關于轉染試劑的簡介
哺乳動物的轉染技術在60年代末70年代初即已引入。 將外源DNA 導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類,即生物方法和物理化學方法。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、顯微注射、電穿孔、脂質體介導的轉染,以及最近出現的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術。生物方法則主要是以病毒作為載體,通過病毒感染的方式將外源DNA 導入到細胞中, 其中以逆轉錄病毒及腺病毒轉染系統最為常用。 其中病毒載體的特點是整和效率高, 可使外源基因在宿主細胞中長期表達,缺點是存在潛在的安全危險性。電穿孔法及顯微注射法的特點是轉染率較高,缺點是需要昂貴的儀器,前者對細胞的損傷較大,后者在導入DNA 時需要一個細胞一個細胞地注射,不適合大量細胞研究的需要。 磷酸鈣在良好的轉染條件下,可以在293T等細胞的轉染達到較高的轉染效率。但磷酸鈣轉染有一個突出的問題,非常不穩定,尤其受PH值的影響非常大,在實驗中使用的每種試劑都必須小心校準,保證質量,因為甚至偏離......閱讀全文
關于轉染試劑的簡介
哺乳動物的轉染技術在60年代末70年代初即已引入。 將外源DNA 導入哺乳動物細胞的方法大致可分為兩大類,即生物方法和物理化學方法。物理化學方法中常用的有磷酸鈣法、顯微注射、電穿孔、脂質體介導的轉染,以及最近出現的以高分子聚合物為載體的基因傳遞技術。生物方法則主要是以病毒作為載體,通過病毒感染
關于基因轉染技術的簡介
基因轉染技術將特定的遺傳信息傳遞到真核細胞 中,這種技術不但革新了生物學和醫學中許多基本問題的研究,也推動了診斷和治療方面的分子技術 發展,并使基因治療 成為可能。基因轉染已廣泛用于基因的結構和功能分析、基因表達與調控、基因治療與轉基因動物等研究。
各種轉染試劑的中文轉染方法
FuGENE6(Roche)轉染步驟: 轉染前一天將細胞分至培養板,轉染當天細胞應50-80%融合。將細胞以1-3×105/2 ml接種于6孔板后孵育過夜將達到如此密度。 將FuGENE6 Reagent在室溫孵育10-15分鐘。使用之前將FuGENE6顛倒混勻一下。 1. 在PCR管中加入不含血
關于轉染試劑的基本信息介紹
轉染(transfection)指真核細胞由于外源DNA摻入而獲得新的遺傳標志的過程。DNA轉染技術的發展對現代分子生物學產生了巨大的影響。基因轉染技術不僅是研究轉基因和基因表達的重要工具,而且是基因治療的關鍵步驟。理想的基因轉染試劑應該具有如下特點:高效轉染;安全;低細胞毒性;方法簡單;省時、
關于轉染試劑的歷史背景介紹
已有眾多的文獻報道,脂質體本身會參與細胞生理活動,引起基因表達的上調或下調。如參與PKC(蛋白激酶C)通路調節(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3
轉染試劑:Roche
???? 轉染試劑:Roche[選購寶典]現轉染市場多個新產品涌現而出,一些舊產品更弦易主。一提起羅氏的轉染試劑,大家肯定立馬想到Fugene 6/HD。即使Fugene 6/HD不在手,羅氏也毫不畏懼,因為它集合二十年的轉染經驗,推出了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP轉染試
RNA轉染試劑的對比
近期,上海公衛臨床研究中心的一位研究生應用兩種轉染試劑Turbofect transfection reagent(Thermo)和EntransterTM-R4000(Engreen)進行了一次RNA轉染比較。比較情況如下:實驗方法轉染試劑:Turbofect transfection reage
細胞轉染的簡介
轉染 ,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法
國際ZLRFect小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
介紹?RFect小核酸轉染試劑是國際知名科學家崔坤元博士領導我公司研發團隊在美國西雅圖實驗室研發成功的一種新型的小核酸轉染試劑。RFect可用來轉染siRNA、antisense RNA、microRNA等200bp以內的小分子RNA和DNA,轉染細胞包括絕大多數貼壁生長的細胞,如一般細胞株
如何優化PolyJet轉染試劑?
