛好，現象正如當年在嗜熱生物中找到以后應用廣
綠色熒光蛋白的功能介紹
綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，簡稱GFP)，是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質，從藍光到紫外線都能使其激發，發出綠色熒光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白，但傳統上，綠色熒光蛋白（GFP）指首先從維多利亞多管發光水母中分離的蛋白質。這種蛋白質最早是由下
綠色熒光蛋白的發現過程
1994年，華裔美國科學家錢永健（Roger Yonchien Tsien）開始改造GFP，有多項發現。世界上用的大多數是錢永健實驗室改造后的變種，有的熒光更強，有的黃色、藍色，有的可激活、可變色。到一些不常用做研究模式的生物體內找有顏色的蛋白成為一些人的愛好，現象正如當年在嗜熱生物中找到以后應用廣
綠色熒光蛋白（GFP）的應用
骨架和細胞分裂 Kevin Sullivan's 實驗室 酵母菌內SPB 和微管動力學 酵母菌中肌動蛋白的動力 果蠅中MEI-S332蛋白 果蠅有絲分裂和mRNA運輸 網丙菌屬細胞骨架 RNA剪切因子的核內運輸 網丙菌屬的趨化作用 網丙菌屬中細胞骨架動力和細胞運動 核
綠色熒光蛋白的發現過程
1994年，華裔美國科學家錢永健（Roger Yonchien Tsien）開始改造GFP，有多項發現。世界上用的大多數是錢永健實驗室改造后的變種，有的熒光更強，有的黃色、藍色，有的可激活、可變色。到一些不常用做研究模式的生物體內找有顏色的蛋白成為一些人的愛好，現象正如當年在嗜熱生物中找到以后應用廣
什么是綠色熒光蛋白
綠色熒光蛋白分子的形狀呈圓柱形，就像一個桶，負責發光的基團位于桶中央，因此，綠色熒光蛋白可形象地比喻成一個裝有色素的“油漆桶”。裝在“桶”中的發光基團對藍色光照特別敏感。當它受到藍光照射時，會吸收藍光的部分能量，然后發射出綠色的熒光。利用這一性質，生物學家們可以用綠色熒光蛋白來標記幾乎任何生物分子或
什么是綠色熒光蛋白？
綠色熒光蛋白分子的形狀呈圓柱形，就像一個桶，負責發光的基團位于桶中央，因此，綠色熒光蛋白可形象地比喻成一個裝有色素的“油漆桶”。裝在“桶”中的發光基團對藍色光照特別敏感。當它受到藍光照射時，會吸收藍光的部分能量，然后發射出綠色的熒光。利用這一性質，生物學家們可以用綠色熒光蛋白來標記幾乎任何生物分
綠色熒光蛋白GFP性質
GFP熒光極其穩定，在激發光照射下，GFP抗光漂白（Photobleaching）能力比熒光素（fluorescein）強，特別在450～490nm藍光波長下更穩定。 GFP需要在氧化狀態下產生熒光，強還原劑能使GFP轉變為非熒光形式，但一旦重新暴露在空氣或氧氣中，GFP熒光便立即得到恢復。而
綠色熒光蛋白的研究與應用
1962年，已經有文獻報道科學家從多管水母屬的發光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物發光性質的蛋白質。到了上世紀70年代，對生物發光的現象才有了一些新的進展。有科學家研究了多管水母屬生物發光系統的分子內能量轉移。到了九十年代初，科學家才克隆到
綠色熒光蛋白分子標記的研究
分子標記 作為一種新型的報告基因，GFP已在生物學的許多研究領域得到應用。利用綠色熒光蛋白獨特的發光機制，可將GFP作為蛋白質標簽（protein tagging），即利用DNA重組技術，將目的基因與GFP基因構成融合基因，轉染合適的細胞進行表達，然后借助熒光顯微鏡便可對標記的蛋白質進行細胞內
綠色熒光蛋白的概念和發現
綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，簡稱GFP)，是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質，從藍光到紫外線都能使其激發，發出綠色螢光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白，但傳統上，綠色熒光蛋白（GFP）指首先從維多利亞多管發光水母中分離的蛋白質。這種蛋白質最早是由下
綠色熒光蛋白融合抗體研究
融合抗體 近二十年來，抗體生成技術有了飛速發展，已經從細胞工程抗體（雜交瘤技術一單克隆抗體）發展到了第三代抗體：基因工程抗體，尤其是噬菌體抗體庫技術的出現，解決了人源抗體的研制問題，促進了各種性能優良抗體以及具有多種功能的抗體融合蛋白的開發。單鏈抗體（Single-chain variable
綠色熒光蛋白離心菌體能看到綠色嗎
本人親身體驗證明，真的可以看見，顏色類似于抹茶沙拉醬，破菌后可以看到明顯的亮綠色。當然跟表達量也有關系，本人表達量為4mg/L菌液。