我們使用PolyJet DNA轉染試劑轉染表皮細胞及Raw267.4細胞非常有效,并且毒性很小。對于如何更好的優化PolyJet轉染試劑,我樂意分享以下幾點:1、DNA的質與量。DNA的純度對于轉染實驗至關重要。由E Coli制備的DNA,A260/280必須達到1.80甚至更高。對于6孔板,通常每
細胞轉染快準狠GeneCopoeia轉染試劑的適用細胞
細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的一種技術。根據哺乳動物細胞蛋白表達流程,細胞培養完成后需進行細胞轉染,根據不同的實驗目的可選擇不同的轉染方法。目前,常用的細胞轉染方法主要分為三類途徑:物理介導(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學介導(脂質體轉染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物
細胞轉染快準狠GeneCopoeia轉染試劑的適用細胞
細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的一種技術。根據哺乳動物細胞蛋白表達流程,細胞培養完成后需進行細胞轉染,根據不同的實驗目的可選擇不同的轉染方法。目前,常用的細胞轉染方法主要分為三類途徑:物理介導(電穿孔法,基因槍法、顯微注射法)、化學介導(脂質體轉染法、磷酸鈣共沉淀法、陽離子聚合物
單核細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
RFectMN單核細胞小核酸轉染試劑 ???????????????????????????????????????????????????????貨 ???號:BIOG-11024: 0.5ml?????? BIOG-11025: 1.0ml ?????????? BIOG-11026: 1.5m
RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑使用說明
RFectPM原代細胞小核酸轉染試劑(RFect原代細胞小核酸siRNA轉染試劑/miRNA轉染試劑)???????????????????????????????????????????????????????貨??? 號:BIOG-11014: 0.5ml????????? BIOG-11015
DNA體外轉染試劑_如何準備轉染所需的質粒DNA
轉染效率受到諸多因素的影響,除了細胞、培養基和載體等影響因素外,另外一項非常重要的因素便是DNA的質量。為了比較不同廠家的轉染效率,我們分別從三家不同的供應商購買了質粒制備試劑盒來制備pEGFP-N3質粒DNA,并通過不同的方法將制備的pEGFP-N3質粒轉運至NIH-3T3細胞。pEGFP-N3質
覆蓋更寬廣的領域轉染試劑
Roche的FuGENE 6 轉染試劑低毒高效、使用方便,應用細胞株已達500多種,可謂有口皆碑——即使近10年來Roche在試劑領域甚為低調甚少宣傳,一支獨秀的FuGENE 6 依然讓Roche保持在轉染領域數一數二的地位。經過10年的沉積,如今Roche新推出FuGENE HD轉染試
覆蓋更寬廣的領域轉染試劑
FuGENE HD 轉染試劑:覆蓋更寬廣的領域?Roche的FuGENE 6 轉染試劑低毒高效、使用方便,應用細胞株已達500多種,可謂有口皆碑——即使近10年來Roche在試劑領域甚為低調甚少宣傳,一支獨秀的FuGENE 6 依然讓Roche保持在轉染領域數一數二的地位。經過10年的沉積,如今Ro
細胞轉染率低-轉染試劑要全背鍋嗎?
細胞轉染低都是PCR試劑的問題嗎?PCR純度不夠確實會有這樣的問題,所以選擇PCR試劑很重要 主要還是以下幾點影響:1. 其他微生物污染您覺得您養的細胞 ,不,不,不 ,可能您只知道您養的是細胞,你不知道的是您的細胞可能背著您養了一群小三,比如支原體,病毒,黑膠蟲等等,特別是支原體它可以更改細胞的特
關于盧卡斯試劑的簡介
盧卡斯試劑又稱鹽酸—氯化鋅試劑,適用于3一6個碳原子的伯 、仲、叔醇的特征鑒別。在溫水浴中試劑與叔醇,立 即反應、發熱并產生鹵代烴油狀物,該油狀物不溶于反應試劑而呈渾濁并分層。在溫水浴中試劑與仲醇反應稍慢,需幾分鐘時間,呈渾濁而分層,發熱不明顯;而試劑與伯醇在常溫下幾小時也難分層 。利用上 述反
關于親電試劑的簡介
親電試劑指在有機化學反應中對含有可成鍵電子對的原子或分子有親和作用的原子或分子。親電試劑一般都是帶正電荷的試劑或具有空的p軌道或者d軌道,能夠接受電子對的中性分子 因為親電試劑可以接受電子,所以它們是路易斯酸。大多數親電試劑為正電性,有一個原子帶正電,或有一個原子不具備八隅體電子。而電中性的親
如何優化GenMuteTM轉染試劑,提高siRNA/DNA共轉染效率?