綠色熒光蛋白的研究與使用歷史
1962年，已經有文獻報道科學家從多管水母屬的發光型水螅水母（luminous hydromedusan Aequorea）中提取到了具有生物發光性質的蛋白質。到了上世紀70年代，對生物發光的現象才有了一些新的進展。有科學家研究了多管水母屬生物發光系統的分子內能量轉移。到了九十年代初，科學家才克隆到
綠色熒光蛋白腫瘤發病機制的應用
GFP是一個分子量較小的蛋白，易與其他一些目的基因形成融合蛋白且不影響自身的目的基因產物的空間構象和功能。GFP 與目的基因融合，將目的基因標記為綠色，即可定量分析目的基因的表達水平，顯示其在腫瘤細胞內的表達位置和量的變化，為探討該基因在腫瘤發生、發展中的作用及其分子機制提供便利條件。 在腫瘤
綠色熒光蛋白的功能特點和作用
綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein，簡稱GFP)，是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質，從藍光到紫外線都能使其激發，發出綠色熒光。雖然許多其他海洋生物也有類似的綠色熒光蛋白，但傳統上，綠色熒光蛋白（GFP）指首先從維多利亞多管發光水母中分離的蛋白質。這種蛋白質最早是由下
LSCM綠色熒光融合蛋白表達載體的構建
綠色熒光融合蛋白表達載體的構建?綠色熒光蛋白(green fluorescent protein，GFP)?及其突變體能在各種不同的生物系統中表達，這對細胞生物學的研究具有重要意義。而熒光蛋白的折疊能力及其同細胞內蛋白的融合能力，使研究?者能直接在細胞體內觀察到蛋白質的特性。研究者不需要把蛋白質經過
綠色熒光蛋白基因與紅色熒光蛋白基因是同源的嗎
綠色熒光蛋白基因與紅色熒光蛋白基因是同源的（1）在該實驗中，綠色熒光蛋白基因是目的基因．（2）③是將目的基因導入受體細胞的過程，當受體細胞是動物細胞時，采用最多也最有效的方法是顯微注射技術．（3）GFP基因可以作為標記基因，標記基因的作用是鑒定受體細胞中是否含有目的基因．（4）動物細胞培養時，其培養
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些？
檢測方法：1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白（Clontech，NO.632502）? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些
檢測方法：1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白（Clontech，NO.632502）? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-
GFP綠色熒光蛋白的檢測方法有哪些
檢測方法：1、實驗準備? Modulus單管型多功能檢測儀? Blue熒光模塊(P/N 9200-040)? 微量適配器(P/N 9200-928)? 純化的rAcGFP1蛋白（Clontech，NO.632502）? 200ul加樣器與20ul加樣器? TE Buffer (10 mM Tris-
綠色熒光蛋白在胞外環境能激發熒光嗎
綠色熒光蛋白在胞外環境能激發熒光嗎綠色熒光蛋的發光機理比熒光素/熒光素酶要簡單得多。一種熒光素酶只能與相對應的一種熒光素合作來發光，而綠色熒光蛋白并不需要與其他物質合作，只需要用藍光照射，就能自己發光。在生物學研究中，科學家們常常利用這種能自己發光的熒光分子來作為生物體的標記。將這種熒光分子通過化學
T克隆綠色熒光蛋白（GFP）基因實驗
【原理】經TaqDNA聚合酶擴增后的PCR產物末端都帶有單個A。正是基于這一原理，pGEM-T質粒經EcoRV切成平端后，在開口端加上一個T制成T載體，一方面避免了自身環化，另一方面由于T-A互補，從而提高了T載體與PCR產物之間的連接效率。由于T-A克隆只需純化PCR產物，因而操作較為簡便。pGE
綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位
一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法，在光鏡水平進行研究，不需要制樣，沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD，經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后，可產生一種綠色熒光，從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共