GenMuteTM siRNA轉染試劑(Cat#SL100568)是市場上最有力的siRNA傳遞工具之一。siRNA/DNA共轉染時,siRNA的最佳濃度范圍是0.5ηM到10ηM,過多的siRNA可能導致沉默效果差的“洪水效應”,切勿使用超過20ηM的siRNA。以24孔板為例,如下步驟將對如何優
關于免疫診斷試劑的簡介
免疫診斷試劑在診斷試劑盒中品種最多,根據診斷類別,可分為傳染性疾病、內分泌、腫瘤、藥物檢測、血型鑒定等。從結果判斷的方法學上又可分為EIA、膠體金、化學發光、同位素等不同類型試劑,其中同位素放射免疫的試劑由于對環境污染比較大,目前在國際市場上已經被淘汰,國內還有少量使用。
關于轉染效率的研究
線型PEI(LinePEI,LPEI)與其衍生物用作基因轉染載體的研究比分枝狀PEI(BranchedPEI,BPEI)要早一些,過去的研究認為在不考慮具體條件,LPEI/DNA轉染復合物的細胞毒性較低,有利于細胞定位,因此與BPEI相比應該轉染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成
DEAE葡聚糖轉染試劑的功能特點
DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一,DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物,它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取,用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究,但用于穩定轉染卻不是十分可靠。
VGF(質粒轉染試劑)Fection使用說明
一、性能參數產品名稱:VigeneFection 簡稱“VGF”???? 產品貨號: FH880806濃度:1μg/μl????????????????????????? 推薦使用濃度:1μg-10μg/ml規格:50μl (贈送)????????????????????保存條件:2-8℃?,切勿放
關于化學轉染的方法介紹
1.DEAE-葡聚糖法 DEAE-葡聚糖是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一,DEAE-葡聚糖是陽離子多聚物,它與帶負電的核酸結合后接近細胞膜而被攝取,用DEAE-葡聚糖轉染成功地應用于瞬時表達的研究,但用于穩定轉染卻不是十分可靠。 2.磷酸鈣法 磷酸鈣法是磷酸鈣共沉淀轉染法,因為試劑易取得
關于瞬時轉染的優點介紹
瞬時轉染(transient transfection)是將DNA導入真核細胞的方式之一。在瞬時轉染中,重組DNA導入感染性強的細胞系以獲得目的基因暫時但高水平的表達。轉染的DNA不必整合到宿主染色體,可在比穩定轉染較短時間內收獲轉染的細胞,并對溶解產物中目的基因的表達進行檢測。 第一、操作簡
關于細胞轉染的技術介紹
國際上推出了一些陽離子聚合物基因轉染技術,以其適用宿主范圍廣,操作簡便,對細胞毒性小,轉染效率高受到研究者們的青睞。其中樹枝狀聚合物(Dendrimers)和聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的轉染性能最佳,但樹枝狀聚合物的結構不易于進一步改性,且其合成工藝復雜。聚乙烯亞胺是
關于細胞轉染的基本介紹
轉染(transfection)是細胞在一定條件下主動或被動導入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。 [1] 從本質上講,和轉化沒有根本的區別。無論是轉染還是轉化,其關鍵因素都是用氯化鈣處理大腸桿菌細胞,以提高細胞膜的通透性,從而使外源DNA分子能夠容易進入細胞內部。所以在習慣上,人們往往也通稱
關于轉染細胞篩選的介紹
1、確定抗生素作用的最佳濃度: 不同的細胞株對各種抗生素有不同的敏感性,因此在篩選前要做預試驗,確定抗生素對所選擇細胞的最低作用濃度。 1) 提前24 小時在96 孔板或24 孔板中接種細胞8 孔,接種量以第二天長成25%單層為宜,置CO2 孵箱中37℃培養過夜。 2) 將培養液換成含抗生